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    竹葉黃酮的微波提取及工藝優(yōu)化

    2018-12-05 07:17:34秦明有
    湖南飼料 2018年1期
    關(guān)鍵詞:提取竹葉黃酮

    秦明有

    摘要:探究了竹葉黃酮的微波提取工藝,并通過正交實驗設(shè)計優(yōu)化了竹葉黃酮的提取條件,所得的最佳工藝參數(shù)為:微波時間Smin,微波溫度50℃,料液比1:21g/mL,微波功率200W,竹葉黃酮提取率達(dá)5.574%。微波提取快速高效,可以為竹葉黃酮的工業(yè)化提取及在飼料工業(yè)中的進(jìn)一步應(yīng)用提供參考.

    關(guān)鍵詞:竹葉;黃酮;微波;正交優(yōu)化:提取

    前言

    竹葉用于飼料中,能提高雞、豬、羊等家禽飼養(yǎng)效果及經(jīng)濟(jì)效益。黃酮作為竹葉的主要活性成分之一,在飼料工業(yè)中具有重要的作用,可促進(jìn)家禽的脂質(zhì)代謝、機體的生產(chǎn)性能、提高機體免疫功能,是一種具有廣闊發(fā)展前景的新型飼料添加劑,而且其安全性已經(jīng)得到了實驗驗證。在日糧中加入一定量的竹葉黃酮,畜禽的增重效果良好,竹葉黃酮還可改善持續(xù)高溫狀態(tài)下的肉雞生長性能和屠宰性能,除此之外,還能提高產(chǎn)蛋率和雞蛋品質(zhì)。本文對竹葉黃酮的微波提取工藝進(jìn)行研究.旨在為其在飼料工業(yè)中的安全及高效應(yīng)用提供參考。

    1 實驗材料及方法

    1.1 實驗材料及儀器

    竹葉(陜西理工大學(xué)校內(nèi)),清洗,干燥粉碎后過篩備用;蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢驗所,純度≥99%);乙醇、亞硝酸鈉,硝酸鋁、氫氧化鈉等均為分析純。

    SHB-ⅢT循環(huán)水式多用真空泵:蘇州江東精密儀器有限公司;MCR-3微波化學(xué)反應(yīng)器:上海凌科實業(yè)發(fā)展有限公司;島津UV- 260紫外可見分光光度計:日本島津;TGL16M型離心機:湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司;DHG-9075A型電熱鼓風(fēng)干燥箱:上海一恒科技有限公司;SE3001F電子天平:上海奧豪斯儀器有限公司;DHG-9203A電熱鼓風(fēng)干燥機:上海覽浩儀器設(shè)備有限公司。

    1.2 實驗

    1.2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    精確量取0.5g的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)樣品,用體積分?jǐn)?shù)為30%的乙醇溶解后轉(zhuǎn)入500mL的容量瓶中.配制1mg/mL的黃酮溶液,精密移取1mL放人100mL的容量瓶中用體積分?jǐn)?shù)為30%的乙醇定容,配制10μg/mL的黃酮標(biāo)準(zhǔn)液。分別精密移取0,l,2,3,4,5,6mL放入7個50mL的容量瓶中,各加入1.0mL濃度為50g/L的NaN02溶液混勻,放置6min后加入1.0mL濃度為100g/L的Al(N03)3溶液混勻,放置6min,再加入10.0mL濃度為40g/L的NaOH溶液,最后用30%乙醇定容至刻度,再放置15min后于510.00nm波長處測其吸光度.并以其為縱坐標(biāo),黃酮待測液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得同歸方程為:y=0.1206x -0.0208,R2=0.9972,說明黃酮濃度在0—10μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

    1.2.2 竹葉黃酮提取率的計算

    黃酮提取率/%=100Q[(y+0.0208)v/0.1206]/m

    式中:y-待測液吸光度;

    v-待測液的體積(rnL):

    m-每次提取時所用竹葉質(zhì)量:

    Q-稀釋倍數(shù):

    2 單因素實驗結(jié)果與分析

    2.1 微波時間的選擇

    實驗過程中設(shè)定料液比1:15g/mL,微波功率200W,微波溫度50℃,當(dāng)微波時間在2min—6min范圍內(nèi)變化時對竹葉黃酮提取的影響如圖l所示。由圖l可知:在2—6min范圍內(nèi),竹葉黃酮提取率隨微波時間的延長先增大后減小,微波時間為5min時提取率最大。合適的微波時間下,竹葉中黃酮的熱運動不斷加劇而達(dá)到活化狀態(tài),容易提取。微波時間短,不能竹葉中黃酮提取不完全,過長又增加了其他水溶性成分的溶出,干擾黃酮的測定,因此5min的微波時間最佳。

    2.2 微波溫度的選擇

    實驗過程中設(shè)定料液比1:15g/mL,微波功率200W,微波時間5min,當(dāng)微波溫度在30—70℃范圍內(nèi)變化時對竹葉黃酮提取的影響如圖2所示。微波溫度是微波輻射能的一個重要反映.微波提取竹葉黃酮過程中產(chǎn)生的熱能會迅速穿透竹葉顆粒細(xì)胞壁進(jìn)入分子內(nèi)部,加快黃酮的熱運動,隨著微波溫度的升高,黃酮溶出速率不斷增大,微波溫度為50℃時提取率最大,過高的微波溫度則易造成局部熱量聚集,容易破壞黃酮結(jié)構(gòu),因此提取率下降,綜上,選擇50℃為較佳微波溫度。

    2.3 料液比的選擇

    實驗過程中設(shè)定微波功率200W,微波時間5min,微波溫度50℃,當(dāng)料液比在1:9~1:21g/mL范圍內(nèi)變化時對竹葉黃酮提取的影響如圖3所示。由圖3可知,竹葉黃酮提取率在1:9—1:21g/mL的料液比范圍內(nèi),隨著料液比的增大而增大,1:21g/mL時提取率最大。料液比小,竹葉黃酮在提取劑中的傳質(zhì)速率也相對較小,提取率低:隨著料液比的增大傳質(zhì)速率增大,竹葉中大部分黃酮都能溶出,因此提取率不斷增大,但是當(dāng)料液比大于1:18g/mL時,黃酮提取率的增幅很小,綜合考慮提取率和提取成本,選擇1:18g/mL為較佳料液比。

    2.4 微波功率的選擇

    實驗過程中設(shè)定料液比1:15g/mL,微波時間5 min,微波溫度50℃.當(dāng)微波功率在100—500W范圍內(nèi)變化時對竹葉黃酮提取的影響如圖4所示。微波功率是微波能量的直接體現(xiàn),在合適的微波功率范圍內(nèi),微波功率越大破壁效果越好,但是過大的微波功率雖然在提取初期有利于竹葉黃酮的溶出,但是隨著提取時間的延長,產(chǎn)生的局部過熱現(xiàn)象會破壞黃酮的結(jié)構(gòu),導(dǎo)致提取率降低。由圖4可知,在100—300W微波功率范圍內(nèi),竹葉黃酮的提取率先增大后減小,300W時對應(yīng)的提取率最大,故選擇300W的微波功率較合適。

    3 正交結(jié)果及分析

    單因素實驗探究了微波時間、微波溫度、料液比、微波功率等四個因素對竹葉黃酮提取的影響,并為正交優(yōu)化實驗篩選較佳的水平區(qū)間。正交優(yōu)化實驗以竹葉黃酮提取率作為指標(biāo),采用L9(34)正交優(yōu)化設(shè)計確定竹葉黃酮提取最優(yōu)工藝參數(shù).實驗結(jié)果見右表。

    正交試驗結(jié)果中的各因素對應(yīng)的極值能很好的反應(yīng)其在正交設(shè)定的水平范圍內(nèi)的變化對竹葉黃酮提取效果的影響,極值越大說明此因素的變化對實驗結(jié)果影響越大。比較表l中各因素所對應(yīng)的極值可知,影響竹葉黃酮提取的因素的主次順序為:微波時間>料液比>微波溫度>微波功率。正交實驗優(yōu)選的最優(yōu)組合為A2B2C3D2,即微波時間5min,微波溫度50℃,料液比1:21g/mL,微波功率200W,在此條件下進(jìn)行竹葉黃酮的三次平行提取驗證實驗,得平均提取率為5.574%,確定為最優(yōu)提取條件。

    4 結(jié)論

    實驗采用水作為溶劑,通過微波提取竹葉中的黃酮,快速高效,綠色安全。在單因素探究的基礎(chǔ)上優(yōu)化了竹葉黃酮的微波提取,所得的最佳工藝參數(shù)為:微波時間5min,微波溫度50℃,料液比1:21g/mL,微波功率200W,竹葉黃酮提取率為5.574%,提取效果比較理想。我國竹葉資源非常豐富,利用微波技術(shù)將這部分資源利用起來作為綠色飼料工業(yè)的儲備原料具有重要的現(xiàn)實意義。

    參考文獻(xiàn)(略)

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