蘋果樹主要病害內(nèi)生拮抗真菌的篩選及拮抗特性

王萬周

摘? 要：為了篩選出蘋果樹腐爛病菌及蘋果樹炭疽病菌的內(nèi)生拮抗真菌，并研究出相關(guān)的抑菌效果。采用分離發(fā)病地區(qū)健康蘋果樹的根、莖及其根系土壤中的拮抗內(nèi)生真菌，在室內(nèi)抑菌實驗測定其對蘋果樹腐爛病菌和蘋果樹炭疽病菌的抑制作用的方法。實驗證明發(fā)酵液對蘋果樹2種病菌的抑菌率比較高，無菌濾液的熱穩(wěn)定性比較好，但是無菌濾液在100℃左右會失去生物活性。拮抗真菌對于蘋果樹腐爛病菌及蘋果樹炭疽病菌有著較強的拮抗作用，其能夠有效地預(yù)防相關(guān)疾病。

關(guān)鍵詞：蘋果樹;拮抗真菌;篩選;拮抗特性

中圖分類號：S436.611.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.11974/nyyjs.20180932059

蘋果樹屬薔薇科植物，蘋果樹腐爛病是蘋果生長發(fā)育過程中一種較為嚴(yán)重的病害，其主要是有黑腐皮殼屬真菌引起的。該病發(fā)生的區(qū)域比較廣，而且發(fā)病率高，防治困難，部分發(fā)病嚴(yán)重的果樹，枝干殘缺、嚴(yán)重時甚至?xí)У籼O果園。因此，在發(fā)展蘋果種植業(yè)時，必須要做好相關(guān)的防治工作，保證蘋果健康的生長。為此，本文通過相關(guān)的調(diào)查研究對其展開了詳細(xì)的論述，具體情況報道如下所示。

1? ? ?材料與方法

1.1? ? ?一般材料

本次研究所選取的是洛寧縣某大型蘋果種植園的發(fā)病樹的健康果樹上采集根、莖以及蘋果樹的根際土壤，進(jìn)行內(nèi)生真菌的分離。

1.2? ? ?方法

1.2.1? ? ?內(nèi)生真菌的分離和純化

內(nèi)生真菌采用的是組織塊培養(yǎng)，在實驗室中，將采集到的蘋果樹根、莖分別使用清水潔凈表面附著的雜質(zhì)然后進(jìn)行表面消毒，在消毒結(jié)束之后，使用滅菌濾紙吸干多余的水分之后，使用滅菌剪將所選取的材料切割成為若干個小段，再進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為5～6d。而根際土壤經(jīng)過晾曬、研磨后使用無菌水進(jìn)行浸泡，隨后進(jìn)行培養(yǎng)，時間也是5～6d。在培養(yǎng)過程中，為了獲得更好的調(diào)查結(jié)果，還需要注意定期對其進(jìn)行觀察，如可以采取菌絲尖端挑選法，根據(jù)菌絲的顏色、形態(tài)以及長出的先后順序等進(jìn)行對比觀察，查看這些細(xì)菌的變化情況，并做好數(shù)據(jù)記錄工作，為后期的研究工作做好充分的數(shù)據(jù)準(zhǔn)備。

1.2.2? ? ?拮抗菌株的篩選

在進(jìn)行拮抗真菌篩選時，主要采取的是平板對峙法，在篩選過程中，以蘋果樹腐爛病和蘋果樹炭疽病病原菌作為靶標(biāo)，將病原菌接種到PDA平板進(jìn)行活化，在28℃下培養(yǎng)至病原菌長滿平板，對其進(jìn)行觀察。

1.3? ? ?數(shù)據(jù)處理

本次研究所應(yīng)用到的實踐數(shù)據(jù)采用SPSS21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和顯著性分析。

2? ? ?結(jié)果與分析

本次研究從健康區(qū)蘋果樹的根莖及其根際土壤中個分離得到的真菌一共有18株，分離得到的內(nèi)生真菌分屬3個屬，其主要包含有鏈格孢屬、莖點霉屬和球殼孢屬。此外，在蘋果樹的不同部位真菌的種類和數(shù)量也存在有一定的差別，如莖部分分離的菌株數(shù)量最多，其為9株，而根部則為5株，根際土4株。這種差異性也從側(cè)面說明了蘋果樹不同部位病害發(fā)生的情況是不同的。

3? ? ?討論與結(jié)論

蘋果樹之所以出現(xiàn)病害主要是由其內(nèi)部的根、莖以及蘋果樹的根基土壤引發(fā)的。因此，在治療和預(yù)防蘋果疾病的時候，也需要從這些部位中篩選出合適的能預(yù)防蘋果樹腐爛菌和蘋果樹炭疽病的拮抗真菌。在研究過程中，本文通過實驗將這些拮抗真菌分別歸類于3個不同的屬，其中鏈格孢屬于3個屬系中生長最為旺盛的菌株，其約占總分離菌株的50%，而在對相關(guān)資料進(jìn)行研究時發(fā)現(xiàn)，本次研究與一些學(xué)者的研究是一致的，這也從側(cè)面證明了本次研究的真實性。

對于蘋果樹腐爛病菌和炭疽病來說，拮抗真菌能夠有效地抑制相關(guān)的疾病。在蘋果樹體內(nèi)運用這種真菌預(yù)防相關(guān)的疾病，相較于生物防治法來說，對環(huán)境的污染比較小，而且成本價格低。但是，當(dāng)前由于技術(shù)和認(rèn)識等方面因素的影響，對于該領(lǐng)域的研究還比較少。因此，認(rèn)為應(yīng)該加大相關(guān)研究的投入力度，林業(yè)和農(nóng)業(yè)部門要加大資金投入力度，成立專業(yè)的實驗室對相關(guān)項目進(jìn)行研究。同時，還需加強拮抗真菌的作用宣傳，使廣大果農(nóng)認(rèn)識到拮抗真菌的作用，因為在當(dāng)前的工作中，許多果農(nóng)對于拮抗真菌的認(rèn)識都不是十分的清晰，也沒有認(rèn)識到其對于果農(nóng)病害地域的重要性，在培育果樹時沒有發(fā)揮相關(guān)拮抗真菌的作用。所以說，在未來工作人員還需要做好拮抗真菌的推廣應(yīng)用工作，使更多的果農(nóng)了解該技術(shù)，并掌握該技術(shù)的應(yīng)用方法，在種植蘋果樹時應(yīng)用該技術(shù)，節(jié)省種植成本，提高病蟲害預(yù)防效果，提升果農(nóng)的經(jīng)濟(jì)效益。

對蘋果樹主要病害內(nèi)生拮抗真菌進(jìn)行篩選，對拮抗特性進(jìn)行研究的主要目的就是為了提高蘋果樹的抗病能力，使其能夠更加健康的成長，這樣才能真正的提高蘋果產(chǎn)量，為果農(nóng)帶來更大的經(jīng)濟(jì)效益，提升蘋果的質(zhì)量，為蘋果種植業(yè)的發(fā)展注入新的活力。

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