UV-Vis法測(cè)定艾司奧美拉唑鈉中的有色雜質(zhì)

曹 衛(wèi) ，郭夢(mèng)玲，胡情姣

(南京海融醫(yī)藥科技股份有限公司，江蘇 南京 211100)

艾司奧美拉唑鈉(Esomeprazole Sodium)，化學(xué)名5-甲氧基-2-[(S)-[(4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基)甲基]亞硫?；鵠1H-苯并咪唑鈉鹽，是奧美拉唑的S-異構(gòu)體，其對(duì)應(yīng)制劑注射用艾司奧美拉唑鈉是第一個(gè)應(yīng)用與臨床的光學(xué)異構(gòu)體質(zhì)子泵抑制劑，臨床上主要用于胃潰瘍、十二指腸潰瘍、消化道食管炎以及胃炎的治療[1]。該品種目前已收載于2015版中國(guó)藥典中，其消旋體奧美拉唑已收載于美國(guó)藥典(USP)、歐洲藥典(EP)等多個(gè)藥典中，以上各標(biāo)準(zhǔn)中均針對(duì)有色雜質(zhì)進(jìn)行了質(zhì)控。

溶液顏色檢查法是控制原料及注射劑、口服溶液、滴眼液和滴耳液等制劑中有色雜質(zhì)限量的方法，藥品的顏色與藥品本身的性質(zhì)、純度、雜質(zhì)的含量有著密切的關(guān)系。該法可以簡(jiǎn)易、直觀、快速地判斷藥品中有色雜質(zhì)的量，并與通常采用的HPLC 法測(cè)定有關(guān)物質(zhì)相結(jié)合，可以從兩個(gè)不同的角度來(lái)控制藥品質(zhì)量，兩者可互相補(bǔ)充，不能相互替代[2]。溶液顏色檢查法的第二法為紫外-可見(jiàn)分光光度法，通過(guò)測(cè)定藥品在某一波長(zhǎng)處的吸光度來(lái)控制樣品溶液的顏色或有色雜質(zhì)，為本次實(shí)驗(yàn)所采用的的檢驗(yàn)方法。

1 儀器與試藥

UV-2600紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，日本島津公司；BT125D分析天平，德國(guó)賽多利斯公司；分析級(jí)二氯甲烷；分析級(jí)甲醇；艾司奧美拉唑鈉原料藥(批號(hào)：170501、170502、170503)，浙江震元制藥有限公司；雜質(zhì)F(批號(hào)41313)，英國(guó)皇家化學(xué)協(xié)會(huì)(LGC)；雜質(zhì)G(批號(hào)115407)，英國(guó)皇家化學(xué)協(xié)會(huì)(LGC)。

2 文獻(xiàn)對(duì)比研究

2.1 各類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比解讀

將中國(guó)藥典2015年版艾司奧美拉唑鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[3]、USP40奧美拉唑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[4]、EP9.0奧美拉唑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[5]中吸光度雜質(zhì)的測(cè)定方法進(jìn)行對(duì)比匯總，匯總結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 測(cè)定方法對(duì)比分析匯總

對(duì)表1中信息進(jìn)行解讀：①不同藥典方法均采用紫外-可見(jiàn)分光光度法來(lái)控制雜質(zhì)吸光度；②不同藥典方法原料藥的濃度一致，均為20mg/mL，但稀釋劑不一樣，其中奧美拉唑稀釋劑為二氯甲烷，艾司奧美拉唑鈉稀釋劑為甲醇，需考察不同稀釋劑對(duì)雜質(zhì)吸光度的影響；③奧美拉唑在440nm波長(zhǎng)處進(jìn)行控制，僅控制雜質(zhì)F和雜質(zhì)G，艾司奧美拉唑鈉在440nm和650nm雙波長(zhǎng)進(jìn)行控制，控制了各自波長(zhǎng)所有可能的產(chǎn)生吸光度的雜質(zhì)(包括雜質(zhì)F和G)；④僅對(duì)比440nm，奧美拉唑的吸光度≤0.10，艾司奧美拉唑鈉的吸光度≤0.05，但因各自稀釋劑不一樣，且吸光度值可能隨著稀釋劑的變化而變化，還需研究對(duì)比何種限度更為嚴(yán)格；⑤艾司奧美拉唑鈉配制后均需立即檢測(cè)，初步表明本品的溶液穩(wěn)定性可能不好，需針對(duì)樣品溶液穩(wěn)定性進(jìn)行研究。

2.2 稀釋劑與限度的考察

用甲醇和二氯甲烷作為稀釋劑，分別配制雜質(zhì)F、雜質(zhì)G、艾司奧美拉唑鈉的濃度為3.5μg/mL、3.5μg/mL、20mg/mL的待測(cè)溶液，其中雜質(zhì)F和G的量均相當(dāng)于艾司奧美拉唑鈉的175×10-6，模擬奧美拉唑雜質(zhì)F和G的限度進(jìn)行配制(奧美拉唑要求雜質(zhì)F和雜質(zhì)G之和不得過(guò)350×10-6)。取上述各種溶液，立即照UV-Vis法，在440nm和650nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 稀釋劑對(duì)比考察結(jié)果

由表2數(shù)據(jù)得知：①艾司奧美拉唑鈉在甲醇中溶解度大于二氯甲烷，不同稀釋劑的雜質(zhì)吸光度存在差異；②在440nm波長(zhǎng)處，以二氯甲烷為稀釋劑時(shí)，雜質(zhì)F和雜質(zhì)G的吸光度總和為0.098，與奧美拉唑要求的吸光度限度一致(0.10)；在以甲醇為稀釋劑時(shí)，雜質(zhì)F和雜質(zhì)G的吸光度總和為0.075，雖小于奧美拉唑要求的吸光度限度，但已超過(guò)艾司奧美拉唑鈉要求的吸光度限度(0.05)；③在650nm波長(zhǎng)處，雜質(zhì)F、G和供試品溶液均未有明顯吸收；④艾司奧美拉唑鈉條件下為雙波長(zhǎng)控制，從安全性角度考慮，艾司奧美拉唑鈉的有色雜質(zhì)控制相比奧美拉唑更為嚴(yán)格，結(jié)合樣品的溶解性，可制定艾司奧美拉唑鈉的雜質(zhì)吸光度采用與藥典一致的雙波長(zhǎng)控制方法，具體方法與限度可與中國(guó)藥典保持一致。

3 方法的驗(yàn)證與檢測(cè)

3.1 檢測(cè)方法

取本品，加甲醇是溶解并稀釋至20mg/mL的溶液，立即照UV-Vis法，在440nm和650nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，吸光度均不得過(guò)0.05。

3.2 雜質(zhì)F與G的線(xiàn)性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取雜質(zhì)F和雜質(zhì)G各適量，分別加甲醇溶解并稀釋制得濃度分別為0.7,1.4,2.8,3.5,7.0,10.0μg/mL的溶液，作為線(xiàn)性考察溶液(1)～(6)；取溶液(1)～(6)，照UV-Vis法，在440nm和650nm的波長(zhǎng)處測(cè)定。以各成分的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得雜質(zhì)F的回歸方程為y = 0.0106x + 0.001(r=0.9993)，雜質(zhì)G的回歸方程為y = 0.0105x + 0.0012(r=0.9995)。結(jié)果表明，雜質(zhì)F和雜質(zhì)G在0.7μg/mL～10.0μg/mL的濃度范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。

3.3 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“3.2”項(xiàng)下的線(xiàn)性考察溶液(4)，并照“3.1”項(xiàng)下方法配制供試品溶液，于室溫下放置，分別于0，0.5，1，2h取樣，在440nm和650nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，結(jié)果，兩種波長(zhǎng)下，供試品溶液、雜質(zhì)F溶液、雜質(zhì)G溶液在2h內(nèi)的吸光度均無(wú)明顯變化，該方法穩(wěn)定性良好。

3.3 樣品測(cè)定

取3批艾司奧美拉唑鈉各適量，按“3.1”項(xiàng)下方法進(jìn)行配制及檢測(cè)，結(jié)果，3批樣品在440nm和650nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，吸光度均小于0.05。

4 討論

溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，雜質(zhì)F、雜質(zhì)G和供試品溶液的吸光度均在2h內(nèi)保持穩(wěn)定，短期內(nèi)并未發(fā)現(xiàn)預(yù)期的不穩(wěn)定現(xiàn)象，穩(wěn)妥起見(jiàn)，測(cè)定時(shí)間保持與中國(guó)藥典方法要求一致的配制后立即測(cè)定。

因在440nm波長(zhǎng)處除了測(cè)定雜質(zhì)F和雜質(zhì)G的吸光度，還可測(cè)定艾司奧美拉唑鈉中其他可能引入或降解產(chǎn)生的未知有色雜質(zhì)，650nm波長(zhǎng)同理；同時(shí)，由于藥品顏色往往不是單一波長(zhǎng)所能表現(xiàn)的，所以在單一波長(zhǎng)處的吸光度不能完全反應(yīng)藥品顏色的全部特征和有色雜質(zhì)的含有量，故艾司奧美拉唑鈉中有色雜質(zhì)可采用與中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)一致的雙波長(zhǎng)檢測(cè)，而不僅僅是單波長(zhǎng)下的已知雜質(zhì)F和G的檢測(cè)。該方法簡(jiǎn)便、靈敏且準(zhǔn)確，可用于艾司奧美拉唑鈉中有色雜質(zhì)的測(cè)定。