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    黃秋葵育種及其研究前景

    2018-12-01 02:31:44徐碧珍沈文杰李育軍植石燦秦樹香吳彩玉
    長(zhǎng)江蔬菜 2018年20期

    徐碧珍 ,沈文杰 ,李育軍 ,植石燦 ,2,秦樹香 ,2,吳彩玉 ,2

    (1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所/廣東省農(nóng)作物遺傳改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州,510640;2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué);3.廣州本草四季農(nóng)產(chǎn)品有限公司)

    黃秋葵,錦葵科(Malvaceae)秋葵屬(Abelmoschus)一年生草本植物,拉丁文學(xué)名Abelmoschus esculentus (Linnaeus) Moench,英文名 Okra,有很多別名,如羊角菜、秋葵、黃葵、咖啡黃葵、咖啡豆、羊角豆(廣東)、洋辣椒(福建)、越南芝麻(湖南)、補(bǔ)腎草等。它在熱帶地區(qū)可越年生長(zhǎng),是華南地區(qū)的特色、保健和稀有蔬菜。近10 a多來,隨著中國(guó)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展、人民生活的不斷提高,人們追求的食物也更加多樣化,黃秋葵這一特色、保健和營(yíng)養(yǎng)豐富的蔬菜越來越受到人民的青睞,發(fā)展十分迅猛。

    1 黃秋葵的育種目標(biāo)和方向

    1.1 培育營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高的品種

    黃秋葵以肉質(zhì)柔嫩、潤(rùn)滑的嫩莢供食,營(yíng)養(yǎng)頗為豐富,果實(shí)富含蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物和膳食纖維及黃酮、多糖等成分。據(jù)測(cè)定,每100 g黃秋葵可食部分干物質(zhì)含粗蛋白質(zhì)21.43 g、粗脂肪2.47 g、可溶性糖 17.34 g、纖維素 9.42 g、鈣 0.67 g、磷 0.56 g、鐵0.8 mg、維生素 C 29.95 mg,以及鉀、鋅、錳等[1]。 對(duì)黃秋葵莢果的理化成分進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)采收期是影響黃秋葵嫩莢食用品質(zhì)的重要因素,莢果在花后第4天已可食用,第6天后品質(zhì)開始慢慢下降,至10~12 d后莢果己纖維化而不堪食用;此外,種子含高水平的賴氨酸和較低含量的脂肪酸[2]。

    黃秋葵因具有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分、可口的味道而在許多國(guó)家受到熱捧,因此不斷提高其食用營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的是未來育種方向之一。

    1.2 培育保健功效較好或有較高藥用價(jià)值的品種

    明代李時(shí)珍的 《本草綱目》記載了黃秋葵的功效:根、莖、花、種子均可入藥,其性味甘、寒滑,入心、肺、腎、胃、肝及膀胱,可治脾虛乏力、腸燥便秘及惡瘡、癰癤等病癥。

    黃秋葵含有很多生物活性物質(zhì)與有效成分,如嫩莢果中含有一種特殊的黏性糖蛋白,是由膠原和黏多糖類物質(zhì)組成的多糖、蛋白質(zhì)混合物,不僅可以增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力,對(duì)人體關(guān)節(jié)腔里的關(guān)節(jié)膜和漿膜起潤(rùn)滑作用,還能保持人體消化道和呼吸道的潤(rùn)滑、促進(jìn)膽固醇類物質(zhì)的排泄、減少脂類物質(zhì)在動(dòng)脈管壁上的沉積,從而保持動(dòng)脈血管的彈性、防止肝臟和腎臟中結(jié)締組織的萎縮及膠原病的發(fā)生[3,4]。目前發(fā)現(xiàn)黃秋葵中所含的這種特殊黏液可用來制備Lepidmoide(LM),LM是一種類似于天然荷爾蒙的物質(zhì),它可以控制植物的各種生理效應(yīng),是一類新的植物激素促進(jìn)型互感作用物質(zhì)。黃秋葵除了富含果膠、多糖外,還含有黃酮類、生物堿、花青素、β-胡蘿卜素、萜類等活性物質(zhì)[5,6]。

    黃秋葵水提液功能明顯,試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組比較,黃秋葵水提液可明顯延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間、提高小鼠耐力及耐缺氧時(shí)間和耐缺氧能力,提高高溫、寒冷條件下存活率、耐寒耐熱能力,消除運(yùn)動(dòng)后血乳酸堆積、降低血清尿素氮含量及小鼠劇烈運(yùn)動(dòng)后血乳酸水平,說明黃秋葵水提液可提高小鼠在應(yīng)激狀態(tài)下的生存能力,對(duì)疲勞恢復(fù)、抗疲勞能力提高具促進(jìn)作用[7,8]。試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),黃秋葵的醇提取物高劑量可以有效控制肥胖小鼠的體重,有效改善血脂絮亂等癥狀,調(diào)節(jié)脂肪組織分泌蛋白質(zhì),達(dá)到對(duì)肥胖小鼠的治療效果[9,10]。

    因此,篩選和培育生物活性物質(zhì)含量高或有效成分含量高的品種,提高食物保健功效或藥品藥用價(jià)值,是未來黃秋葵育種的目標(biāo)之一。

    1.3 培育具觀賞價(jià)值的品種

    黃秋葵植株優(yōu)美、舒展,莖、葉、花和果實(shí)各有特色,具觀賞價(jià)值,可應(yīng)用于花圃、庭院等。其莖,有紫紅色或綠色;葉大,掌狀、淡綠色,葉脈紫紅色;花大而艷麗,著生于葉腋、節(jié)節(jié)開花,冠黃心紫,花期較長(zhǎng),晨開午閉;蒴果,圓錐形、羊角狀,有棱或無棱,有綠色、淡綠色或紫紅色。我國(guó)古代種植黃秋葵的主要目的是食其葉,到唐、宋以后,由于蔬菜種類日益增多,加之黃秋葵的葉片口感不好,而其花卻具有很高的觀賞價(jià)值,故而逐步由菜園退出,轉(zhuǎn)而邁進(jìn)花圃,這在唐、宋以后詩(shī)人墨客的許多詩(shī)詞中得到了充分的反映[1]。培育觀賞性的黃秋葵,可從延遲花期、矮化、果色鮮艷等方向進(jìn)行研究[11]。

    表 1 各地區(qū)一些黃秋葵品種的產(chǎn)量[15,16,20~26]

    1.4 培育營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的飼料品種

    黃秋葵生長(zhǎng)迅速,生物產(chǎn)量高,葉粉生產(chǎn)成本低,適合作為高營(yíng)養(yǎng)飼料[11],在蛋雞飼養(yǎng)業(yè)中會(huì)有較為廣闊的應(yīng)用前景,因此培育營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的飼料品種非常重要。黃秋葵莖葉粉含有粗蛋白17.47%、粗灰分13.48%、粗纖維10.9%、粗脂肪7.08%、無氮浸出物51.07%,其中葉黃素含量高達(dá)2 370 mg/kg[12]。飼料中葉黃素含量達(dá)到60 mg/kg時(shí),就會(huì)對(duì)蛋黃和雞肉有較好的著色效果,而黃秋葵的莖葉粉葉黃素含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于這個(gè)水平,因此又可用作飼料著色劑。對(duì)比試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),黃秋葵試驗(yàn)組的蛋黃著色分布比較均勻,色澤較為純正光亮;且在日糧能量、蛋白水平基本一致的情況下,黃秋葵起到了著色劑和作為飼料原料的雙重功效,省去了額外的著色成本,顯著提高了蛋雞的經(jīng)濟(jì)效益[13]。此外,在蛋雞日糧中添加黃秋葵葉粉可以提高蛋雞生產(chǎn)性能、雞蛋品質(zhì),同時(shí)對(duì)蛋雞盲腸微生物菌群及腸道組織結(jié)構(gòu)可起到一定改善作用,以4%的添加量最適宜、效果最理想[14]。

    1.5 培育高產(chǎn)、抗性強(qiáng)的品種

    黃秋葵品種之間產(chǎn)量差異比較大[15~19]。從表1可見,除了綠白1號(hào)以外,各地的黃秋葵品種產(chǎn)量均與對(duì)照品種五?;蛐滦俏褰怯忻黠@差異,其中粵海、閩秋葵2號(hào)、贛葵2號(hào)等產(chǎn)量遠(yuǎn)高于對(duì)照品種,而在三亞的試驗(yàn)中,南湘、一品、綠劍的產(chǎn)量都比對(duì)照品種低得多。因此,品種的高產(chǎn)培育有很大的潛力。

    黃秋葵生產(chǎn)時(shí)也常遇到各種逆境脅迫和病蟲為害,生產(chǎn)上也需要抗性強(qiáng)的品種,因此耐旱、耐寒、耐鹽以及抗病性或比較強(qiáng)的品種也是育種目標(biāo)之一。

    1.6 培育適合加工的品種

    黃秋葵種子可替代咖啡豆制作咖啡,也可加工高檔的食用油——秋葵籽油;果實(shí)中的黏液是一種新型的親水膠體,可作為天然添加劑應(yīng)用于乳、肉、面等生產(chǎn)加工中[27],因此,根據(jù)不同的加工產(chǎn)品方向和加工特性要求,培育出適應(yīng)不同加工產(chǎn)品的秋葵新品種[11]。

    2 黃秋葵的育種現(xiàn)狀和研究新進(jìn)展

    2.1 國(guó)外黃秋葵遺傳育種現(xiàn)狀和研究進(jìn)展

    ①在遺傳資源研究方面 通過聚類分析將加納收集的25份黃秋葵資源分為4類,其中有2份資源完全相同,8份資源具有80%的相似性,3份資源有50%的相似性,12份資源遺傳變異較大[28];進(jìn)一步對(duì)加納25份黃秋葵種質(zhì)資源的表現(xiàn)、多樣性、質(zhì)量性狀以及園藝、農(nóng)藝性狀、產(chǎn)量性狀等進(jìn)行了評(píng)價(jià)研究,結(jié)果認(rèn)為,株高、開花天數(shù)、開花節(jié)位、單果質(zhì)量、種子質(zhì)量與產(chǎn)量呈顯著正相關(guān);花瓣顏色、葉片茸毛和莖茸毛、果實(shí)形狀、花青素含量、開花期等性狀遺傳變異大[29]。這些研究結(jié)果為育種改良材料和新品種的選育提供了依據(jù)。進(jìn)一步研究西非25份黃秋葵材料種植在不同環(huán)境下的開花期、單株結(jié)莢數(shù)、單莢種子數(shù)、成熟期株高和單株種子產(chǎn)量的主效可加互作可乘(AMMI)模型、基因型主效應(yīng)加基因型與環(huán)境互作效應(yīng)(GGE)模型,分析聯(lián)合回歸和AMMI模型與黃秋葵的品種穩(wěn)定性表明,GGE效應(yīng)對(duì)種子產(chǎn)量影響顯著;AMMI和GGE聯(lián)合分析比Eberhart和Russell模型更有效;NGAE-96-0060、NGAE-96-0063、NGAE-96-04 等大部分材料都有較好的品種穩(wěn)定性,尤其NGAE-96-04還具有高產(chǎn)、穩(wěn)定的優(yōu)良特性,可以作為育種材料[30]。

    ②在不育系、雜種優(yōu)勢(shì)研究方面 以γ射線誘導(dǎo)黃秋葵植株突變,印度獲得了基因型雄性不育植株,不育性由單隱性基因控制,以其雄性不育系生產(chǎn)雜交種子,估計(jì)節(jié)省70%的時(shí)間和勞力[31]。以黃秋葵基因互作的研究雜種優(yōu)勢(shì)顯示,有4個(gè)雜交組合的單株產(chǎn)量具有雜種優(yōu)勢(shì),始花期、開花期、單果質(zhì)量、果長(zhǎng)、果寬、單果種子數(shù)、百粒質(zhì)量的特殊配合力高于一般配合力,非加性效應(yīng)顯著,其雜種可提高黃秋葵產(chǎn)量[32]。利用配合力和雜種優(yōu)勢(shì)分析,發(fā)現(xiàn)黃秋葵具有明顯的雜種優(yōu)勢(shì),所有產(chǎn)量及其構(gòu)成因素的性狀高度變異且容易分離選擇[33]。

    ③在抗病性研究方面 印度在人工與自然條件下篩選了20份黃秋葵資源,用DNA診斷手段看其中是否存在抗黃脈花葉病毒病的材料,結(jié)果發(fā)現(xiàn)沒有免疫的抗性材料,只有2份材料Nun 1144和Nun 1145有中等的抗性[34]。

    2.2 國(guó)內(nèi)黃秋葵的遺傳育種現(xiàn)狀和研究進(jìn)展

    目前,國(guó)內(nèi)的黃秋葵產(chǎn)業(yè)發(fā)展取得了一定的進(jìn)步,黃秋葵遺傳育種方面的研究主要集中在資源評(píng)價(jià)、引種、品種比較與新品種選育上,對(duì)于黃秋葵的育種方法、改良品種的深入研究還比較欠缺。

    ①遺傳資源研究方面 對(duì)國(guó)內(nèi)外黃秋葵資源進(jìn)行ISSR分析,并構(gòu)建分子樹狀圖,把其中的栽培品種資源劃分為2個(gè)類群[35]或把所有參試黃秋葵資源分為4個(gè)類群[36]。中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院引進(jìn)新東京5號(hào)、五龍1號(hào)、五福、翠嬌等品種,結(jié)合從國(guó)外收集到的野生和栽培品種,于2003-2005年進(jìn)行栽培、雜交,已貯存70余份不同品系的種子材料[2]。

    ②引種品比試驗(yàn)方面 先后從臺(tái)灣地區(qū)引進(jìn)黃秋葵新品種485號(hào)、五福和從美洲多米尼克引進(jìn)美洲1號(hào)等品種并試種成功[20,37,38]。 通過各地多個(gè)品種的比較試驗(yàn)篩選到比較適合各地栽培的黃秋葵品種,為我國(guó)黃秋葵新品種的生產(chǎn)應(yīng)用提供助力[16,17,39,40]。

    ③新品種選育方面 目前,國(guó)內(nèi)對(duì)黃秋葵的新品種選育大多都是通過從國(guó)內(nèi)外引種試驗(yàn)栽培后,發(fā)現(xiàn)優(yōu)良變異株并經(jīng)系統(tǒng)選育出來的,如粵海[21]、川秋葵 1 號(hào)[41]、纖指[42]、碧劍[43]、綠白 1 號(hào)[25]、福農(nóng) 1 號(hào)[22]、紅玉[44]、石秋葵 1 號(hào)[45]、贛秋葵 1 號(hào)[23]、贛秋葵 2 號(hào)[24]、紅豐2號(hào)[46]等;但通過雜交育種選育或選育出雜交種的還很少,僅有中葵2號(hào)[26]、閩秋葵2號(hào)[15]等的報(bào)道。用生物技術(shù)選育新品種研究則還沒有結(jié)果。

    ④耐鹽性等研究方面 2014年國(guó)內(nèi)報(bào)道了對(duì)24個(gè)黃秋葵材料進(jìn)行耐鹽性篩選的研究結(jié)果,發(fā)現(xiàn)超級(jí)五角耐鹽性最強(qiáng),而廣西黃秋葵則表現(xiàn)敏感[47]。通過對(duì)不同基因型黃秋葵苗期生長(zhǎng)及生理特征的研究,認(rèn)為苗期的干物質(zhì)積累、細(xì)胞膜穩(wěn)定性及K+含量等是耐鹽黃秋葵的基本特征[48]。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了不同黃秋葵品種幼苗在不同鹽脅迫下的查爾酮合成酶基因(AeCHS)表達(dá)模式,表明黃秋葵的耐鹽性可能與AeCHS基因的表達(dá)水平有關(guān)[49]。此外,國(guó)內(nèi)也開始采用Illumina Hiseq 2500高通量轉(zhuǎn)錄測(cè)序技術(shù)對(duì)紫色黃秋葵進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組功能基因測(cè)序及分析等初步研究[5],對(duì)今后深入開展花色素、黃酮類物質(zhì)代謝合成途徑及相關(guān)功能基因研究有幫助。

    3 黃秋葵的雜交育種及快繁技術(shù)

    3.1 雜交育種技術(shù)

    ①黃秋葵自交作物特征 黃秋葵為兩性花,從花蕾到開花10~15 d?;ㄝ?片;花瓣嫩黃色,5片,旋轉(zhuǎn)狀排列,近基部與雄蕊管連生;雄蕊單體,花藥多;子房上位,5室,每室著生多數(shù)倒生胚珠;柱頭深紫色,梅花狀,5瓣,表面密生茸毛,在成熟時(shí)會(huì)分泌出大量黏液,對(duì)花粉具極強(qiáng)的粘著力;花柱5個(gè),聯(lián)合成管,在花開放時(shí)與雄蕊同步伸長(zhǎng)。開花周期為18~20 h,一般是 18:00~19:00 花冠開始伸展,萼片被撐開一裂縫;翌日上午8:00~10:00,花冠處于全張狀態(tài),花柱和雄蕊管伸長(zhǎng)最大,花粉從花藥中散出,由于花絲的伸長(zhǎng),使一部分花粉可自動(dòng)粘到柱頭上而自動(dòng)完成授粉過程;14:00~15:00花冠就閉花, 使花粉與柱頭粘著在一起,也同樣自然授粉了。黃秋葵受精過程時(shí)間很短,會(huì)刺激子房迅速生長(zhǎng)膨大;若受精不成功,其花冠和子房會(huì)在開花后翌日脫落。當(dāng)2個(gè)黃秋葵品種栽在一起時(shí),若開花時(shí)未采取夾花、套袋等方式進(jìn)行隔離,則在其2個(gè)品種的后代中觀察不到有任何變異,因此說黃秋葵是真正的自交作物[50]。

    ②雜交制種技術(shù)[51]a.選擇去雄花朵。將母本植株的花在開花前1 d先去雄,選擇的花朵要求花萼飽滿,黃白色,個(gè)別尖端脹,露出黃色花冠。

    b.去雄。先用鑷子或刀片把萼片撕開、去除;然后按花冠旋轉(zhuǎn)的方向把花瓣也逐一剔除;花藥露出,小心去除花藥。因花絲極短,雄蕊管又脆弱,易傷到雄蕊管,會(huì)影響花粉管的生長(zhǎng)發(fā)育,或引起病菌感染,使授粉失敗。一般用眼科鑷子或手輕輕將花藥從雄蕊管上剝離,只在水平方向上用力,不要向下撕拉,去雄一定要干凈徹底,不要傷及柱頭。

    c.套袋隔離。去雄后,在花柄處掛上標(biāo)牌,并套紙袋隔離。父本花必須在前1 d下午先套袋。

    d.授粉。 翌日 8:00~10:00,取下完全開放的父本花,用鑷子或刀片將花瓣去除,然后取下套在母本上的袋,將父本雄蕊管在母本柱頭上滾動(dòng)1~2次,大量花粉緊密粘著在柱頭上后,再套上紙袋并夾緊,最后掛上標(biāo)簽,寫上父、母本編號(hào)及授粉日期[11]。

    e.授粉后續(xù)管理。授粉后翌日下午就可取下紙袋,觀察是否真正受精,用手輕輕一碰,子房就會(huì)脫落的就是未受精。

    ③黃秋葵有性雜交注意事項(xiàng) a.母本花去雄最佳時(shí)間為開花前1 d,去雄時(shí)間越早對(duì)花器官損傷越嚴(yán)重,對(duì)花的正常發(fā)育也越不利。為了促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng),為以后坐果提供充足的養(yǎng)分,雜交用的母本株的前10節(jié)花最好去除。10節(jié)以后每隔2~3節(jié)留1朵花用于雜交,這樣單株的結(jié)實(shí)負(fù)載較輕,有利于養(yǎng)分積累,促進(jìn)果實(shí)發(fā)育,種子飽滿。一般單株以雜交10朵花為宜。

    b.去雄選擇晴好天氣,在 8:00~15:00 進(jìn)行,傷口在有陽(yáng)光的條件下容易愈合,不易被病菌感染。而陰雨天不可進(jìn)行去雄工作。

    c.為了減少病菌感染機(jī)會(huì),用75%酒精消毒鑷子或刀片;去雄前1 d,對(duì)雜交用的植株噴25%多菌靈或代森錳鋅可濕性粉劑500~800倍液,殺滅病菌。

    d.一般在果皮褪綠干枯、頭部開始脹裂時(shí)為最佳采種期,過遲采收果實(shí)易裂開,種子易散失。采收時(shí)用剪刀剪斷果柄,不要向下撕拉以免傷及莖稈影響后續(xù)果實(shí)的發(fā)育。

    e.采收的果實(shí)應(yīng)放在太陽(yáng)下曝曬3~5 d,種子取出后再曬2~3 d,于密閉干燥陰冷的條件下貯藏,種子壽命可保持5 a以上。

    3.2 離體快繁技術(shù)

    為滿足人們?cè)耘嘈枰?,保存一些具有?yōu)良性狀的資源,可以采用離體快繁技術(shù)。黃秋葵的各種外植體,都能產(chǎn)生愈傷組織;其在錦葵科內(nèi)的脫分化、形成愈傷組織的速度都比其他植物種類快,不同的外植體形成的愈傷組織基本上一致[52]。同胚性愈傷組織是大部分植物形態(tài)建成試驗(yàn)中必需的,且具有很高的利用價(jià)值[53]。黃秋葵的愈傷組織在一定條件下較易產(chǎn)生體細(xì)胞胚并再生成完整植株[54],因此黃秋葵的離體快繁研究具有重要的理論意義和生產(chǎn)應(yīng)用價(jià)值。

    ①莖尖與試管苗培養(yǎng) 采用莖尖和試管苗培養(yǎng)的方法,以黃秋葵莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)為材料,分別進(jìn)行生長(zhǎng)點(diǎn)的生長(zhǎng)、分化芽的生根培養(yǎng)、試管苗的生根繼代增殖培養(yǎng)、試管苗的移栽與定植等研究。該方法不僅使黃秋葵自然雜交雜種優(yōu)勢(shì)種質(zhì)得到保存,而且也為其他栽培植物的非人工有利變異的種質(zhì)保存提供了新途徑[55]。研究結(jié)果顯示,黃秋葵生長(zhǎng)點(diǎn)伸長(zhǎng)生長(zhǎng)培養(yǎng)的理想培養(yǎng)基:1/2 MS+ZT 0.2 mg/L+NAA 0.3 mg/L;黃秋葵生長(zhǎng)芽分化培養(yǎng)的理想培養(yǎng)基:MS+6-BA 0.7 mg/L+AgNO30.8 mg/L+NAA 0.1 mg/L;黃秋葵分化芽生根培養(yǎng)和生根繼代增殖培養(yǎng)的理想培養(yǎng)基:1/3 MS+ABT 0.6 mg/L+蔗糖10 g/L+IAA 0.4 mg/L。

    ②莖段與胚狀體培養(yǎng) 通過黃秋葵的莖段培養(yǎng)(微扦插)和胚狀體途徑實(shí)現(xiàn)植株再生和快速繁殖,首先要將黃秋葵成熟種子表面消毒進(jìn)行無菌發(fā)芽,然后取無菌實(shí)生苗作為試驗(yàn)材料。無菌發(fā)芽培養(yǎng)基:1/2 MS大量元素+MS微量元素+肌醇100 mg/L+煙酸0.5 mg/L+鹽酸硫胺素2.0 mg/L+鹽酸吡哆素1.0 mg/L+甘氨酸2.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L+蔗糖2.0%+瓊脂粉0.7%,pH值5.8。比較適合用于黃秋葵莖段離體快繁(微扦插)的培養(yǎng)基配方:MS+1.0 mg/L IBA,該培養(yǎng)基可以用于反復(fù)繼代培養(yǎng)黃秋葵的組培苗莖段。帶1葉1芽的莖段在該培養(yǎng)基上培養(yǎng)30 d左右時(shí),可形成株高6~7 cm的完整植株。莖段培養(yǎng)(微扦插)途徑每繼代培養(yǎng)一次可以增殖3~4倍,這種增殖速度已完全可以應(yīng)用于黃秋葵種苗的組培工廠化生產(chǎn),此時(shí)可以把每個(gè)植株切割成3~4段轉(zhuǎn)接到新配制的同配方的新鮮培養(yǎng)基上再進(jìn)行繼代培養(yǎng)[54]。

    ③子葉離體再生培養(yǎng) 以帶子葉和部分下胚軸的頂芽為外植體,建立再生體系。下胚軸長(zhǎng)度為2 mm時(shí)有利于不定芽的形成,7~10 d苗齡的外植體最易誘導(dǎo)出不定芽;芽分化和生長(zhǎng)的最適溫度為(25±1)℃;6-BA濃度<1 mg/L不定芽難以發(fā)生,6-BA 6 mg/L+NAA 0.1mg/L有利于不定芽形成;GA32.0 mg/L可以提高不定芽的誘導(dǎo)率,低濃度的NAA(0.1~0.2 mg/L)可促進(jìn)黃秋葵不定根的發(fā)生。一般利用種子在培養(yǎng)基上無菌發(fā)芽長(zhǎng)出無菌苗,切取帶子葉和部分下胚軸的頂芽為外植體。具體操作:將消毒種子接種于無激素的1/2 MS培養(yǎng)基上,先進(jìn)行暗培養(yǎng),溫度為25℃,萌動(dòng)發(fā)芽后培養(yǎng)條件為16 h光照,光強(qiáng)2 000~3 000 lx,接種后3 d種子萌芽,后形成無菌苗;將含有不同長(zhǎng)度的下胚軸帶子葉、頂芽的黃秋葵無菌苗接種于培養(yǎng)基MS+6-BA 6 mg/L+NAA 0.2 mg/L上進(jìn)行培養(yǎng)[56]。

    4 黃秋葵的育種研究前景

    黃秋葵是菜、藥、花兼用的植物,無論在營(yíng)養(yǎng)價(jià)值方面抑或保健功能方面都比其他蔬菜更具優(yōu)勢(shì)。隨著人們生活水平的不斷提高,對(duì)營(yíng)養(yǎng)、養(yǎng)生、保健的需求日益增大,并且在未來伴隨很多相關(guān)技術(shù)難題的解決,黃秋葵的遺傳育種將有著極為廣闊的前景。未來隨著黃秋葵新品種的不斷增加,相信其開發(fā)的功能會(huì)越來越多,被應(yīng)用的領(lǐng)域也會(huì)越來越多。如可利用黃秋葵優(yōu)美俊秀的植株形態(tài)開發(fā)觀賞植物;利用其營(yíng)養(yǎng)素、保健功能活性物質(zhì)開發(fā)營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)身、保健養(yǎng)生的特色蔬菜品種;利用其藥用有效成分與藥用價(jià)值發(fā)展相關(guān)的藥用型植物;利用其種子含油率高來作油料作物;利用其葉片葉黃素、β-胡蘿卜素含量高等開發(fā)著色劑和飼料用的品種等。黃秋葵能應(yīng)用的領(lǐng)域極為廣泛,開發(fā)利用程度高,是一個(gè)比較熱門的研究領(lǐng)域,但目前國(guó)內(nèi)的育種主要集中于資源評(píng)價(jià)、引種、品種比較與新品種選育上,對(duì)于深入開展黃秋葵的育種方法和藥食同源、飼用、觀賞等的品種改良方面研究還比較少,與國(guó)外相比還有一定差距,因此它具有廣闊的育種研究前景和研究?jī)r(jià)值。

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