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    UPLC法同時測定飲料中甜味劑和防腐劑的研究

    2018-12-10 09:11:50趙耀趙卉張婷婷
    農業(yè)科技與裝備 2018年1期
    關鍵詞:分離甜味劑防腐劑

    趙耀 趙卉 張婷婷

    摘要:為快速分離飲料中的6種甜味劑和防腐劑(安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、阿斯巴甜),采用超高效液相色譜方法,選用PDA檢測器在230 nm和210 nm進行檢測。試驗結果表明:防腐劑在0.5~10.0 mg/L濃度范圍內線性關系良好,安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸定量限為2 mg/kg,阿斯巴甜定量限為10 mg/kg,回收率95.2%~102.2%。

    關鍵詞:UPLC;防腐劑;試驗;甜味劑;分離

    中圖分類號:TS207.5 文獻標識碼:A 文章編號:1674-1161(2018)01-0059-03

    防腐劑和甜味劑在食品中的應用廣泛,其中安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、阿斯巴甜的應用非常普遍。為保障食品安全,我國《GB2760-2014食品安全國家標準食品添加劑使用標準》中對防腐劑、甜味劑等添加劑的使用限量有明確規(guī)定。目前,國內外的防腐劑多組分檢測方法主要有高效液相色譜法、液相色譜-質譜法、離子色譜法、氣相色譜法,部分防腐劑因前處理條件不同而分析效率較低。為改善分析速度及分離度,采用超高效液相色譜方法,通過改變試驗條件分離賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、阿斯巴甜等6種添加劑,為快速準確檢測上述添加劑提供技術依據。

    1 材料與方法

    1.1 儀器與試劑

    Waters ACQUITY H-class UPLC超高效液相色譜儀(配二極管陣列檢測器):美國waters公司;色譜柱:Waters Symetry RP18 (2.1 mm ×100 mm,1.7 μm);電子天平:北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;超純水制備系統(tǒng):美國Milli-Q公司。

    安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、阿斯巴甜標準品由中國計量科學研究院生產;甲醇(質譜純)由美國麥克林公司生產;乙酸銨(色譜純)由國藥集團有限公司生產;色譜用水為符合《GB/T6682-2008》規(guī)定的一級水。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 樣品前處理 準確稱取樣品2 g(精確至0.01g),置于離心管中,加水25 mL,渦旋混勻后于50 ℃水浴超聲20 min。冷卻至室溫后加入亞鐵氰化鉀溶液2 mL和乙酸鋅溶液2 mL,渦旋混勻后于8 000 r/min離心5 min,將水相轉移至50 mL容量瓶中。殘渣加水20 mL溶解,渦旋后超聲5 min,離心后將水相轉移至同一容量瓶,用水定容,混勻。取適量上清液過0.22 μm的GHP濾膜,待測定。

    1.2.2 色譜條件 流動相:乙腈及水(含有20 mm乙酸銨和0.1%乙酸溶液)梯度洗脫,流速:0.3 mL/min,柱溫:35 ℃。檢測波長:在190~400 nm 之間進行全波長掃描,確定安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸檢測波長為230 nm,阿斯巴甜檢測波長為210 nm。

    為實現(xiàn)6種添加劑完全分離,梯度洗脫設計如表1所示。

    在以上色譜條件下進樣0.8 μL,以色譜峰面積外標法定量,測得6種添加劑的色譜圖,如圖1所示。

    1.2.3 標準曲線 防腐劑標準溶液均為中國計量科學研究院生產,濃度為1 000 mg/L,擴展不確定度為

    ±1%~±2%,符合配制要求。標準樣品儲存條件滿足證書要求,且在有效期范圍內。

    分別吸取上述標準溶液0.05,0.10,0.20,0.40,

    1.00 mL于100 mL容量瓶中,用水定容至刻度,配成濃度為0.5,1.0,2.0,4.0,10.0 mg/L的混合標準工作溶液。經Waters GHP 0.22 μm濾膜過濾,在1.2.2色譜條件下進樣0.8 μL,根據濃度與峰面積的關系繪制標準曲線。

    1.2.4 方法回收率及精密度 為考察方法的可靠性,對6種添加劑進行加標回收率試驗。將加標量定為10 mg/kg及20 mg/kg的樣品按照1.2.1 提取方法提取6份,計算回收率及精密度。

    2 結果與分析

    2.1 線性范圍及檢出限

    檢測結果中,色譜峰高為噪聲高3倍(S/N=3)相對應的濃度為檢出限。線性方程、相關系數、線性范圍及檢出限見表2。

    從表2可以看出,6種添加劑在線性范圍內的線性關系良好。

    2.2 方法回收率及精密度

    以飲料用品為例,通過加標回收率試驗,對方法進行回收率和精密度測定,結果見表3。

    由表3可知:6種添加劑的平均回收率為95.2%~102.2%,相對標準偏差為1.25%~3.74%(n=6)。表明該方法精密度、準確度均能滿足分析要求。

    3 結論

    在國家標準中,對安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、阿斯巴甜共6種添加劑的檢測需要4種方法(GB 5009.28-2016、GB5009.121-2016、GB5009.263-2016、GB5009.140-2016),而該方法可一次完成6種食品中添加劑的檢測,且在0.5~10.0 mg/L線性范圍內,相關系數R2>0.999。安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸的方法定量限為2 mg/kg,阿斯巴甜的定量限為10 mg/kg,回收率為95.2%~102.2%,相對標準偏差為1.25%~3.74%。另外,方法操作簡便、分析速度快,僅需2.8min即可將6種添加劑全部分離,基線分離明顯,且回收率及精密度滿足《GB/T 27404-2008 實驗室質量控制規(guī)范 食品理化檢測》要求。

    參考文獻

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