梁海英,王雅麗,劉鐵梅,張麗榮
(1.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院 輸血科;2.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院 病理科,吉林 長春130033)
ABO血型鑒定是保證輸血安全的基礎,而對其亞型正確定型具有非常重要的臨床意義[1]。凡紅細胞上顯示較弱的B特異性抗原的血型稱為B亞型,B亞型在分類上與A亞型基本上平行。已經報道有B3、BX、Bm及Bel等亞型,跟Aend及Ay相當?shù)腂亞型還沒見報道[2]。本科室應一位無償獻血者要求對其血樣進行血型鑒定,發(fā)現(xiàn)該樣本出現(xiàn)正反定型不符現(xiàn)象,用不同試劑檢測出現(xiàn)不同的結果,并對其進行家系調查,現(xiàn)報告分析如下。
1.1樣本受檢者在加拿大獻血時,正定為O型,反定為B型,因正反定型不符而被拒絕,回國來本科室進行血型鑒定。因其母親為本院職工,母親同時也采集樣本。后來外婆在外院住院,外院檢測正定A型反定AB型,也采標本來本科室檢測,其余標本后來主動采集送檢。
1.2試劑抗-A、抗-B長春博德公司;抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H上海市血液生物醫(yī)藥有限責任公司產品;人ABO血型反定型用紅細胞,為長春博迅公司產品。
1.3儀器Baso 2002-2離心機,恒溫水浴箱。
1.4正反定型測試方法正定型測試方法和反定型試驗方法正好相反,其中正定型測試方法為用2滴抗血清加上1滴待檢者的2%紅細胞懸液,輕搖離心,觀察有無凝集反應,用“O”表示無凝集,用“+”表示凝集,分別在表格內標記清楚;而反定型測試方法為用2滴待檢者的血清加1滴標準紅細胞懸液,輕搖離心(離心機1000 rpm)60 s,觀察有無凝集反應,然后標記在相應表格內。
1.5吸收放散測試方法吸收用于驗證真假凝集反應,方法有冷吸收和熱吸收,我們采用冷吸收方法。用反復鹽水洗滌的已知抗原的標準B型1 ml壓積紅細胞,加1 ml被檢血清即抗-B血清,混勻后置4℃冰箱內吸收1 h,1 000 rpm離心,吸取上清液倍比稀釋,加標準B型紅細胞1滴,行吸收后血清效價分析,真凝集經吸收后凝集減弱或呈陰性;假凝集經吸收后凝集不變。
我們采用熱放散試驗方法,即將吸收后懷疑有抗體附著的紅細胞用生理鹽水洗洗5次,棄上清,加在壓積紅細胞中加等量的生理鹽水,60℃水浴中振蕩放散10 min,3 000 rpm高速離心2 min,取上清2排管,倍比稀釋,再分別加入標準的B型紅細胞懸液1滴和O型紅細胞懸液1滴,進行效價分析,如抗體較弱可預先用酶處理紅細胞后再做試驗。注意控制溫度,如果溫度降低,抗原抗體會重新結合。
1.6測定唾液血型物質方法人的唾液中分泌有ABH抗原,如果6℃冰箱保存1周其抗原活性不變。取待測者唾液離心取上清,煮沸再離心取清液。將抗-A、抗-B、抗-H倍比稀釋后與相應紅細胞反應,唾液用標化血清(效價128)等體積混合,再用相應的標準紅細胞檢測相應的抗體,觀察有無凝集反應進行分析判斷。
2.1血型鑒定結果見表1。
表1 血型鑒定結果
2.2吸收放散檢測結果
吸收液與標準B型紅細胞反應,待檢標本吸收液與標準B細胞的凝集強度比標準血清與標準B細胞吸收液的凝集強度低3個梯度;待檢標本放散液與標準B型、O型紅細胞反應,待檢標本放散液與標準B細胞凝集,與標準O細胞不凝集,說明待檢標本含有B抗原。
2.3唾液血型物質檢測結果
將處理過唾液和標化血清(效價為128)等體積混合,室溫放置10 min后,與標準B型紅細胞1 000 rpm離心60 s沒有凝集,從而判斷待檢唾液中含有B、H血型物質。
2.4家系調查結果如下圖
先證者在加拿大留學期間獻血,被告知血型有問題沒能獻血,回國后想得到確切結果來本科室檢測,因檢測出其血型為B亞型中的Bm型,同時對其母親檢測得到同樣的結果。后來外婆住院血型同樣正反定型不符,正定A型,反定AB型,又采樣到本科室檢測得出為ABm型。因其三代均有這樣的血型,遂進行了家系調查,因外祖父已經去世,沒法檢測,其余有親緣關系的均進行血型鑒定,得出結果如圖1。
根據該標本的相應血型血清學實驗結果,得出其血型為Bm型,這是B亞型的一種[3-5]。鑒于現(xiàn)在有些醫(yī)院,特別是二級醫(yī)院輸血科,雖然國家和省里的檢查總是要求受血者要進行ABO的正反定型檢測,仍然有部分醫(yī)院只做正定型,或者有的醫(yī)院即使做了正反定型,當正反定型不相符時只相信正定型,就按正定型來給患者輸血,這是非常危險的[6]。
當出現(xiàn)正反定型不符時應分析原因,通過科學的實驗鑒定出準確的血型。就如本例如果做為受血者,按正定型給予少量的O型紅細胞可能不會有什么反應,因為供者血血漿中的抗-B抗體可能被受血者血漿中的血型物質中和;但是如果大量輸O型血,供者血中的抗-B抗體可能與受血者紅細胞發(fā)生溶血反應。
對于一個擁有如此特殊血型的個體來說,有必要進行家系調查,讓直系家庭成員對自己的特殊血型有一定的了解,當發(fā)生需要輸血的情況時,為血型鑒定提供參考意見。