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    育齡婦女風疹病毒化學發(fā)光法檢測結(jié)果分析

    2018-12-08 14:54:18何衛(wèi)東劉明春陳秋月邱曉蔚楊寶圩蔡月真
    醫(yī)學信息 2018年16期

    何衛(wèi)東 劉明春 陳秋月 邱曉蔚 楊寶圩 蔡月真

    摘? ?要:目的? 使用化學發(fā)光免疫分析技術(shù)對孕前及孕早期育齡婦女進行風疹病毒定量檢測,通過對檢測結(jié)果進行分析,了解本地區(qū)孕前及孕早期婦女風疹病毒的感染狀況,為制定孕前及孕早期保健措施提供依據(jù)。方法? 對2015年5月~2018年4月來我院進行孕前檢查和孕早期建卡的1052例育齡婦女進行風疹病毒特異性抗體IgM和IgG的定量檢測,并對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析。結(jié)果? 育齡婦女中RV-IgM總陽性率為0.86%,RV-IgG總陽性率為80.13%。曾經(jīng)感染過風疹病毒或接種疫苗有保護性抗體(IgM-/IgG+)總體比例為79.46%(836/1052),對風疹病毒易感的婦女(IgM-/IgG-)總體比例為19.68%(207/1052)。孕前組及孕早期組(IgM-/IgG-)比例分別為9.20%、27.07%,總體比例為19.68%;(IgM-/IgG+)比例分別為89.43%、72.45%,總體比例為79.46%;(IgM+/IgG-)比例分別為0.46%、0,總體比例為0.19%;(IgM+/IgG+)比例分別為0.92%、0.49%,總體比例為0.67%。孕前組RV-IgM及RV-IgG陽性率高于孕早期組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論? CLIA法對風疹病毒IgM 抗體和IgG抗體的準確檢測,為診斷和隨訪風疹病毒急性感染,評估孕前及孕早期育齡婦女的免疫狀態(tài),以及為可疑育齡婦女選擇適當?shù)念A(yù)防措施提供了基本的工具和依據(jù)。RV-IgG 陽性率較高,對育齡婦女具有一定的保護作用,防治重點可放于RV-IgG陰性的育齡婦女。

    關(guān)鍵詞:化學發(fā)光免疫分析法;風疹病毒;IgM;IgG;育齡婦女

    中圖分類號: R446.6? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼: B? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI:10.3969/j.issn.1006-1959.2018.16.046

    文章編號:1006-1959(2018)16-0145-04

    Analysis of Detection Results of Rubella Virus by Chemiluminescence Method in Women of Childbearing Age

    HE Wei-dong,LIU Ming-chun,CHEN Qiu-yue,QIU Xiao-wei,YANG Bao-wei,CAI Yue-zhen

    (Department of Clinical Laboratory,Shishi Maternal and Child Health Care Hospital,Shishi 352700,F(xiàn)ujian,China)

    Abstract:Objective? To quantitatively detect rubella virus in women of pre-pregnancy and early pregnancy age by chemiluminescence immunoassay,and to analyze the results of the detection.So that to understand the status of rubella virus infection in pre-pregnancy and early pregnant women in this area,and to provide evidence for the establishment of pre-pregnancy and early pregnancy health care measures.Methods? From May 2015 to April 2018,1052 women of childbearing age who underwent prenatal examination and early pregnancy card building were examined for rubella virus specific antibody IgM and IgG,and the results were analyzed statistically.Results? The total positive rate of RV-IgM in women of childbearing age was 0.86%,and the total positive rate of RV-IgG was 80.13%.79.46% of them(836/1052)had previously been infected with rubella virus or vaccinated with protective antibodies(IgM-/IgG+).The overall proportion of women susceptible to rubella virus(IgM-/IgG-)was 19.68%(207/1052).The proportion of pre-pregnancy group and early pregnancy group(IgM-/IgG-)was 9.20% and 27.07% respectively,and the overall proportion was 19.68%.(IgM-/IgG+)ratio was 89.43%,72.45%,the overall ratio was 79.46%;(IgM+/IgG-)ratio was 0.46%,0,the overall ratio was 0.19%;The ratio of(IgM+/IgG+)was 0.92% and 0.49%,respectively,and the overall ratio was 0.67%.The positive rate of RV-IgM and RV-IgG in the pre-pregnancy group was higher than that in the early pregnancy group,the difference was statistically significant(P<0.05). Conclusion? The accurate detection of rubella virus IgM antibody and IgG antibody by CLIA method can be used to diagnose and follow up the acute rubella virus infection and to evaluate the immune status of women of pre-pregnancy and early pregnancy age,it also provides basic tools and basis for selecting appropriate preventive measures for women of pregnancy age.The positive rate of RV-IgG was higher,and it had a certain protective effect on women of childbearing age.The emphasis of prevention and treatment could be placed on women of childbearing age with negative RV-IgG.

    Key words:Chemiluminescent immunoassay;Rubella virus;IgM;IgG;Women of childbearing age

    風疹病毒(rubella virus,RV)是單鏈的RNA病毒,屬于披膜病毒科[1]。風疹引起的臨床癥狀較輕,多數(shù)情況下極少引起并發(fā)癥或癥狀不明顯[2]。人群對風疹病毒普遍敏感,人是風疹病毒的唯一宿主,感染后可以終身免疫[3]。妊娠期發(fā)生RV感染后可引起流產(chǎn)、死胎、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩、先天性畸形、新生兒中樞神經(jīng)的損害等不良后果[4]。為了提高圍生兒質(zhì)量,減少出生缺陷的發(fā)生,在十多年前,我國將TORCH檢查(包括風疹病毒)列為孕期檢查的常規(guī)項目[5]。本研究采用化學發(fā)光免疫分析法(CLIA)定量測定1052例育齡婦女風疹病毒特異性IgM及IgG抗體,現(xiàn)報道如下。

    1資料與方法

    1.1一般資料? 選取2015年5月1日~2018年4月30日來福建省石獅市婦幼保健院進行孕前檢查和孕早期建卡的1052例育齡婦女作為研究對象,其中孕前435例,孕早期617例,年齡19~41歲,平均年齡(23.50±2.80)歲。

    1.2儀器與試劑? 檢測儀器為意大利DiaSorin公司LIAISON全自動化學發(fā)光免疫分析儀。風疹病毒IgM與IgG抗體檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)及其質(zhì)控品和校準品由意大利DiaSorin公司原裝提供。其精密度、線性范圍、準確度、攜帶污染率及參考范圍等到測定參數(shù)均符合該儀器技術(shù)要求,能為臨床提供準確、可靠的依據(jù)[6]。我院參加了衛(wèi)生部室間質(zhì)評,并有嚴格的室內(nèi)質(zhì)控流程和措施。

    1.3方法

    1.3.1所有研究對象采集靜脈血3~5 ml,3000 r/min離心10 min,分離后血清樣本保存至2~8 ℃環(huán)境下貯存,在48 h內(nèi)檢測。

    1.3.2風疹病毒抗體測定? 實驗操作完全按試劑說明書和儀器操作規(guī)程進行,使用意大利DiaSorin公司LIAISON全自動化學發(fā)光免疫儀定量檢測風疹病毒特異性IgM和IgG抗體。

    1.3.3方法原理? 采用CLIA法檢測風疹病毒特異性IgM或IgG抗體。將風疹病毒抗原包被于順磁性微粒(固相載體)上,異魯米諾衍生物結(jié)合小鼠單克隆抗體形成異魯米諾-抗體示蹤物。在第1次溫育期間,校準品、樣本或質(zhì)控品中存在的風疹病毒抗體與固相載體結(jié)合。隨后第2次溫育期間,異魯米諾-抗體示蹤物與已結(jié)合在固相載體上的風疹病毒IgM或IgG發(fā)生反應(yīng)。在每次溫育后,未結(jié)合的物質(zhì)均被清洗掉。隨后,加入啟動試劑,引發(fā)閃光化學發(fā)光反應(yīng),產(chǎn)生光信號[7]。光信號和異魯米諾-抗體示蹤物的數(shù)量由光電倍增管測定為相對光單位(RLU)值,從而顯示存在于校準品、樣本或質(zhì)控品中風疹病毒IgM或IgG的濃度。

    1.3.4診斷標準? 當RV-IgM>25 AU/ml、RV-IgG>10 IU/ml時判斷為陽性。

    1.4統(tǒng)計學處理? 采用SPSSl9.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析,計數(shù)資料以(%)表示,采用?字2 檢驗,P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

    2結(jié)果

    2.1風疹病毒抗體檢測結(jié)果? 研究對象1052例育齡婦女RV-IgM總陽性率為0.86%(9/1052),RV-IgG總陽性率為80.13%(843/1052)。

    2.2孕前和孕早期婦女風疹病毒感染狀況? 根據(jù)是否懷孕及孕周分為孕前組及孕早期組,分別計算兩組RV的IgM及IgG陽性情況。在我院檢查的育齡婦女曾經(jīng)感染過風疹病毒或接種疫苗有保護性抗體(IgM-/IgG+)總體比例為79.46%(836/1052);對風疹病毒易感的婦女(IgM-/IgG-)總體比例為19.68%(207/1052)。有2例(IgM+/IgG-)可能在檢測近期初次感染了風疹病毒,另有7例(IgM+/IgG+)可能為近期感染或再發(fā)感染。孕前組及孕早期組(IgM-/IgG-)比例分別為9.20%、27.07%;(IgM-/IgG+)比例分別為89.43%、72.45%;(IgM+/IgG-)比例分別為0.46%、0;(IgM+/IgG+)比例分別為0.92%、0.49%,見表1。

    2.3孕前及孕早期婦女風疹病毒抗體IgM和IgG陽性率的情況? 比較孕前和孕早期兩組婦女風疹病毒的IgM及IgG陽性率,孕前組RV-IgM及RV-IgG陽性率均高于孕早期組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表2。

    3討論

    在妊娠前4個月期間感染風疹病毒則將引起非常嚴重的后果,如果沒有保護性免疫球蛋白,在懷孕期間感染的孕婦將會引起高風險性胚胎損害[8]。先天性風疹會引發(fā)胎兒廣泛范圍的嚴重缺陷,其中多數(shù)是永久性的,并且影響后期的發(fā)育(比如白內(nèi)障,耳聾,肝脾腫大,精神運動性抑制,骨變質(zhì),心臟病,神經(jīng)病等)[9]。胎兒和新生兒的病理性后果與病毒的致畸性以及感染發(fā)生時所處的妊娠時間相關(guān)。母體感染時的孕齡則被認為是導致宮內(nèi)傳播和胎兒損傷最為重要的決定因素。一般認為孕齡越大,風險則會越低:在懷孕前2個月感染是最高的,達到40%~60%,在隨后的第4和第5個月則會逐漸降低至10%~20%。對新生兒的臨床表現(xiàn)和病毒分離研究都證實超過妊娠中期后胎兒很少感染。

    胎兒風疹病毒感染是由母體初次感染(無論是顯性感染或是隱性感染)過程中病毒在宮內(nèi)進行傳播,即血液中的病毒首先感染胎盤,隨后感染胚胎。母體繼發(fā)感染病毒在宮內(nèi)傳播非常少見,這表明母體的免疫力(無論是先天獲得還是疫苗誘導獲得)會保護胎兒免受宮內(nèi)感染。母體感染會引起下列幾種情況:①胚胎未感染;②胚胎吸收,僅見于在妊娠早期階段發(fā)生的感染;③流產(chǎn);④死產(chǎn);⑤胎盤受感染而胎兒未受感染;⑥胎盤和胎兒均受感染。被感染的胎兒可能會表現(xiàn)出明顯的多器官受累,或者胎兒初期無明顯疾病,然而經(jīng)過長期的隨訪后,可發(fā)現(xiàn)胎兒聽力缺失、中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害或者有其它缺陷。

    妊娠期初次感染風疹病毒特別是在妊娠早期對胎兒的危害很大。先天性風疹綜合征(congenital rubella syndrome,CRS)是指母體感染風疹病毒引起新生兒先天性畸形的統(tǒng)稱。CRS與母體感染時間有密切聯(lián)系,在孕早期初次感染風疹病毒,發(fā)生CRS的幾率為80%左右。其中90%表現(xiàn)為聽力障礙,其次最常見的為先天性心臟病和青光眼、白內(nèi)障,少部分患者可能出現(xiàn)死胎或流產(chǎn)[10]。孕12周后感染風疹病毒,對胎兒不良影響明顯減小。

    由于20世紀90年代以后,我國風疹疫苗的廣泛應(yīng)用,育齡婦女RV-IgG陽性率進一步升高[11]。根據(jù)目前的資料預(yù)測,隨著時間的推移,風疹在人群的易感性可能呈下降趨勢。但由于我國疫苗覆蓋率不高,人工免疫效果不穩(wěn)定,生育期婦女未常規(guī)補種疫苗等因素,CRS仍將在我國持續(xù)存在。我們的資料也顯示,有2例(IgM+/IgG-)婦女可能在檢測近期初次感染了風疹病毒,另有7例(IgM+/IgG+)可能為近期感染或再發(fā)感染。需要通過對IgG抗體進行親和力的檢測,如在孕早期檢測為高親和力,則感染應(yīng)在孕前發(fā)生,對胎兒影響較小。如為低親和力,則可能為近期感染,需進一步采臍血了解有無胎兒感染。

    本研究采用CLIA法對1052例育齡婦女進行RV感染檢測,結(jié)果顯示RV-IgM陽性率為0.86%,與肖兵等[12]報道的0.96%較為一致,與趙衛(wèi)衛(wèi)等[13]報道的1.25%較為接近;RV-IgG陽性率為80.13%,與林立鵬等[14]報道的84.50%以及何天文等[5]報道的79.18%、吳敏芳[15]報道的81.36%相近。對孕前及孕早期婦女RV檢測結(jié)果進行分析,孕前組RV-IgM及IgG陽性率高于孕早期組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),與何天文等[5]報道的結(jié)果一致。

    應(yīng)用CLIA方法直接對風疹病毒特異性IgM抗體和IgG抗體進行動態(tài)定量檢測,具有特異性強、敏感性高、可信度高、簡單易行等優(yōu)點[16],可以避免胎兒流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、畸形和發(fā)育不良等問題。我們建議在孕前對風疹病毒IgM和IgG進行檢測,以便及時發(fā)現(xiàn)易感人群,對風疹病毒IgM-/IgG-的婦女,可在孕前接種疫苗,人工主動免疫。孕早期常規(guī)檢測風疹病毒抗體,如果發(fā)生了血清轉(zhuǎn)化,要警惕CRS的發(fā)生。

    綜上所述,CLIA法對風疹病毒IgM 抗體和IgG抗體的準確檢測,為診斷和隨訪風疹病毒急性感染,評估孕前及孕早期育齡婦女的免疫狀態(tài),以及為可疑育齡婦女選擇適當?shù)念A(yù)防措施提供了基本的工具和依據(jù)。RV-IgG陽性率較高,對育齡婦女具有一定的保護作用,防治重點可放于RV-IgG陰性的育齡婦女。此外,隨著我國接種風疹病毒疫苗的普及,風疹病毒IgG測試則可更廣泛的用于確定在疫苗接種后受者的血清轉(zhuǎn)換狀態(tài)。

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    收稿日期:2018-6-9;修回日期:2018-6-19

    編輯/張建婷

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