老年2型糖尿病腎病患者尿液足細胞 血清胱抑素C 血清同型半胱氨酸水平與腎功能的相關(guān)性

馬建和 孫繼云

糖尿病是一種最常見的代謝疾病，其主要臨床特征為血糖水平升高，患者因長期高血糖狀態(tài)而多并發(fā)微小血管病變，進而引起眼底、肺部等部位病變[1-2]。2型糖尿病發(fā)病隱匿，患者多因合并其他并發(fā)癥而入院就診，糖尿病腎病作為2型糖尿病的一種重要并發(fā)癥，預后不佳[3-5]。因此，有效的早期診斷指標對糖尿病腎病患者早期診斷、干預，降低糖尿病腎病患者腎病的發(fā)生和進展具有重要意義。近年來有文獻[6-7]報道，老年糖尿病患者尿液足細胞水平、血清胱抑素C(serum cystatin C ，Cys C)、 血清同型半胱氨酸(serum homocysteine ，Hcy)水平異常。足細胞是腎小球濾過屏障的重要組成部分，尿液足細胞水平是腎功能的有效評估指標，但關(guān)于尿液足細胞計數(shù)水平異常與腎功能相關(guān)性的研究報道較少。本研究就老年糖尿病患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平與腎功能的相關(guān)性及其相關(guān)強度展開分析，旨在為2型糖尿病腎病腎損害的診斷和治療提供科學依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取首都醫(yī)科大學附屬地壇醫(yī)院2015年6月至2017年6月收治的98例老年2型糖尿病腎病患者為觀察組，納入標準：①患者診斷均符合中華醫(yī)學會糖尿病學分會制定的糖尿病腎病診斷標準[8-9]；②無合并嚴重的肝臟、肺等實質(zhì)性組織臟器疾病，心腦血管指標檢查未見明顯異常。排除標準：①1型糖尿病的患者[10]；②合并嚴重并發(fā)癥的患者；③合并嚴重免疫系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)疾病或惡性腫瘤者；④伴有肺結(jié)核、艾滋病等傳染性疾病的患者。98例2型糖尿病腎病患者Mogensen臨床分期[11]：Ⅰ期10例，Ⅱ期23例，Ⅲ期35例、Ⅳ期25例，Ⅴ期5例。選取同期于我院體檢，且無糖尿病、腎臟疾病的老年患者98例為對照組。兩組患者年齡均>60歲，觀察組患者年齡為60～78歲，對照組患者年齡為61～79歲。兩組患者在性別、年齡等一般資料比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具可比性。詳見表1。本次試驗經(jīng)本院倫理委員會批準進行。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 方法 檢測并比較兩組患者尿足細胞、Cys-c、 Hcy水平以及腎功能指標：肌酐(creatinine, Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、β2微球蛋白(β2-microglobulin, β2-MG)、尿酸(urine acid, UA)。采用Pearson相關(guān)性分析尿足細胞、血清Cys-c、血清Hcy水平與腎功能指標的相關(guān)性。所有數(shù)據(jù)均由2名醫(yī)務工作人員整理并核對。

1.3 檢測方法 觀察組患者均于清晨抽取空腹肘靜脈血3.0 mL，對照組于體檢當天取空腹肘靜脈血3.0 mL，轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，離心半徑為10 cm，離心時間為10 min，離心完成后取血清樣品于-70℃冰箱中保存待檢測。所有患者留取100 mL晨尿,將其置細胞涂片離心機制成尿液涂片,將涂片采用小鼠單克隆抗人足細胞標記蛋白-podocalyxin(PCX)抗體進行間接免疫熒光染色，在200倍藍光激發(fā)顯微鏡下綠色熒光染色圓形或橢圓形數(shù)為足細胞數(shù)，觀察上、下、左、右、中 5 個部位 20 個高倍視野下尿足細胞數(shù)量并記錄，取其平均值即為每個研究對象尿沉渣細胞涂片尿足細胞數(shù)量。采用乳膠增強免疫比濁法檢測血清Cys-c水平。采用循環(huán)酶法檢測患者血清同型半胱氨酸Hcy平，試劑盒采用上?；鈱崢I(yè)有限公司提供的人Hcy檢測試劑盒；使用AU400全自動生化分析儀檢測腎功能指標：Cr、BUN、β2-MG、UA。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平比較 觀察組患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳見表2。

2.2 兩組患者腎功能水平比較 觀察組患者腎功能指標：Cr、BUN、β 2-MG、UA均高于對照組患者，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳見表3。

表2 兩組患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平比較

注：Cys C為血清胱抑素C;Hcy為血清同型半胱氨酸

表3 兩組患者腎功能水平比較

注： Cr為血清肌酐，BUN為血清尿素氮，β2-MG 為血清β2微球蛋白，UA為血清尿酸。

2.3 尿液足細胞水平與腎功能指標相關(guān)性分析 以觀察組受試對象為單位，采用簡單散點圖擬合尿液足細胞水平與4項腎功能指標：(Cr、BUN、β2-MG、UA)的線性關(guān)系，并通過Pearson雙變量相關(guān)性分析結(jié)果顯示,尿液足細胞水平與Cr(r=0.732,P=0.001)、BUN(r=0.680,P=0.004)、β2-MG(r=0.652,P=0.010)、UA(r=0.757,P<0.001)均呈正相關(guān)。詳見圖1。

圖1 尿液足細胞水平與腎功能指標水平散點圖

注：1a為尿液足細胞水平與肌酐水平散點分布圖；1b為尿液足細胞水平與尿素氮水平散點分布圖；1c為尿液足細胞水平與β2微球蛋白水平散點分布圖；1d為尿液足細胞水平與尿酸水平散點分布圖

2.4 血清Cys C水平與腎功能指標相關(guān)性分析 以觀察組受試對象為單位，采用簡單散點圖擬合血清Cys C水平與4項腎功能指標：(Cr、BUN、β2-MG、UA)的線性關(guān)系，并通過Pearson雙變量相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清Cys C水平與Cr(r=0.757,P<0.001)、BUN(r=0.721,P=0.001)、β2-MG(r=0.674,P=0.003)、UA(r=0.781,P<0.001)均呈正相關(guān)。詳見圖2。

圖2 血清Cys C水平與腎功能指標水平散點圖

注：2a 為血清Cys C水平與肌酐水平散點分布圖；2b 為血清Cys C水平與尿素氮水平散點分布圖；2c為血清Cys C水平與β2微球蛋白水平散點分布圖；2d為血清Cys C水平與尿酸水平散點分布圖

2.5 血清Hcy水平與腎功能指標相關(guān)性分析 以觀察組受試對象為單位，采用簡單散點圖擬合血清Hcy水平與4項腎功能指標：(Cr、BUN、β2-MG、UA)的線性關(guān)系，并通過Pearson雙變量相關(guān)性分析結(jié)果顯示,血清Hcy水平與Cr(r=0.703,P=0.001)、BUN(r=0.711,P=0.004)、β2-MG(r=0.679,P=0.013)、UA(r=0.736,P<0.001)均呈正相關(guān)(r>0，P<0.05)。詳見圖3。

圖3 血清Hcy水平與腎功能指標水平散點圖

注：3a 血清Hcy水平與肌酐水平散點分布圖；3b 血清Hcy水平與尿素氮水平散點分布圖；3c血清Hcy水平與β2微球蛋白水平散點分布圖；3d血清Hcy水平與尿酸水平散點分布圖

3 討論

2型糖尿病患者血糖水平持續(xù)增高可引起血液微環(huán)境改變，其中脂代謝紊亂系最常見的一種繼發(fā)血液微環(huán)境改變[12-13]。糖尿病患者循環(huán)系統(tǒng)高糖和高脂狀態(tài)可導致血液粘滯度增加，大量免疫球蛋白和纖維蛋白原等在腎小球血管內(nèi)膜下不斷沉積，進而導致腎小球小動脈血管壁結(jié)構(gòu)改變，彈性下降，最終導致腎小球血流動力學發(fā)生改變[14-16]。糖尿病腎病患者腎小球結(jié)構(gòu)改變后腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)和激活血小板和凝血過程激活，進而引起尿酸鹽結(jié)晶沉積于血管壁，損傷血管內(nèi)膜，并引起多種心血管相關(guān)疾病，預后不佳[17-19]。目前尚缺失糖尿病腎病腎功能影響因素的研究。

本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組患者的尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平均顯著高于對照組，且各腎功能指標Cr、BUN、β 2-MG、UA均顯著升高(P<0.05)，分析其原因是腎小球發(fā)生病變時：①足細胞密度降低，對清蛋白等的濾過功能減弱，因而患者可出現(xiàn)蛋白尿，足細胞可脫落并隨尿液被排出體外；②Cys C經(jīng)腎小球濾過并由腎小管上皮細胞重吸收率下降，進而導致血清Cys C水平升高；③糖尿病腎病患者由于腎臟功能障礙激活腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)和激活血小板和凝血過程，患者血管損傷風險增加，當血管損傷后瘢痕修復并進展為粥樣硬化的過程中，患者血清Hcy水平則相應增高；④Cr、BUN、β2-MG、UA均由腎臟濾過重吸收，當腎臟發(fā)生損傷時其重吸收率降低，進而導致水平升高。

龔江等[20]的研究表明，血清Cys C、Hcy 對2 型糖尿病腎病早期診斷治療和預后評估有重要的臨床意義；董閃閃等[21]的研究報道表明，尿液足細胞與糖尿病腎病患者機體氧化應激水平相關(guān)，2型糖尿病合并不同程度腎臟功能障礙患者尿液足細胞水平存在顯著差異，與本研究結(jié)果相符，但2項研究均未對異常指標腎臟功能指標的相關(guān)性進行分析。本次研究通過對尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平分別于糖尿病腎病患者Cr、BUN、β2-MG、UA水平進行相關(guān)性分析顯示，尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平分別與Cr、BUN、β2-MG、UA均呈正相關(guān)，分析其原因主要是尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平均與腎臟濾過功能有關(guān)。

綜上所述，老年糖尿病腎病患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平與腎功能的相關(guān)性顯著，且各指標水平間呈明顯的正相關(guān)。