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    若爾蓋縣牦牛輪狀病毒和冠狀病毒感染的血清學監(jiān)測

    2018-11-29 09:39:40澤旺塔俄么當周達瓦塔俄周王么尚吉措岳華
    四川畜牧獸醫(yī) 2018年11期
    關鍵詞:牦牛犢牛感染率

    澤旺塔 ,俄么當周 ,達瓦塔 ,俄周王么 ,尚吉措 ,岳華

    (1.四川省若爾蓋縣農業(yè)畜牧和水務局,四川 若爾蓋 624500;2.西南民族大學生命科學與技術學院,四川 成都 610041)

    腹瀉是導致犢牛生長不良和死亡的常發(fā)病,牛輪狀病毒(BRV)和牛冠狀病毒(BCoV)是常見的腹瀉病原[1],BRV和BCoV在我國牛群中的感染比較普遍,危害嚴重。若爾蓋縣位于青藏高原東部邊緣地帶,是全國最重要的草原牧區(qū)之一,也是亞洲最好的天然牧場之一[2]。牦牛養(yǎng)殖是若爾蓋縣畜牧業(yè)的支柱產業(yè),但犢牛腹瀉一直是制約當地牦牛業(yè)健康發(fā)展的一大問題,本研究旨在了解當前四川省若爾蓋縣牦牛群中BRV和BCoV的感染情況,為牦牛腹瀉的防控提供參考。

    1 材料

    1.1 樣本采集及處理 2017年8~10月從四川省若爾蓋縣達扎寺鎮(zhèn)(32份)、阿西鄉(xiāng)(35份)、麥溪鄉(xiāng)(29份)、降扎鄉(xiāng)(30份)、嫩洼鄉(xiāng)(35份)、占哇鄉(xiāng)(28份)、巴西鄉(xiāng)(29份)、紅星鄉(xiāng)(30份)、阿西茸鄉(xiāng)(28份)9個鄉(xiāng)鎮(zhèn)無菌采集牦牛(未接種過任何BRV、BCoV疫苗)血清樣本276份,4℃傾斜靜置過夜,5000r/min離心10min,分離血請,-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2 主要試劑與儀器 BCoV、BRV間接ELISA抗體檢測試劑盒;ELX 800酶標儀,各量程微量移液槍。

    2 抗體檢測

    采用間接ELISA抗體檢測試劑盒分別對276份牦牛血清進行BRV和BCoV特異性抗體檢測,操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。每次檢測分別設置2個陰性和2個陽性對照,并計算陰性孔OD平均值NCXˉ和陽性孔OD平均值PCXˉ。試驗成立的判斷標準為(PCXˉ-NCXˉ)≥0.5 且 NCXˉ≤0.3,如果試驗無效則應重新檢測。樣本S/P=(OD樣品-NCXˉ)/(PCXˉ-NCXˉ)。當S/P值≥0.4,則判為抗體陽性;當S/P值<0.4,則判為抗體陰性。

    3 結果及分析

    3.1 BRV抗體檢測結果 9個鄉(xiāng)鎮(zhèn)共計276份牦牛血清樣本中,有274份呈BRV陽性,平均陽性率為99.28%(表1)。其中阿西茸鄉(xiāng)的陽性率最低,為92.86%(26/28),其余8個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的陽性率均為100%。表明若爾蓋縣9個鄉(xiāng)鎮(zhèn)牦牛BRV的感染率都高。

    表1 9個鄉(xiāng)鎮(zhèn)BRV、BCoV檢測結果

    3.2 BCoV抗體檢測結果 276份血清樣本中共檢測出270份BCoV陽性血清,平均陽性率為97.83%(表1)。達扎寺鎮(zhèn)、阿西鄉(xiāng)、麥溪鄉(xiāng)、巴西鄉(xiāng)、紅星鄉(xiāng)、阿西茸鄉(xiāng)的陽性率均為100%;隆扎鄉(xiāng)最低,為86.67%(26/30);其次是占哇鄉(xiāng)(96.43%)、嫩洼鄉(xiāng)(97.14%)。表明若爾蓋縣9個鄉(xiāng)鎮(zhèn)牦牛BCoV的感染率均較高。

    3.3 BRV、BCoV混合感染情況 有268份血清同時檢出了BRV和BCoV特異性抗體,平均混合感染率為97.1%,其中隆扎鄉(xiāng)的混合感染率最低(86.67%)。

    4 結論與分析

    BRV引起的腹瀉常見于新生犢牛,以1~10日齡最為易感,在牦牛中傳播已有30余年[5]。周芳等[6]采用RT-PCR方法分別對來自西藏、青海、云南、四川的234份牦牛腹瀉樣本進行檢測,結果得出陽性率分別為60%、95%、90%、85.19%。李凡等[7]利用熒光定量RT-PCR方法檢測川西北14個牧場的腹瀉樣本,得出BRV陽性率為98.86%,可見BRV在牦牛群中廣泛流行。

    BCoV也是引起犢牛腹瀉的重要病原,還可引起成年牛冬痢和呼吸道疾病綜合征[8],該病毒對牦牛同樣易感。1990年姚火春等[9]證實BCoV存在于牦牛群中。2015年石琴等[10]對天山牦牛群抽查時發(fā)現,冠狀病毒(BCoV)陽性率達到100%。這些資料都表明BCoV在牦牛中的感染已經很普遍。疫苗免疫是防控BRV和BCoV的有效手段,但國內目前還沒有商品化的BRV和BCoV疫苗。因此,有必要加快研制BRV和BCoV疫苗,以有效防控犢牦牛腹瀉。

    本研究結果表明,BRV、BCoV兩種病毒感染在若爾蓋縣的9個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均存在,BRV陽性率為92.86%~100%,BCoV陽性率為86.67%~100%,混合感染率為86.67%~100%。由于本次試驗所選牦牛均未免疫過任何疫苗,故特異性抗體陽性可視為病原體自然感染產生。BRV和BCoV在若爾蓋縣感染嚴重,且混合感染現象突出,與何美琳等[3]的調查結果相似。BRV和BCoV混合感染,可加重病情,病牛死亡率高達50%~100%[4]。若爾蓋縣犢牦牛腹瀉危害嚴重,當地應盡快制定防控BRV和BCoV的有效措施。

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