水產品中孔雀石綠藥物殘留檢測技術研究進展

葉文姣 楊衛(wèi)軍 張靜余

摘要 水產品中孔雀石綠藥物殘留嚴重威脅人類身體健康，加強水產品中孔雀石綠藥物殘留檢測刻不容緩。本文從樣品前處理技術、殘留檢測技術等方面概述了國內外水產品中孔雀石綠藥物殘留的檢測方法，并對其發(fā)展趨勢進行展望。

關鍵詞 水產品；孔雀石綠；檢測技術；研究進展

中圖分類號 S948 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2018）10-0252-02

Research Progress on Detection Technology of Malachite Green Residues in Aquatic Products

YE Wen-jiao 1 YANG Wei-jun 1 ZHANG Jing-yu 1 YE Zhan 2

（1 Shanghai Pudong Fisheries Technology Extension Center，Shanghai 201200； 2 Shanghai Ocean University）

Abstract The residues of malachite green in aquatic products seriously threaten human health，and it is urgent to strengthen the detection of malachite green residues in aquatic products. In this paper，the detection methods of malachite green residues in aquatic products were summarized from the aspects of sample pre-treatment technology and residue detection technology，and the development trend was prospected.

Key words aquatic products；malachite green；detection technology；research progress

孔雀石綠（Malachite Green，MG）是三苯甲烷類人工合成有機化合物。自1933年起作為治療寄生蟲、細菌、真菌感染的特效藥物，在水產養(yǎng)殖業(yè)中廣泛使用。但自20世紀90年代以來，孔雀石綠及其代謝產物的高殘留、“三致”等毒副作用逐步公開，美國、歐盟都將其作為水產養(yǎng)殖業(yè)的禁用藥物[1]。因此，加強對水產品中孔雀石綠藥物殘留檢測具有重要的意義。本文從樣品前處理技術和殘留檢測技術2個方面概述了國內外水產品孔雀石綠藥物殘留檢測研究進展。

1 樣品前處理技術

1.1 免疫親和色譜法

免疫親和色譜法是基于抗原-抗體特異性反應，對目標分析物實現(xiàn)富集與濃縮的一種高效的前處理方法。Xie等[2]采用免疫親和柱法對魚肉中的孔雀石綠、隱性孔雀石綠（LMG）等進行凈化與富集，同時用HPLC進行測定。結果表明，該方法具有簡單、高效、檢出限低等優(yōu)點。

1.2 深度共熔溶劑分離提取法

深度共熔溶劑最早于2003年由Abbott等發(fā)現(xiàn)并提出，其具有原料成本低、制備簡單、易降解、生物相容性好、無需純化等優(yōu)點。Aydin等[4]以深度共熔溶劑為綠色萃取溶劑，結合超聲輔助乳化液相微萃取分析魚樣中的孔雀石綠。

1.3 分子印跡技術

分子印跡技術是一種高效分離與分子識別的新興技術。Li等[5]在96孔酶標板上合成分子印跡聚合物膜，建立了一種分子印跡仿生酶聯(lián)免疫法檢測水產品中孔雀石綠藥物殘留。

2 殘留檢測技術

2.1 色譜分析法

HPLC和LC-MS是檢測水產品中孔雀石綠及其代謝產物含量最常用的方法。陳舒奕[6]采用LC-MS法對水產品中孔雀石綠等6大類49種藥物同時進行檢測。胡祥均等[7]通過高效液相色譜-光譜聯(lián)用法建立孔雀石綠的光譜數據庫，通過向量-子空間夾角判據的計算步驟，快速測定6種不同水產品中的MG含量。

2.2 免疫分析法

免疫分析法是利用抗原-抗體特異性反應來檢測各種目標分析物。黃志勇等[8]發(fā)明了一種水產品中孔雀石綠分子印跡膜仿生ELISA的快速檢測法，該方法將MG-MIPs作為仿生抗體，建立直接競爭的ELISA快速檢測法。

2.3 表面增強拉曼光譜技術

表面增強拉曼光譜技術（Surface-enhanced Raman spec-troscopy，SERS）是利用經特殊處理、表面粗糙的金屬作為活性基底，使目標分子的拉曼散射信號顯著增強的一種痕量檢測技術。余婉松[9]以粒徑為55 nm的金溶膠作為SERS活性基底，對7種不同魚肉中孔雀石綠及其代謝物進行檢測。Sun等[10]制備了聚甲基丙烯酸甲酯/石墨烯復合薄膜，以R6G作為探針分子，于5 min內完成魚樣中孔雀石綠的原位檢測。

2.4 分子印跡技術

分子印跡聚合物具有特異性強、選擇性高、化學性質穩(wěn)定等優(yōu)點。Wu等[11]結合表面分子印跡聚合物的優(yōu)點和最新量子點技術，在CdTe量子點表面合成分子印跡聚合物，制備了用于檢測魚樣品中孔雀石綠的靈敏熒光傳感器。

2.5 傳感器檢測法

傳感器是一種能將被測量信息按一定規(guī)律轉化為電信號或其他可被測量信號的檢測裝置。董建偉等[12]結合分子印跡和表面等離子體共振（SPR）技術，在SPR金片表面制備孔雀石綠分子印跡膜，并將其作為識別元件應用于表面等離子體共振傳感器檢測孔雀石綠。Nurul-Hidayah等[13]采用一種修飾酶生物傳感器檢測羅非魚中孔雀石綠和隱性孔雀石綠總量。

2.6 電化學分析法

電化學分析法具有靈敏度高、準確度高、測量范圍寬和操作簡單等優(yōu)點。Huang等[14]首次將磁性分子印跡聚合物與電化學發(fā)光法相結合，對魚樣中孔雀石綠含量進行檢測。Sacara等[15]研制了一種用CeO2納米粒子和Nafion（GC/CeO2/Nafion）修飾的新型玻碳電極，用于孔雀石綠的電化學檢測。

2.7 毛細管電泳法

毛細管電泳法具有分離效率高、分析速度快、樣品和試劑用量少、成本低、污染小等優(yōu)點。Maxwell等[16]采用非線性激光波混合光譜法和毛細管電泳法同時檢測孔雀石綠和結晶紫含量。

2.8 其他方法

Zhu等[17]將流動注射分析系統(tǒng)與雙波長重疊共振瑞利散射法相結合，建立了一種快速測定魚樣中孔雀石綠及其代謝產物含量的新方法。謝曉梅等[18]將水溶性量子點熒光探針法應用于水產品及養(yǎng)殖用水中孔雀石綠殘留量的測定。

3 結語

為滿足民眾飲食安全的需求，加強對水產品中孔雀石綠藥物殘留檢測方法的研究十分必要。色譜法具有靈敏度高、定性及定量準確等特點；免疫分析法適用于大批量樣品初篩；表面增強拉曼光譜技術適用于樣品的無損檢測；分子印跡技術、傳感器技術等具有特異選擇性強、設備簡單等特點。未來水產品中孔雀石綠藥物殘留的檢測將朝著簡便、快速、精準、便攜式、智能化的方向發(fā)展，量子點、納米技術、新型傳感器技術等也將成為其發(fā)展的新方向。

4 參考文獻

[1] SRIVASTAVA S，SINHA R，ROY D.Toxicological effects of malachite green[J].Aquatic Toxicology，2004，66（3）：319-329.

[2] XIE J，PENG T，CHEN DD，et al.Determination of malachite green，cry-stal violet and their leuco-metabolites in fish by HPLC-VIS detection after immunoaffinity column clean-up[J].Journal of Chromatography B，2013，913-914（2）：123-128.

[3] ABBOTT AP，CAPPER G，DAVIES DL，et al.Novel solvent properties of choline chloride/urea mixtures[J].Chem Commun，2003，9（1）：70-71.

[4] AYDIN F，YILMAZ E，SOYLAK M.A simple and novel deep eutectic so-lvent based ultrasound-assisted emulsification liquid phase microext-raction method for malachite green in farmed and ornamental aquarium fish water samples[J].Microchemical Journal，2017，132：280-285.

[5] LI L，PENG AH，LIN ZZ，et al.Biomimetic ELISA detection of malachite green based on molecularly imprinted polymer film[J].Food Chemistry，2017，229：403-408.

[6] 陳舒奕.水產品中多種藥物殘留同時檢測技術研究[D].福州：福建農林大學，2014.

[7] 胡祥均，劉柳，王捷，等.基于空間夾角判據測定水產品中孔雀石綠殘留量[J].食品科學，2016，37（12）：222-225.

[8] 黃志勇.一種水產品孔雀石綠分子印跡膜仿生ELISA的快速檢測方法：中國，201510274020.2[P].2015-08-12.

[9] 余婉松.基于金屬溶膠表面增強拉曼光譜技術檢測飼料及水產品中呋喃唑酮和孔雀石綠的研究[D].上海：上海海洋大學，2015.

[10] SUN H B，LIU H，WU Y Y.A flexible and highly sensitive Surface-En-hanced Raman Scattering film in-situ detection of malachite green on fish skin[J].Materials Letters，2017，207：125-128.

[11] WU L，LIN Z Z，ZHONG H P，et al.Rapid detection of malachite green in fish based on CdTe quantum dots coated with molecularly imprinted silica[J].Food Chemistry，2017，229：847-853.

[12] 董建偉，楊軍亭.孔雀石綠分子印跡膜-表面等離子體共振傳感器構建研究[J].陜西農業(yè)科學，2015，61（7）：67-70.

[13] NURUL HIDAYAH A P，F(xiàn)ARIDAH S，GAYAH A R，et al.Malachite Green and Leuco-Malachite Green Detection in Fish Using Modified Enzyme Biosensor[J].Procedia Chemistry，2016，20：85-89.

[14] HUANG B M，ZHOU X B，CHEN J，et al.Determination of malachite green in fish based on magnetic molecularly imprinted polymer extrac-tion followed by electrochemiluminescence[J].Talanta，2015，142：228-234.

[15] SACARA A M，CRISTEA C，MURESAN L M.Electrochemical detection of Malachite Green using glassy carbon electrodes modified with CeO2 nanoparticles and Nafion[J].Journal of Electroanalytical Chemistry，2017，792：23-30.

[16] MAXWELL E J，TONG W G.Sensitive detection of malachite green and crystal violet by nonlinearlaser wave mixing and capillary electrophor-esis[J].Journal of Chromatography B，2016，1020：29-35.

[17] ZHU J H，QIN M Y，LIU S P，et al.Incorporation of flow injection anal-ysis with dual-wavelength overlapping resonance Rayleigh scattering for rapid determination of malachite green and its metabolite in fish[J].Spectrochimica Acta，2014，130（17）：90-95.

[18] 謝曉梅，廖敏，黃宇，等.水溶性量子點熒光探針用于水產養(yǎng)殖違禁添加品孔雀石綠殘留量測定[J].浙江大學學報（農業(yè)與生命科學版），2017，43（3）：329-340.