兩種提取油對(duì)胃潰瘍小鼠的胃酸分泌水平及胃蛋白酶活性的影響比較

周志林，梅 勇，戴 軍，楊旭輝，趙志輝

(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院 普通外科， 湖北 武漢 430077)

胃潰瘍是中國(guó)人群常見病、多發(fā)病之一。潰瘍可發(fā)生在胃、十二指腸，也可發(fā)生在食管下端、胃-空腸吻合口附近以及美克爾憩室內(nèi)異位胃黏膜上,其形成均與胃酸和胃蛋白酶的消化作用有關(guān)，故稱為消化性潰瘍。其危害主要表現(xiàn)在久病不治或治療不當(dāng)帶來的并發(fā)癥及伴隨的相關(guān)癥狀，包括潰瘍穿孔、胃出血、貧血及食欲不振、惡心、嘔吐、發(fā)熱及進(jìn)行性的消瘦等。胃酸是指胃液中的分泌鹽酸，胃液分泌保持在一定的量，如分泌過多，就會(huì)出現(xiàn)吞酸、反胃、吐酸水等現(xiàn)象。利用理中丸與埃索美拉唑聯(lián)合用藥治療臨床胃潰瘍，可抑制患者體內(nèi)胃酸分泌[1]；胃蛋白酶是由胃內(nèi)的胃蛋白酶原經(jīng)過胃酸活化后產(chǎn)生的，當(dāng)胃酸分泌增多時(shí)，胃蛋白酶的活性也會(huì)隨之增強(qiáng)，誘發(fā)自身消化，造成胃黏膜損傷，促進(jìn)潰瘍形成[2]。研究發(fā)現(xiàn)，多種植物提取油均可對(duì)胃黏膜產(chǎn)生保護(hù)作用[3- 5]，但尚未有研究報(bào)道植物油種類對(duì)保護(hù)胃黏膜作用的影響。因此本研究選取了胃酸及胃蛋白酶作為觀察指標(biāo)，比較了兩種提取油對(duì)胃潰瘍小鼠的治療效果，以期為胃潰瘍的臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SPF級(jí)昆明小鼠120只，雌雄各半，體質(zhì)量25～30 g[中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)：SCXK(津) 2015- 0002]。

1.1.2 主要試劑：姜油(廣州晶晶生物科技有限公司)；黃秋葵種子油(北京雅克耶提商貿(mào)有限公司)；戊巴比妥鈉(Sigma公司)；乙醇(北京通廣精細(xì)化工公司)；CMC-Na(上海翊圣生物科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物分組及處理：將小鼠分為對(duì)照組、模型組、黃秋葵種子油和姜油預(yù)防組，每組30只，分別飼養(yǎng)于不同的鼠籠中。黃秋葵種子油和姜油預(yù)防組分別給予對(duì)應(yīng)的植物油灌胃，劑量為10 mg/kg，每天1次，共7 d。最后一次灌胃給藥處理結(jié)束2 h后，模型組、黃秋葵種子油組及姜油組小鼠分別灌胃無水乙醇(0.1 mL/只)，制備急性胃潰瘍小鼠模型[6]；對(duì)照組灌胃同等劑量的0.9%氯化鈉溶液。各組小鼠禁食禁水2 h 后處死。

1.2.2 小鼠胃液總酸度測(cè)定：利用ET18酸堿滴定儀測(cè)定各組小鼠胃液總酸度。處死后取其胃液上清液0.2 mL，加入等量的蒸餾水稀釋后，向稀釋液中加入10 g/L酚酞溶液50 μL，利用0.01 mol/L NaOH滴定至終點(diǎn)(待測(cè)稀釋溶液呈現(xiàn)粉紅色，且30 s內(nèi)粉紅色不褪去)，記錄0.01 mol/L NaOH消耗的體積，計(jì)算小鼠胃液總酸度。

1.2.3 小鼠胃蛋白酶活性測(cè)定：取各組小鼠胃黏膜組織勻漿上清液樣本，利用 BCA法測(cè)定其蛋白含量，用無機(jī)磷測(cè)定法測(cè)定小鼠胃黏膜胃蛋白酶的活性，按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 小鼠胃液總酸度測(cè)定

模型組小鼠胃液總酸度較對(duì)照組高(P<0.001)；與模型組相比，黃秋葵種子油組和姜油組小鼠胃液總酸度降低(P<0.001)；黃秋葵種子油組小鼠胃液總酸度低于姜油組(P<0.001)(表1)。

表1 各組小鼠胃液總酸度

*P<0.05 compared with control group；#P<0.05 compared with model group；△P<0.05 compared with ginger oil group.

2.2 小鼠胃蛋白酶活性測(cè)定

模型組小鼠胃蛋白酶活性較對(duì)照組高(P<0.001)；與模型組相比，黃秋葵種子油組和姜油組小鼠胃蛋白酶活性降低(P<0.001)；黃秋葵種子油組小鼠胃蛋白酶活性低于姜油組(P<0.001)(表2)。

表2 各組小鼠胃蛋白酶活性

*P<0.05 compared with control group；#P<0.05 compared with model group；△P<0.05 compared with ginger oil group.

3 討論

胃酸指胃液中的鹽酸，當(dāng)生活不規(guī)律、外科手術(shù)或細(xì)菌感染等情況時(shí)，大腦皮質(zhì)對(duì)胃酸分泌神經(jīng)的控制作用受到影響，胃酸分泌增多。胃酸是最常見的內(nèi)源性損傷因子之一，胃酸過多會(huì)導(dǎo)致胃黏膜受損，甚至形成胃潰瘍[7]。黃芪甲苷可以減少實(shí)驗(yàn)大鼠胃酸的分泌，促進(jìn)胃黏膜細(xì)胞的再生[8]。胃酸和胃蛋白酶是胃潰瘍形成過程中主要的攻擊因子[9]。因此本實(shí)驗(yàn)選取了胃液總酸度及胃蛋白酶作為觀察指標(biāo)。

本實(shí)驗(yàn)觀察了黃秋葵種子油和姜油對(duì)無水乙醇誘導(dǎo)型胃潰瘍小鼠胃酸分泌水平及胃蛋白酶活性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黃秋葵種子油和姜油均可抑制無水乙醇所致的胃潰瘍小鼠胃酸分泌，使其胃蛋白酶活性降低。推斷因?yàn)辄S秋葵種子油及姜油中都含有大量抗氧化成分，抗氧化在保護(hù)胃黏膜方面有重要作用[10]，可降低組織中的脂質(zhì)過氧化物，起到保護(hù)胃黏膜作用。實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，黃秋葵種子油組小鼠的胃酸及胃蛋白酶水平均低于姜油組，提示灌胃同等劑量的黃秋葵種子油對(duì)無水乙醇誘導(dǎo)型胃潰瘍小鼠胃黏膜的保護(hù)作用較姜油強(qiáng)。其機(jī)制可能為黃秋葵種子中總黃酮的含量較高，黃酮具備較強(qiáng)的抗氧化作用[11]。因此對(duì)胃黏膜的保護(hù)作用更強(qiáng)。

綜上所述，兩種植物提取油均對(duì)無水乙醇誘導(dǎo)型胃潰瘍具有一定的治療作用，同等劑量的黃秋葵種子油對(duì)胃黏膜的保護(hù)作用更強(qiáng)。兩種植物油劑量與藥理作用之間的關(guān)系有待進(jìn)一步研究。