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    不同精粗比日糧對綿羊瘤胃微生物蛋白濃度和細(xì)菌數(shù)的影響

    2018-11-29 09:39:40永榮姜向宏
    四川畜牧獸醫(yī) 2018年11期
    關(guān)鍵詞:綿羊瘤胃數(shù)量

    永榮,姜向宏

    (1.內(nèi)蒙古鄂爾多斯市動物衛(wèi)生監(jiān)督所,內(nèi)蒙古 鄂爾多斯 017000;2.內(nèi)蒙古鄂托克旗家畜改良工作站,內(nèi)蒙古 鄂托克 010018)

    反芻動物的瘤胃是一個龐大的發(fā)酵罐,飼料中大部分有機(jī)物質(zhì)、纖維物質(zhì)和淀粉的消化都是依靠瘤胃微生物來完成的[1]。瘤胃微生物在反芻動物營養(yǎng)代謝方面起著舉足輕重的作用。本試驗擬通過飼喂3種不同纖維水平的日糧來研究日糧結(jié)構(gòu)對瘤胃微生物蛋白和瘤胃細(xì)菌數(shù)量的影響,并通過相關(guān)性分析來研究瘤胃細(xì)菌濃度、細(xì)菌數(shù)量與微生物蛋白濃度間的相關(guān)關(guān)系。

    1 材料與方法

    1.1 試驗設(shè)計 選擇體況良好、體重50kg左右的鄂爾多斯細(xì)毛羊30只,統(tǒng)一驅(qū)蟲,安裝永久性瘤胃瘺管和十二指腸瘺管進(jìn)行試驗。試驗羊隨機(jī)均分為3組(1組、2 組和 3組),分別飼喂精粗比為 1∶9、3∶7、5∶5 的日糧。

    1.2 試驗日糧 日糧配制參照中國美利奴羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)[2],綿羊的能量維持需要為 450kJ/kg·BW0.75,蛋白質(zhì)需要為350mgN/kg·BW0.75,飼喂水平為1.3倍的維持需要。

    1.3 飼養(yǎng)管理 通過控制采食量來控制各試驗組綿羊?qū)I養(yǎng)成分的攝入量。試驗羊采食的青干草從呼倫貝爾市購進(jìn),經(jīng)打草機(jī)一次性打碎備用。試驗日糧一次備齊,分別于7:00和19:00飼喂,自由采食,自由飲水,單圈飼養(yǎng)。

    1.4 測定指標(biāo)及方法

    1.4.1 瘤胃微生物蛋白測定 進(jìn)入正式試驗后連續(xù)采樣3 d,分別在以下時間點(diǎn)上采樣:早晨飼喂后0、2、4、8、12h,每次采集瘤胃液約 50mL。瘤胃液用 2 層紗布過濾后,濾液于4000r/min離心15 min,取上清液測定瘤胃微生物蛋白含量。所有上清液樣品均在-20℃下冷凍保存,待測。

    將不同采樣時間點(diǎn)的冷凍上清液樣品解凍,用移液管移取20.0mL,在高速冷凍離心機(jī)上以12000r/min離心30min,取沉淀用0.9%氯化鈉溶液沖洗2遍,每次沖洗后均以12000r/min離心30min,棄掉上清液,將沉淀小心無損地轉(zhuǎn)移到消化管中,用凱氏定氮法測定含氮量,然后折算出菌體蛋白含量。

    1.4.2 瘤胃細(xì)菌計數(shù) 分別于飼喂后0、2、4、8、12 h用采樣管從瘤胃不同部位快速吸取瘤胃液50mL左右,裝入事先預(yù)熱到39℃并通入二氧化碳?xì)怏w的小瓶中,密封,39℃保溫,取回后迅速勻漿15s,用兩層紗布過濾,濾液用來進(jìn)行細(xì)菌計數(shù)。

    1.5 數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)采用SAS軟件和Excel2003軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同精粗比日糧對綿羊瘤胃微生物蛋白濃度的影響 結(jié)果見表1。

    表1 不同精粗比日糧對綿羊瘤胃微生物蛋白濃度的影響 mg/100mL

    由表1可見,不同精粗比日糧對綿羊瘤胃微生物蛋白濃度的影響無顯著差異(P>0.05),但數(shù)值上呈現(xiàn)一定趨勢,即:3組>2組>1組。從瘤胃微生物蛋白濃度的動態(tài)變化來看,3個組的變化趨勢相同,均是飼喂前微生物蛋白濃度最高,飼喂后4h最低。

    影響瘤胃微生物蛋白濃度的因素很多,日糧中精料比例、飼喂頻率、飼喂水平、取樣時間以及動物的個體差異等都會對其產(chǎn)生影響。本試驗各組之間差異不顯著可能就是多種因素影響的結(jié)果。

    2.2 不同精粗比日糧對瘤胃細(xì)菌數(shù)量的影響 結(jié)果見表2。

    表2 不同精粗比日糧對瘤胃細(xì)菌數(shù)量的影響

    由表2可見,隨著日糧中精料比例的增加,瘤胃細(xì)菌數(shù)量有增加的趨勢,說明日糧精料比例高能夠促進(jìn)瘤胃細(xì)菌生長。從不同處理組各時間點(diǎn)的平均值可以看出,3組的瘤胃細(xì)菌數(shù)量(11.00×109個/mL)高于1 組(8.73×109個/mL)和 2 組(9.22×109個/mL),但經(jīng)統(tǒng)計分析差異不顯著(P>0.05)。

    由圖1細(xì)菌變化趨勢圖可見,各組瘤胃細(xì)菌數(shù)量的動態(tài)變化規(guī)律基本一致。瘤胃細(xì)菌濃度在飼喂前最高,而后隨著飼喂時間的變化呈現(xiàn)一定的波動,基本上在2h或4h時最低。在飼喂后2h或4h時細(xì)菌數(shù)量最少,以后逐漸上升,8h時出現(xiàn)峰值,之后又開始下降直到第2次飼喂前。1組瘤胃細(xì)菌數(shù)量的變化較明顯,在第2次飼喂前出現(xiàn)最低值,但變化趨勢與其他各組一致。說明不同精粗比日糧對瘤胃細(xì)菌的影響有一些相似性。各組最高值和最低值出現(xiàn)的時間點(diǎn)不一致,說明不同精粗比日糧對瘤胃細(xì)菌的生長周期是有一定影響的。

    結(jié)合表1和表2來看,同一試驗組的瘤胃微生物蛋白濃度和細(xì)菌數(shù)的動態(tài)變化趨勢基本一致。同一試驗組在不同精粗比日糧條件下,瘤胃微生物蛋白濃度和細(xì)菌數(shù)的動態(tài)變化呈現(xiàn)出相同的趨勢:飼喂前最高,飼喂后2h出現(xiàn)最低值,以后逐漸上升,在10h或12h出現(xiàn)第2次峰值。這跟前人報道的結(jié)果一致[3-4]。

    圖1 瘤胃細(xì)菌濃度和數(shù)量間的關(guān)系

    2.3 瘤胃細(xì)菌濃度和細(xì)菌數(shù)量間的相關(guān)關(guān)系 關(guān)于瘤胃細(xì)菌濃度和細(xì)菌數(shù)量間的相關(guān)性研究結(jié)果見圖1。由圖1可見,瘤胃細(xì)菌濃度與瘤胃細(xì)菌數(shù)量呈現(xiàn)很高的相關(guān)性(y=0.4209x,R2=0.9972)。說明對于同一動物來說,細(xì)菌濃度就是衡量細(xì)菌數(shù)量的一個很好的指標(biāo),今后可以只通過測定細(xì)菌濃度即可知曉細(xì)菌數(shù)量的變化規(guī)律。

    2.4 瘤胃微生物蛋白濃度與細(xì)菌濃度間的相關(guān)性 結(jié)果見圖2。由圖2可見,瘤胃微生物蛋白濃度與細(xì)菌濃度之間的相關(guān)性很低(R2=0.2271)。說明瘤胃微生物蛋白與瘤胃細(xì)菌菌群之間沒有很高的相關(guān)性。原因可能是:(1)有許多研究表明,實驗室條件下可培養(yǎng)的細(xì)菌數(shù)量只占到瘤胃細(xì)菌數(shù)量的1%~10%,這對結(jié)果的分析具有一定的影響;(2)本試驗測定的微生物蛋白是粗蛋白含量,包括了活的細(xì)菌蛋白和部分已經(jīng)死了的菌體蛋白,這對微生物蛋白濃度產(chǎn)生了一定的影響;(3)微生物分離過程中存在誤差;(4)試驗動物數(shù)量也會對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響。

    圖2 瘤胃微生物蛋白濃度與細(xì)菌濃度間的關(guān)系

    3 結(jié)論

    不同精粗比日糧對綿羊瘤胃微生物蛋白濃度和細(xì)菌數(shù)量的影響差異不顯著(P>0.05);本日糧條件下,瘤胃細(xì)菌數(shù)量和瘤胃細(xì)菌濃度間存在高度正相關(guān)關(guān)系,瘤胃微生物蛋白濃度和細(xì)菌濃度間的相關(guān)性很低。

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