冠心病患者血清軟骨寡聚基質(zhì)蛋白水平變化及其與冠狀動脈鈣化的關(guān)系

何雨峰 李寧俠 李建華 強 鋒 楊澤華

冠狀動脈粥樣硬化型心臟病簡稱冠心病(coronary heart disease，CHD)，是因冠狀動脈管壁形成粥樣斑塊造成血管狹窄從而引發(fā)的臨床綜合征。冠狀動脈硬化進(jìn)展期易發(fā)生冠狀動脈鈣化，而冠狀動脈鈣化是CHD的重要影像特征，與粥樣硬化嚴(yán)重程度呈顯著相關(guān)[1]。臨床常用CT冠狀動脈鈣化積分評估冠狀動脈鈣化的程度，冠狀動脈鈣化積分升高與CHD急性事件發(fā)生率呈正相關(guān)，積分越高的患者急性心肌梗死及心源性猝死的發(fā)生率越高[2]。雖然CT定量冠狀動脈鈣化積分可反映冠狀動脈鈣化程度，預(yù)測未來心血管事件，但反復(fù)CT檢查增加患者放射線暴露的風(fēng)險，且CT定量冠狀動脈鈣化評分不適于持續(xù)動態(tài)觀察CHD患者粥樣硬化的進(jìn)展，探討可反映冠狀動脈鈣化程度的血清學(xué)指標(biāo)成為臨床研究的熱點[3]。

軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(cartilage oligomeric matrix protein，COMP)屬糖蛋白G家族，由5個相同含有755個氨基酸的亞單位構(gòu)成，常用于骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等的診斷和療效評估。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，血管壁基質(zhì)中的COMP參與血管鈣化的發(fā)生，血液透析患者血清COMP濃度與血管鈣化和心血管事件成正相關(guān)[4]。目前，COMP與CHD患者冠狀動脈鈣化的關(guān)系研究較少。為此，本研究通過對CHD患者血清COMP水平變化及其與冠狀動脈鈣化的關(guān)系，分析探討COMP與冠狀動脈鈣化積分的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年1月至2018年2月在西安醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院就診的237例CHD患者，將其納入觀察組，其中男性131例，女性106例；年齡52～77歲，平均年齡(66.05±7.26)歲；體質(zhì)量指數(shù)(23.87±3.26)kg/m2。抽取同期在醫(yī)院正常體檢的237名健康者，將其納入對照組，其中男性136名，女性101名；年齡51～77歲，平均年齡(66.42±6.14)歲；體質(zhì)量指數(shù)(23.56±3.39)kg/m2。兩組受試者性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、個人史、家族史及合并疾病等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①有CHD的臨床癥狀，冠狀動脈CT血管成像或冠狀動脈造影至少1支冠狀動脈血管狹窄程度＞50%，符合CHD的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②年齡≥50歲，性別不限；③首次確診，既往無CHD史；④患者對研究知情并簽署知情同意書。

(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重肝腎功能不全、老年性瓣膜病、高血壓心臟病、風(fēng)濕、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、肥厚型心肌病及原發(fā)性甲亢者；②對碘造影劑過敏者；③合并感染性疾病、血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤、結(jié)核、甲狀腺疾病者；④合并免疫系統(tǒng)疾病、結(jié)締系統(tǒng)疾病者；⑤精神疾病、認(rèn)知功能障礙、視聽功能障礙，不能正確交流者；⑥擬納入或已納入其他臨床研究者。

1.3 儀器設(shè)備

采用BS-800M型全自動生化分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子設(shè)備有限公司)；BC-5380型全自動血液細(xì)胞分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)；特定蛋白分析儀(深圳市國賽生物技術(shù)有限公司)。

1.4 觀察與評價指標(biāo)

(1)實驗室檢查。兩組受試者入組后抽取空腹靜脈血，采用ELISA法測定血清COMP水平。觀察組患者同時檢測血脂、同型半胱氨酸(Hcy)、白細(xì)胞(white blood cell，WBC)以及C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。

(2)冠狀動脈鈣化積分(CAC scoring，CACS)。參照Agatston等[6]和馮勤穎等[7]方法進(jìn)行計算：①CT值＞130 HU、鈣化面積＞1 mm2；②鈣化面積×鈣化灶峰值計分，130～199 HU=1分，200～299 HU=2分，300～399 HU=3分，≥400 HU為4分，一條血管各鈣化灶積分之和為該支血管總積分，以0分為無鈣化，≤100分為輕度鈣化，101～400分為中度鈣化，＞400分為重度鈣化；③根據(jù)評分將患者分為≤100分和＞100分，分別代表無明顯鈣化和明顯鈣化。

1.5 分析方法

(1)以是否明顯鈣化作為應(yīng)變量，將年齡(＜60歲=0，60～75歲=1，＞75歲=2)、性別(女=0，男=1)、體質(zhì)量指數(shù)(＜24 kg/m2=0，≥24 kg/m2)、CHD家族史(否=0，是=1)、吸煙(否=0，是=1)、飲酒(否=0，是=1)、高血壓(否=0，是=1)、糖尿病(否=0，是=1)、低密度脂蛋白(LDL-C＜3.12 mmol/L=0，≥3.12 mmol/L=1)、高密度脂蛋白(HDL-C＜1.04 mmol/L=0，≥1.04 mmol/L=1)、總膽固醇(TC＜5.2 mmol/L=0，≥5.2 mmol/L=1)、甘油三脂(TG＜1.7 mmol/L=0，≥1.7 mmol/L)、WBC(＜10×109/L=0，≥10×109/L=1)、Hcy(＜10μmol/L=0，≥10μmol/L=1)、CRP(連續(xù)變量)、COMP(＜157.2 ng/ml=0，≥157.2 ng/ml=1)引入二分類多因素logistic分析。

(2)以是否明顯鈣化為應(yīng)變量，將自變量賦值后引入多因素logistic分析，COMP預(yù)測明顯鈣化的靈敏度、特異度、最佳截斷值(Cut-off)和受試者工作(receiver operating characteristic，ROC)曲線下面積(area under curve，AUC)采用ROC曲線分析。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

本研究所有數(shù)據(jù)均輸入Excel2007建立數(shù)據(jù)庫，采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)分析。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，采用獨立樣本t檢驗，以p＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組COMP水平相比較

對照組受試者COMP水平為(111.74±21.86)ng/ml，觀察組患者COMP水平為(162.74±22.61)ng/ml，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=19.082，p＜0.001)。

2.2 CHD有無鈣化患者COMP水平相比較

經(jīng)對觀察組CHD患者進(jìn)行CACS評分，其中0分21例，1分61例，3分63例，4分92例；無明顯鈣化患者共82例(占34.60%)，明顯鈣化患者155例(占65.40%)。無明顯鈣化患者COMP水平為(145.42±17.17)ng/ml，明顯鈣化患者COMP水平為(170.37±16.14)ng/ml，明顯鈣化組COMP水平顯著高于無明顯鈣化組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.719，p＜0.001)。以CACS評分為金標(biāo)準(zhǔn)，繪制COMP預(yù)測明顯鈣化的ROC，確定COMP預(yù)測CACS的最佳截斷值為157.2 ng/ml，預(yù)測的靈敏度為73.5%，特異度為86.6%，AUC為0.85，95%CI為0.806～0.905，ROC曲線如圖1所示。

圖1 明顯鈣化和無明顯鈣化COMP預(yù)測明顯冠狀動脈鈣化的受試者工作曲線圖

2.3 影響CHD患者冠狀動脈鈣化的多因素logistic分析

以是否明顯鈣化作為應(yīng)變量，將年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、CHD家族史、吸煙、飲酒、高血壓、糖尿病、LDL-C、HDL-C、TC、TG、WBC、CRP和COMP水平引入二分類多因素logistic分析，年齡、吸煙、糖尿病、CRP和COMP水平是冠狀動脈鈣化的獨立影響因素(OR=5.857，OR=2.688，OR=3.684，OR=1.082，OR=4.639；p＜0.05)，見表1。

3 討論

冠狀動脈鈣化是冠狀動脈粥樣硬化的重要特征，冠狀動脈狹窄程度越高，伴有鈣化的概率越大，與鈣化程度低的患者相比較，鈣化程度高的患者所有的CHD事件、非致死性心肌梗死及CHD猝死等危險事件的危險度更高[8]。

表1 影響冠狀動脈鈣化的多因素logistic分析

近年來的大量研究顯示，冠狀動脈鈣化過程是多因素、多機制共同參與的主動的和可調(diào)控的復(fù)雜病理生理過程，探討影響冠狀動脈鈣化的危險因素，并給予針對性防控成為目前研究的熱點[9-10]。本研究結(jié)果顯示，年齡、吸煙、糖尿病及CRP是冠狀動脈鈣化的獨立危險因素，與多數(shù)研究一致[11-14]。

COMP是表達(dá)于肌肉骨骼和心血管系統(tǒng)的細(xì)胞基質(zhì)蛋白，血清COMP水平常做為診斷骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及預(yù)測預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)[15]。Riessen等[16]報道，COMP是人血管細(xì)胞外基質(zhì)的正常組分，與血管平滑肌細(xì)胞的黏附和趨觸性密切相關(guān)。血管平滑肌細(xì)胞增殖遷移是動脈粥樣硬化內(nèi)膜增厚、冠狀動脈成形術(shù)后再狹窄和靜脈移植失敗的關(guān)鍵[17]。Adams-7可通過降解血管COMP促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的遷移和內(nèi)膜增生，導(dǎo)致血清中COMP過表達(dá)[18]。Halasz等[19]報道，COMP參與膠原纖維的裝配，是人動脈粥樣硬化斑塊、狹窄斑塊及不同動脈粥樣硬化模型斑塊的基質(zhì)重要組成成分。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者血清COMP水平高于對照組，提示COMP參與CHD發(fā)病過程，CHD患者血清COMP水平升高，與Wang等[20]研究一致。

近年來的研究顯示，血管平滑肌細(xì)胞可產(chǎn)生COMP，主要存在于動脈中膜，參與血管平滑肌鈣化過程，并在鈣化過程中降解，導(dǎo)致血清COMP水平升高[21]。Bond等[22]報道，ApoE和COMP敲除的小鼠可促進(jìn)膠原纖維增殖和冠狀動脈鈣化形成。Du等[23]研究顯示，COMP敲除可降低體外高鈣環(huán)境中培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞的鈣沉積量，COMP過表達(dá)可抑制氯化鈣誘導(dǎo)的主動脈器官培養(yǎng)模型的血管鈣化，COMP缺乏對冠狀動脈鈣化具有明顯促進(jìn)作用。本研究結(jié)果顯示，明顯鈣化CHD患者COMP水平高于無明顯鈣化患者，多因素分析顯示，COMP是冠狀動脈鈣化的獨立危險因素，提示COMP參與CHD患者血管鈣化，血管鈣化患者COMP降解片段增加，導(dǎo)致血清COMP水平升高。AUC不受患病率和診斷界值影響，是診斷試驗的最佳評價指標(biāo)，理想的AUC為1，ROC位于0.5～0.7之間為診斷價值低，位于0.7～0.9之間為診斷價值中等，＞0.9為診斷價值高，ROC顯示COMP預(yù)測CHD患者明顯鈣化的敏感度為73.5%，特異性為86.6%，AUC為0.85，95%CI為0.806～0.905。本研究結(jié)果提示，COMP預(yù)測CHD患者明顯冠狀動脈鈣化具有一定的臨床價值。

CHD患者COMP水平高于正常人群，是CHD患者冠狀動脈鈣化的獨立危險因素，預(yù)測冠狀動脈明顯鈣化具有一定的臨床價值。