二氧化氯消毒劑對(duì)醫(yī)院常見感染菌的殺滅效果觀察

陳志勇 宋金武 張麗蓉 黎英文 鄧金花 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司 （廣東 廣州 510663）

內(nèi)容提要： 目的：觀察二氧化氯消毒劑對(duì)醫(yī)院常見感染菌的殺滅效果。方法：采用懸液定量殺菌實(shí)驗(yàn)方法，觀察二氧化氯對(duì)醫(yī)院常見感染菌的殺滅效果。結(jié)果：二氧化氯濃度為50mg/L，作用1min，對(duì)表皮葡萄球菌、糞腸球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸埃希菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌的殺滅率均為100%；二氧化氯濃度為50mg/L，作用3min，對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌的殺滅率均為100%；二氧化氯濃度為150mg/L，作用1min，對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢殺滅率為100%。結(jié)論：二氧化氯消毒劑在低濃度、短時(shí)間內(nèi)即可殺滅醫(yī)院常見感染菌。

二氧化氯是當(dāng)前被世界衛(wèi)生組織確認(rèn)的一種高效、安全、廣譜的強(qiáng)力殺菌劑，其可以殺滅一切微生物，包括細(xì)菌繁殖體、細(xì)菌芽孢、真菌、分枝桿菌和病毒等。二氧化氯對(duì)微生物細(xì)胞壁有較強(qiáng)的吸附穿透能力，可有效地氧化細(xì)胞內(nèi)含巰基的酶，同時(shí)抑制微生物蛋白質(zhì)的合成從而達(dá)到殺滅微生物的效果。

目前，二氧化氯消毒劑被廣泛用于飲用水消毒及食品工業(yè)微生物控制[1,2]。隨著應(yīng)用范圍的拓展，二氧化氯已逐步用于醫(yī)院空氣消毒及醫(yī)療器械消毒[3,4]。本課題組對(duì)二氧化氯消毒劑對(duì)醫(yī)院常見感染菌的殺滅效果進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1.材料與方法

1.1 一般材料

實(shí)驗(yàn)所用二氧化氯消毒劑由廣東環(huán)凱微生物科技有限公司提供。

實(shí)驗(yàn)指示菌為金黃色葡萄球菌（ATCC 6538）、表皮葡萄球菌（CMCC 26069）、糞腸球菌（ATCC 29212）、乙型溶血性鏈球菌（ATCC 21059）、大腸埃希菌（ATCC 25922）、鮑曼不動(dòng)桿菌（ATCC 19606）、肺炎克雷伯菌（CMCC 46117）、銅綠假單胞菌（ATCC 15442）、陰溝腸桿菌（CMCC 45301）、產(chǎn)氣腸桿菌（ATCC 13048）、白色念珠菌（ATCC 10231）、枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC 9372），均由廣東省微生物菌種保藏中心提供。

1.2 方法

1.2.1 二氧化氯濃度測(cè)定

二氧化氯消毒劑濃度測(cè)定采用《二氧化氯消毒劑衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB 26366-2010）附錄A法。

1.2.2 菌懸液制備

實(shí)驗(yàn)所用菌懸液按照2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定進(jìn)行制備。

1.2.3 中和劑鑒定

中和劑鑒定實(shí)驗(yàn)按照2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定進(jìn)行操作。

1.2.4 懸液定量殺菌實(shí)驗(yàn)

按照《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002版）中的懸液定量殺菌試驗(yàn)方法，取所需濃度的二氧化氯消毒液4.5mL置于無菌試管內(nèi)，于20?C水浴鍋中恒溫5min，加入0.5mL菌懸液，混勻并計(jì)時(shí)。作用至預(yù)定時(shí)間，取菌藥混合物0.5～4.5mL中和劑試管內(nèi)，混勻。中和作用10min，取1mL接種無菌平皿，傾注瓊脂培養(yǎng)基并混勻。所有樣本均在37?C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，對(duì)細(xì)菌繁殖體培養(yǎng)48h，對(duì)細(xì)菌芽孢培養(yǎng)72h，觀察結(jié)果。計(jì)數(shù)平板菌落數(shù)，計(jì)算殺滅率。試驗(yàn)重復(fù)3次。

2.結(jié)果

2.1 中和劑鑒定實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，用含0.5%Na2S2O3+0.3%卵磷脂+1.0%吐溫-80組成的磷酸鹽緩沖液（PBS）作為中和劑，可有效中和二氧化氯最高實(shí)驗(yàn)濃度溶液對(duì)肺炎克雷伯菌和枯草桿菌黑色變種芽孢的殘余作用，且中和劑和中和產(chǎn)物對(duì)實(shí)驗(yàn)菌及培養(yǎng)基均無影響，見表1。

表1.中和劑鑒定試驗(yàn)結(jié)果

2.2 懸液定量殺菌實(shí)驗(yàn)

二氧化氯消毒劑對(duì)醫(yī)院常見感染菌的殺滅效果如下，見表2。

表2.二氧化氯消毒液對(duì)醫(yī)院常見感染菌殺滅效果

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，二氧化氯對(duì)實(shí)驗(yàn)菌的殺滅率與作用濃度、作用時(shí)間成正比；二氧化氯濃度為50mg/L，作用1min，對(duì)表皮葡萄球菌、糞腸球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸埃希菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌的殺滅率均為100%；二氧化氯濃度為50mg/L，作用3min，對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌的殺滅率均為100%。見表3。

表3.二氧化氯消毒液對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢殺滅效果

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，二氧化氯對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢的殺滅率與作用濃度、作用時(shí)間成正比；二氧化氯作用濃度為100mg/L時(shí)，其對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢作用3min殺滅率為99.9999%；二氧化氯作用濃度為150mg/L時(shí)，其對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢作用1min殺滅率為100%；二氧化氯作用濃度為200mg/L時(shí)，其對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢作用30s殺滅率為100%。

3.結(jié)論

醫(yī)院感染的病原體主要是細(xì)菌，近年來，各個(gè)地區(qū)醫(yī)院對(duì)院內(nèi)感染細(xì)菌的分布情況均有統(tǒng)計(jì)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，在院內(nèi)感染菌中革蘭氏陰性菌占比較大，其次是革蘭氏陽性菌，居前幾位的感染菌主要是：大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白假絲酵母菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌[5,6]。在革蘭氏陽性菌中，二氧化氯對(duì)金黃色葡萄球菌的殺滅效果較弱；在革蘭氏陰性菌中，二氧化氯對(duì)銅綠假單胞菌的殺滅效果較弱；當(dāng)二氧化氯濃度為50mg/L時(shí)，作用3min，對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌及白色念珠菌的殺滅率為100%；當(dāng)二氧化氯濃度為30mg/L時(shí)，作用30s，對(duì)大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌及鮑曼不動(dòng)桿菌的殺滅率為100%。

《軟氏內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)規(guī)范》（WS 504-2016）中對(duì)二氧化氯消毒劑的消毒濃度及消毒時(shí)間做出了說明，即消毒濃度為100～500mg/L，消毒時(shí)間為3～5min。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，二氧化氯濃度為100mg/L時(shí)，對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢作用3min，殺滅率為99.9999%；二氧化氯濃度為200mg/L時(shí)，對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢作用30s，殺滅率為100%，在比規(guī)范說明中更低濃度及更短時(shí)間即可達(dá)到高水平消毒。