泌尿生殖道支原體感染檢測、鑒定及耐藥性分析

王晉蜀 黃夢雅 趙明丹 周汛

摘? ?要：目的? 探究泌尿生殖道支原體感染情況及對常用抗菌藥物的耐藥情況，為指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用抗菌藥物提供科學(xué)依據(jù)。方法? 本研究使用支原體培養(yǎng)、鑒定及藥敏檢測試劑盒（液基型），對臨床收集的489例疑似泌尿生殖道感染患者的標(biāo)本進行支原體培養(yǎng)、鑒定及藥敏檢測。結(jié)果? 發(fā)現(xiàn)在489例標(biāo)本中，支原體陽性有202例，陽性率為41.30%，人型支原體單一陽性有24例，占11.88%，解脲支原體單一陽性有171例，占84.65%，混合感染有7例，占3.47%。女性、男性支原體檢出率分別為52.36%、17.44%，女性明顯高于男性。陽性患者以20～35歲為主，占66.83%。支原體對交沙霉素、強力霉素和美滿霉素敏感性最高，敏感率分別為89.60%、88.12%和84.65%，對紅霉素、司巴沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星敏感性較低，敏感率分別為18.81%、10.40%、1.49%、6.44%和5.94%。結(jié)論? 本研究證實支原體感染中主要由解脲支原體感染為主。臨床應(yīng)參考藥敏結(jié)果合理用藥，經(jīng)驗用藥時交沙霉素、強力霉素和美滿霉素最好，應(yīng)避免使用司巴沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星。

關(guān)鍵詞：泌尿生殖道感染;解脲支原體;人型支原體;藥物敏感試驗;抗生素

中圖分類號：R69;R446.5? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.16.029

文章編號：1006-1959（2018）16-0098-03

Detection，Identification and Drug Resistance Analysis of Urogenital Mycoplasma Infection

WANG Jin-shu，HUANG Meng-ya，ZHAO Ming-dan，ZHOU Xun

（Chongqing Hospital of Traditional Chinese Medicine/Department of Skin and Beauty，Chongqing Academy of Traditional Chinese Medicine，Chongqing 400021，China）

Abstract：Objective? To investigate the infection of urogenital mycoplasma and the resistance to common antibiotics，and to provide scientific basis for guiding the rational application of antibiotics.Methods? Mycoplasma culture，identification and drug sensitivity test kits（liquid-based）were used to culture，identify and detect drug susceptibility in 489 patients with suspected genitourinary tract infections.Results? The results showed that among 489 specimens，202 were positive for mycoplasma， the positive rate was 41.30%，24 were positive for human mycoplasma，accounting for 11.88%，there were 171 cases of ureaplasma urealyticum single，accounting for 84.65%，and 7 cases of mixed infection，accounting for 3.47%.The detection rates of female and male mycoplasma were 52.36% and 17.44%，respectively，and women were significantly higher than men.Positive patients were mainly 20 to 35 years old，accounting for 66.83%.Mycoplasma is most sensitive to josamycin，doxycycline and minocycline，with sensitivity rates of 89.60%，88.12% and 84.65%， respectively，sensitivity to erythromycin，sirfloxacin，ciprofloxacin，ofloxacin and levofloxacin was low，with sensitivity rates of 18.81%， 10.40%，1.49%，6.44% and 5.94%，respectively.Conclusion? This study confirmed that mycoplasma infection is mainly caused by ureaplasma urealyticum infection.Clinical reference should be made to the rational use of drug susceptibility results.It is best to use josamycin，doxycycline and minocycline when using drugs.Sparfloxacin，ciprofloxacin，ofloxacin and levofloxacin should be avoided.

Key words：Urogenital infection;Ureaplasma urealyticum;Human mycoplasma;Drug sensitivity test;Antibiotic

支原體（mycoplasma）是一類缺乏細胞壁、形態(tài)上呈高度多變性，能通過除菌器，在無生命培養(yǎng)基中能生長繁殖的最小原核細胞型生物，能形成有分支的長絲。支原體中的解脲支原體（ureaplasma urealyticum，UU）和人型支原體（mycoplasma hominis，Mh）可寄居于人的泌尿生殖道，并在一定的條件下引起非淋病性尿道炎（nongonococcal urethritis，NGU），主要通過性途徑傳播，其中有30%的NGU是由UU所致[1]。由于抗菌藥物的廣泛使用以及濫用使得支原體的耐藥率逐漸提高，為了解支原體感染及耐藥情況，指導(dǎo)臨床合理利用抗菌素，本文分析了共計489例支原體培養(yǎng)及藥敏試驗結(jié)果，報道如下。

1對象與方法

1.1 研究對象? 收集2015年11月～2017年10月重慶市中醫(yī)院皮膚美容科門診疑似支原體感染患者共489例，其中男性172例，女性317例，年齡19～70歲，平均年齡（34.57±1.56）歲。

1.2 儀器與試劑? 儀器為電熱恒溫培養(yǎng)箱，型號為HH.BLL.420B5，試劑為迪爾生物科技有限公司生產(chǎn)的Uu和Mh分離鑒定藥敏試劑盒。該試劑盒包含的抗菌藥物有四環(huán)素、左氧氟沙星、紅霉素、交沙霉素、強力霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、美滿霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素和司巴沙星共12種藥物。

1.3 方法? 必須在用藥前采取標(biāo)本，支原體對細胞表面有很強的親和力，應(yīng)盡可能多收集細胞，標(biāo)本采集后應(yīng)盡快接種，不可在室溫或普通冰箱內(nèi)久存，以免拭子干燥而致使支原體活力降低甚至死亡。男性：用男性無菌拭子由尿道口1～2 cm處取尿道口分泌物，根據(jù)病情需要，也可取前列腺按摩液、精液，采集尿道口分泌物的患者，應(yīng)于取樣前2 h內(nèi)未進行排尿。女性：采集宮頸分泌物，標(biāo)本采集時應(yīng)先用生理鹽水擦去宮頸口多余粘液，再用另一個拭子在宮頸管內(nèi)1～2 cm處取宮頸分泌物。用拭子取材時，要在宮頸（或尿道）內(nèi)旋轉(zhuǎn)并至少停留20 s，以便獲得較多細胞。如果必須用尿液做支原體培養(yǎng)，可留取清晨中段尿液10～20 ml，高速離心后，取沉淀物接種，但尿液支原體的陽性率明顯低于尿道口（或?qū)m頸）分泌物。將標(biāo)本置于35～37 ℃敷箱培養(yǎng)，在24 h和48 h分別觀察結(jié)果。

2結(jié)果

2.1 216例患者感染類型構(gòu)成比例分析? 分析489例患者感染情況，共檢出202例支原體感染患者，占比41.30%，其中感染類型有解脲支原體、人型支原體及混合感染3種類型，見表1。

2.2 支原體陽性患者不同年齡分布情況? 將支原體感染患者分為≤20、20～35、35～50和≥50歲4個年齡段，其中20～35年齡段陽性率最高，占66.83%，見表2。

2.3 患者支原體感染的耐藥率分析? ?支原體對四環(huán)素、交沙霉素、強力霉素和美滿霉素的敏感性較高，敏感性均高于74%，但對左氧氟沙星、紅霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星和司巴沙星的敏感性均低于20%，其中對環(huán)丙沙星的敏感性僅為1.5%。支原體藥物敏感性實驗結(jié)果，見表3。

3討論

支原體屬是一類大小介于細菌與病毒之間的原核微生物，沒有細胞壁，形態(tài)呈多樣性，大多為球形。支原體感染以Uu和Mh最為常見，好寄生于人體的生殖泌尿道中，屬于條件致病菌，當(dāng)支原體達到一定的數(shù)量，導(dǎo)致菌群失調(diào)，人體免疫力下降，比如發(fā)病部位分泌的嗜中性粒細胞數(shù)量減少和功能障礙，才會致病。其感染不侵入人體血液和組織，但會通過吸收宿主細胞養(yǎng)料，從而引起非淋菌性尿道炎、女性輸卵管炎、子宮內(nèi)膜炎、宮頸糜爛及男性前列腺炎、附睪炎、精液質(zhì)量下降、不孕不育等[2-4]。其致病作用主要是由于支原體可產(chǎn)生具有細胞毒性的磷脂酶和尿素酶，影響宿主細胞生物合成。近年來，支原體感染發(fā)生率呈逐年上升趨勢[5]，并由于抗菌藥物的治療不規(guī)范以及發(fā)病率的增加，造成了支原體耐藥菌株的不斷增多，大部分研究也發(fā)現(xiàn)了支原體對喹諾酮以及大環(huán)內(nèi)酯類藥物敏感性增加[6，7]，因此，有效防治支原體感染非常重要。泌尿生殖道支原體感染的檢測、鑒定以及藥敏試驗已成為皮膚性病實驗室的常規(guī)檢測項目之一。

本研究結(jié)果顯示，在489例標(biāo)本中，支原體感染患者為202例，陽性率為41.30%，其解脲支原體單一陽性有171例（84.65%），人型支原體單一陽性有24例（11.88%），混合感染有7例（3.47%）。說明支體感染主要以解脲支原體為主。在不同的地區(qū)報道的支原體感染陽性率不盡相同，可能與檢測方法、操作人員、地區(qū)差異有關(guān)[8，9]。在不同年齡段中陽性患者以20～35歲為主，占48.21%，20歲以下年齡發(fā)病率最低（7.92%），50歲以上發(fā)病率次之（9.41%）。在同等年齡段女性的發(fā)病率仍大于男性。女性的發(fā)病率與其性生活開始以及是否閉經(jīng)密切相關(guān)。在我們的觀察的50歲以上的患者中其對抗生素的耐藥性明顯高于其它年齡段，可能是由于這些患者反復(fù)感染及不規(guī)范使用抗生素有關(guān)。數(shù)據(jù)顯示支原體對交沙霉素、強力霉素和美滿霉素敏感性最高，敏感率分別為89.60%、88.12%和84.65%，同時發(fā)現(xiàn)強力霉素和美滿霉素的耐藥率都大于5%，與賈雙榮[10]等報道的相比耐藥率明顯增加，可能與濫用抗菌藥物逐漸增多有關(guān)。支原體耐藥性比較強，敏感性會隨著時間推移而變化。實驗結(jié)果提示我們應(yīng)當(dāng)定期檢測支原體藥敏性改變。支原體對紅霉素、司巴沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星敏感性較低，敏感率分別為18.81%、10.40%、1.49%、6.44%和5.94%，其中對環(huán)丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星的敏感率低于10%，與鄧世昌[11]等人報道的相符。克拉霉素、阿奇霉素、羅紅霉素、四環(huán)素敏感率分別為56.93%、48.02%、32.67%、74.26%。紅霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星這些藥物耐藥率較高可能是因為這些藥物為臨床常用的經(jīng)驗用藥、濫用、出售時間長以及在藥店隨意購買導(dǎo)致，這提示我們臨床用藥時應(yīng)避免使用這些藥物。根據(jù)得出的數(shù)據(jù)顯示治療支原體感染應(yīng)優(yōu)先應(yīng)用交沙霉素、美滿霉素、強力霉素，避免使用紅霉素、司巴沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星以及左氧氟沙星。

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收稿日期：2018-6-12;修回日期：2018-6-22

編輯/李樺