真菌性鼻竇炎患者血清半乳甘露聚糖抗原水平及其臨床意義

張宏

摘要 目的：探討真菌性鼻竇炎患者血清半乳甘露聚糖（GM）抗原水平及其臨床意義。方法：收治真菌性鼻竇炎患者54例作為研究組，另選取非真菌性鼻竇炎患者43例作為對(duì)照組。檢測(cè)兩組患者手術(shù)前后GM抗原的水平。結(jié)果：兩組患者術(shù)前血清GM抗原水平對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組患者術(shù)后的血清GM抗原水平明顯低于術(shù)前（P<0.05）。GM試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果與真菌性鼻竇炎的一致性較好。結(jié)論：通過(guò)GM試驗(yàn)可以有效反應(yīng)真菌性鼻竇炎的感染程度，可以成為其早期、快速、準(zhǔn)確的診斷指標(biāo)之一。

關(guān)鍵詞 真菌性鼻竇炎；血清半乳甘露聚糖抗原；臨床意義

真菌性鼻竇炎又名霉菌性鼻竇炎，是耳鼻咽喉頭頸外科常見(jiàn)的一種特異性感染性疾病。流行病學(xué)資料表明，隨著抗生素和皮質(zhì)激素的廣泛使用，鼻竇真菌性感染的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，其中真菌性鼻竇炎約占所有鼻竇手術(shù)的10%左右。近年來(lái)，隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)對(duì)真菌性鼻竇炎認(rèn)知及研究的深入，CT、MRI等影像學(xué)的進(jìn)展和鼻內(nèi)鏡在臨床得到廣泛應(yīng)用，使鼻竇真菌病的診斷率得到了明顯提升。但真菌性鼻竇炎的早期癥狀不明顯，且缺乏特異性的影像學(xué)資料，常被誤診而耽誤患者治療甚至加重病情，故確診需要術(shù)后病理及真菌培養(yǎng)。因此，臨床尋找一種快速有效的檢測(cè)方法來(lái)確診真菌性鼻竇炎是目前臨床工作者亟待解決的問(wèn)題。本次研究選取了本院收治的真菌性鼻竇炎患者作為研究對(duì)象，旨在探討血清半乳甘露聚糖（GM）抗原水平及在真菌性鼻竇炎診斷中的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

2015年2月-2017年2月收治鼻竇炎患者54例作為觀察對(duì)象，將其作為研究組，同時(shí)依據(jù)術(shù)后病理檢查證實(shí)為非真菌性鼻竇炎的患者43例作為對(duì)照組。研究組男26例，女28例；年齡21～78歲，平均（62.43±10.74）歲；按照疾病類型可分為真菌球型42例，變應(yīng)性真菌型8例，慢性侵襲性真菌性鼻竇炎4例。對(duì)照組，男23例，女20例；年齡19～77歲，平均（62.51±10.22）歲；根據(jù)疾病類型分為鼻中隔偏曲19例，鼻息肉14例，慢性鼻竇炎10例。兩組患者性別、年齡等基本資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），有明顯可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①所選患者入院后均依據(jù)病史、鼻內(nèi)鏡檢查、影像學(xué)檢查及術(shù)后病理檢查證實(shí)診斷；②患者及家屬了解研究?jī)?nèi)容和目的，明確治療風(fēng)險(xiǎn)，愿意簽署知情同意書，并經(jīng)本院醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并精神或神經(jīng)類疾?。虎诤喜⑿母文I等全身重要器官疾?。虎劢?4～48 h內(nèi)有接受血液制品和真菌類制品等藥物進(jìn)行治療；④并發(fā)真菌性肺炎、真菌性陰道炎等其他系統(tǒng)的真菌感染者；⑤妊娠期或哺乳期婦女。

方法：①標(biāo)本采集：所選患者均于禁食禁水12 h后在本院檢驗(yàn)科抽取靜脈血5 mL，置于抗凝管中，在4℃條件中靜置60min后，以3000 r/min的離心速度離心10 min，取上清液分裝于Eppendorf管中并標(biāo)記，置-80℃冰箱冷凍保存，待測(cè)。②血清GM值檢測(cè)：GM試驗(yàn)采用Platelia曲霉診斷試劑盒，具體方法如下：將試劑盒所配備的標(biāo)準(zhǔn)血清A管、陽(yáng)性對(duì)照血清B管、陰性對(duì)照血清C管及待檢患者血清D1-5管各300μL血清加100μL處理液（R7）混勻，100℃水浴3 min，13 000 r/min離心10min，取上清液備用。在已包被EB-A2的微孔板內(nèi)加入50μL結(jié)合液（R6），取50μL處理后的上清液于微孔板中，以R3、R4、R5作對(duì)照，封口膜封口。以37℃水浴或孵育90min，后去封口膜，用Tris-NaCl沖洗液反復(fù)清洗微孔板6次?？焖俦芄?，每孔加入顯色液200μL（顯色液R9：R8=1：50）顯色，避光室溫作用（30±5）min，每孔加入100μL反應(yīng)終止液（R10），在450/620 nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀上讀取吸光度（A值，30min內(nèi)）?；颊哐錑M值計(jì)算公式=患者血清A值/標(biāo)準(zhǔn)血清A值，GM值<0.5為陰性，兩次不同時(shí)點(diǎn)連續(xù)采集樣本A值>0.5或單次A值>0.8判斷為陽(yáng)性。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：數(shù)據(jù)分析采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS 21.0，計(jì)量資料采用（x±s）進(jìn)行表示，結(jié)果比較采用t進(jìn)行檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用（%）進(jìn)行表示，結(jié)果比較采用X²進(jìn)行檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

兩組患者治療前后血清GM抗原水平的比較：兩組患者術(shù)前血清GM抗原水平對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組患者術(shù)后的血清GM抗原水平明顯低于術(shù)前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。對(duì)照組患者的血清GM抗原水平較術(shù)前無(wú)明顯變化（P>0.05）。研究組患者術(shù)后與對(duì)照組患者血清GM抗原水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。

GM試驗(yàn)診斷結(jié)果及診斷能力分析：以GM試驗(yàn)試劑盒所標(biāo)注的0.5為臨界值時(shí)，研究組患者有40例患者GM值>0.5，對(duì)照組患者有7例患者GM值>0.5，其敏感性為74%，特異性為84%，診斷符合度為78%，說(shuō)明GM試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果與真菌性鼻竇炎的一致性較好，見(jiàn)表2和表3。

討論

真菌性鼻竇炎是一種由多種真菌感染引起的慢性炎癥，其致病菌主要是曲霉菌，約占所有致病菌的>80%。真菌性鼻竇炎多發(fā)生于機(jī)體免疫力嚴(yán)重低下的患者。近年來(lái)隨著免疫缺陷患者數(shù)目的增多，抗生素、免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素等藥物的廣泛使用及環(huán)境惡化等，該病的發(fā)生率呈明顯上升趨勢(shì)。目前臨床上診斷真菌性鼻竇炎主要給予患者的癥狀體征、病程、?？茩z查及影像學(xué)、病理學(xué)和真菌學(xué)方面的檢查結(jié)果，但對(duì)于缺乏典型癥狀、體征、影像學(xué)檢查的病例，常規(guī)檢查方法還存在著明顯盲區(qū)，最終確診仍需要術(shù)后病理及真菌學(xué)方面的檢查。有一項(xiàng)最新研究報(bào)道顯示，26.6%的慢性鼻竇炎、鼻息肉患者經(jīng)真菌培養(yǎng)和組織病理學(xué)檢查后確診為真菌性鼻竇炎。說(shuō)明真菌性鼻竇炎被誤診率較高，而真菌性鼻竇炎的主要治療方式是手術(shù)治療，誤診時(shí)間過(guò)長(zhǎng)并不有利于患者疾病的快速康復(fù)，因此，尋找一種早期且快速有效的方法診斷真菌性鼻竇炎是目前臨床工作者應(yīng)當(dāng)重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題。

GM試驗(yàn)是運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖，其在內(nèi)科真菌感染的診斷上應(yīng)用較為廣泛，是侵襲性曲霉菌病的早期診斷的重要指標(biāo)之一，尤其在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高。GM試驗(yàn)有別于傳統(tǒng)診斷方法，被認(rèn)為是早期、無(wú)創(chuàng)、可靠的診斷方法，目前已成為深部真菌感染的常規(guī)檢查項(xiàng)目，但在真菌性鼻竇炎的應(yīng)用報(bào)道仍較少。半乳甘露聚糖是曲霉菌最早釋放的抗原，因曲霉菌的細(xì)胞壁存在β（1-5）呋喃半乳糖殘基，可在菌絲生長(zhǎng)時(shí)從菌絲頂端釋放出來(lái)，且GM釋放量與菌量成正比，因此通過(guò)檢測(cè)GM值可以有效反映感染程度。有研究報(bào)告表示，GM試驗(yàn)敏感性可達(dá)50%～95%，特異性可達(dá)80%～90%，可有效診斷真菌性鼻竇炎。這項(xiàng)檢測(cè)已被美國(guó)FDA和歐洲許多國(guó)家批準(zhǔn)用于血液、腫瘤等免疫受損者中真菌性感染的診斷。本次研究中，經(jīng)手術(shù)治療后，研究組患者的血清GM抗原水平明顯低于術(shù)前，而對(duì)照組患者的血清GM抗原水平較術(shù)前無(wú)明顯變化。說(shuō)明經(jīng)手術(shù)治療后，對(duì)于真菌性鼻竇炎患者，血清GM抗原水平隨著疾病的轉(zhuǎn)歸而明顯降低，但對(duì)于非真菌性鼻竇炎患者，治療前后血清GM抗原水平并無(wú)明顯變化，從結(jié)果可以看出，通過(guò)檢測(cè)GM值可以有效反映真菌性鼻竇炎患者的感染程度。同時(shí)本次研究中，以GM試驗(yàn)試劑盒所標(biāo)注的0.5為臨界值時(shí)，GM試驗(yàn)的敏感性74%，特異性為84%，診斷符合度78%，與上述研究報(bào)告結(jié)果相似，說(shuō)明GM試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果與真菌性鼻竇炎的一致性較好。