陳化玉米對(duì)肉鴨生長性能、抗氧化功能及免疫器官指數(shù)的影響

朱正鵬，王瑜銘，丁 瑩，張遨然，燕 磊，黃李蓉，安 沙，李 巍

（1. 新希望六和股份有限公司，北京 100102；2. 成都楓瀾科技有限公司，四川成都 611731）

玉米是畜禽養(yǎng)殖所使用的主要能量原料之一。前些年收儲(chǔ)的玉米，隨著存貯時(shí)間的推移及糧庫保存條件的差異，其營養(yǎng)成分會(huì)發(fā)生變化，脂肪會(huì)產(chǎn)生不同程度的氧化[1]。崔小燕等[2]研究發(fā)現(xiàn)，使用長期儲(chǔ)存的玉米會(huì)降低肉雞的免疫功能，引發(fā)機(jī)體的氧化損傷，進(jìn)而可能導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降[3]。通常情況下，儲(chǔ)存期超過3年的糧食為陳化糧。而在畜禽養(yǎng)殖中，所用玉米的儲(chǔ)存期往往可能超過3年，甚至更久。因此，探討一定儲(chǔ)存期的玉米對(duì)畜禽生產(chǎn)性能的影響，對(duì)飼用玉米的合理儲(chǔ)存和使用有重要的指導(dǎo)意義。本試驗(yàn)選取2013年糧庫存貯玉米替代部分儲(chǔ)存1年的常規(guī)玉米，旨在研究陳玉米對(duì)肉鴨的生長性能、抗氧化功能和免疫器官發(fā)育的影響，為陳玉米的合理、有效使用提供相應(yīng)參考和科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取12日齡櫻桃谷肉鴨2 000只，隨機(jī)分為2組，即對(duì)照組、陳玉米組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)單圈飼養(yǎng)，每圈200只，試驗(yàn)期30 d。

1.2 試驗(yàn)飼糧 試驗(yàn)采用2013年東北區(qū)域糧庫存貯的玉米，儲(chǔ)存期4年；對(duì)照組玉米為2016年收獲，儲(chǔ)存期為1年。2種玉米的營養(yǎng)成分為實(shí)驗(yàn)室實(shí)測(cè)值（表1）。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，陳化玉米組用陳化玉米等量替代對(duì)照組中30%的常規(guī)玉米，對(duì)照組及陳化玉米組的飼糧組成及營養(yǎng)成分見表2。

表1 常規(guī)玉米與陳化玉米營養(yǎng)成分

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在彭山新希望飼料有限公司肉鴨試驗(yàn)場(chǎng)進(jìn)行。采用網(wǎng)上平養(yǎng)。采用標(biāo)準(zhǔn)的肉鴨飼養(yǎng)管理辦法。飼喂顆粒料，整個(gè)試驗(yàn)期間自由采食和飲水。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能 記錄每圈采食量；肉鴨試驗(yàn)開始和結(jié)束每圈單獨(dú)稱重、稱剩料量。計(jì)算各組平均日采食量（ADFⅠ）、平均日增重（ADG）和耗料增重比（F/G）。

表2 飼糧組成及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4.2 血清抗氧化指標(biāo) 分別于肉鴨26日齡和42日齡進(jìn)行頸部靜脈采血，每個(gè)重復(fù)選取2只鴨，采血10 mL，常溫下靜置0.5 h、3 500 r/min離心10 min，取上清液裝于離心管中，-20 保存，用于測(cè)定血清抗氧化指標(biāo)。

超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）分別采用試劑盒（A001-3、A003-1、A005）進(jìn)行測(cè)定，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，測(cè)定時(shí)按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

血清中維生素E和維生素C含量采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定。

維生素E血清樣品處理：取400 μL血清，加入400 μL乙醇，旋渦1 min，加入800 μL正己烷，旋渦3 min，10 000 r/min離心10 min，取600 μL上清液，殘?jiān)性偌尤?00 μL正己烷，旋渦3 min，10 000 r/min離心10 min，取上清液。合并2次上清液，氮?dú)獯蹈?，加?00 μL甲醇溶解，旋渦1 min，經(jīng)0.22 μm的微孔濾膜過濾后，取20 μL進(jìn)樣。

維生素C血清樣品處理：取200 μL血清，加入10 μL水，加入維生素C提取溶劑（0.35 mol/L高氯酸+0.27 mmol/L乙二酸四乙酸二鈉+ 0.1%二硫蘇糖醇）500 μL，旋渦2 min，10 000 r/min離心5 min，取上清液，經(jīng)0.22 μm的微孔濾膜過濾后，取20 μL。

色譜條件：色譜柱為C18 UG120色譜柱（4.6 m×25 cm，5 μm）。

測(cè)定維生素E時(shí)，流動(dòng)相為甲醇-水（v/v=97.5:2.5）；流速為1.0 mL/min；檢測(cè)波長292 nm；柱溫為35 ；進(jìn)樣量為20 μL。

測(cè)定維生素C時(shí)，流動(dòng)相為30 mmol/L KH2PO4（pH=3.0）-甲醇（v/v=96:4），檢測(cè)波長為243 nm；流速為1.0 mL/min；進(jìn)樣量為20 μL，柱溫為35 。

1.4.3 免疫器官指數(shù) 42 日齡時(shí)從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1只肉鴨，稱重，屠宰后立即采集脾臟、法氏囊，并稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)。

免疫器官指數(shù)=免疫器官重量（g）/體重（kg）

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)分析，試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05表示差異不顯著。

2 結(jié) 果

2.1 陳化玉米替代常規(guī)玉米對(duì)肉鴨生長性能的影響 由表3可知，與對(duì)照組相比，陳化玉米組顯著降低了肉鴨的末重和ADG（P＜0.05），但對(duì)肉鴨的ADFⅠ、F/G和成活率均無顯著的影響（P＞0.05）。

表3 陳化玉米替代常規(guī)玉米對(duì)肉鴨生長性能的影響

2.2 陳化玉米替代常規(guī)玉米對(duì)肉鴨免疫器官指數(shù)的影響由表4可知，與對(duì)照組相比，陳化玉米組對(duì)肉鴨脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)均無顯著影響（P＞0.05）。

表4 陳化玉米替代常規(guī)玉米對(duì)肉鴨免疫器官指數(shù)的影響 g/kg

2.3 陳化玉米替代常規(guī)玉米對(duì)肉鴨血清抗氧化能力的影響 由表5可知，與對(duì)照組相比，陳化玉米組對(duì)26日齡和42日齡肉鴨血清中SOD活性和MDA含量均無顯著影響（P＞0.05），對(duì)26日齡肉鴨血清中GSH-Px含量也無顯著影響（P＞0.05），但極顯著降低了42日齡肉鴨血清中GSH-Px活性（P＜0.01）。

表5 陳化玉米替代常規(guī)玉米對(duì)肉鴨血清抗氧化指標(biāo)、維生素E和維生素C含量的影響

與對(duì)照組相比，陳化玉米組對(duì)26日齡肉鴨血清中維生素E、42日齡血清中維生素E和維生素C含量均無顯著影響（P＞0.05），但陳化玉米組顯著降低了26日齡肉鴨血清中維生素C含量（P＜0.05）。

3 討 論

3.1 陳化玉米對(duì)肉鴨生產(chǎn)性能的影響 玉米在動(dòng)物飼糧中應(yīng)用廣泛，在配方中較其他原料添加比例更高，其內(nèi)在營養(yǎng)成分的變化會(huì)影響動(dòng)物的生長效率和生理健康。玉米在儲(chǔ)存過程中，隨著儲(chǔ)存時(shí)間的增長，脂類部分會(huì)出現(xiàn)水解導(dǎo)致酸敗氧化，改變淀粉糊化特性，降低pH，改變酶活性，影響動(dòng)物的正常生長[4-5]。通過實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)分析可知，與對(duì)照組玉米相比，陳化玉米水分略低，粗蛋白質(zhì)略高，粗灰分和粗纖維均較高，但容重比正常玉米低，脂肪酸值高17.8 g/100g。根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，本試驗(yàn)采用30%陳化玉米替代常規(guī)玉米，研究該水平下陳化玉米對(duì)肉鴨生長的影響。同時(shí)本試驗(yàn)配方并非等能等氮設(shè)計(jì)，而是用30%陳化玉米等量直接替代常規(guī)玉米。通過對(duì)日糧進(jìn)行檢測(cè)分析，二者營養(yǎng)水平差異較小。本試驗(yàn)結(jié)果表明，使用30%陳化玉米替代常規(guī)玉米后，肉鴨的ADG和出欄體重顯著降低，但對(duì)肉鴨的ADFⅠ和F/G沒有顯著影響。而本研究是在肉鴨12日齡時(shí)開始飼喂陳化玉米日糧，僅說明了中后期添加30%陳化玉米對(duì)肉鴨生長性能的影響。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，儲(chǔ)存1年的玉米飼喂肉鴨對(duì)ADG、ADFⅠ和F/G均沒有顯著影響[6]；儲(chǔ)存5年的玉米降低了肉雞0～3周體增重，但對(duì)采食量和F/G沒有顯著影響[7]。因此，玉米存儲(chǔ)期不同以及飼喂階段不同導(dǎo)致陳化玉米對(duì)肉鴨生長性能的影響有所差異。

3.2 陳化玉米對(duì)肉鴨免疫器官指數(shù)的影響 脾臟和法氏囊是禽類重要的免疫器官，是機(jī)體免疫細(xì)胞產(chǎn)生、分化并發(fā)揮效應(yīng)的場(chǎng)所[8]。免疫器官指數(shù)在正常范圍內(nèi)的變化可以理解為其發(fā)育的程度。本研究中，添加陳化玉米后對(duì)肉鴨脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)沒有顯著影響。陳化玉米與對(duì)照組玉米的脂肪酸值在50～70 g/100g，由脂肪酸帶來對(duì)免疫器官的刺激或抑制作用并沒有較大差異。有研究發(fā)現(xiàn)，4%氧化魚油顯著降低了21日齡肉雞的法氏囊指數(shù)[9]，而5%高油脂對(duì)肉雞14日齡和21日齡的脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)沒有顯著影響[10]。崔小燕等[2]分別用儲(chǔ)存4年、2年和0年玉米（脂肪酸值分別為91.8、56.23、43.04 mg/100g）配制飼糧，各組間42日齡肉雞法氏囊指數(shù)沒有顯著差異。本試驗(yàn)所用陳化玉米的脂肪酸值為68 mg/100g，也未對(duì)免疫器官指數(shù)產(chǎn)生顯著作用，與以上研究結(jié)果一致。

3.3 陳化玉米對(duì)肉鴨血清抗氧化、維生素E和維生素C含量的影響 血清中GSH-Px、SOD活性以及MDA水平均是反映機(jī)體抗氧化能力的關(guān)鍵指標(biāo)[11]。GSH-Px能催化谷胱甘肽變?yōu)檠趸凸入赘孰?，使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物，從而保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及功能不受過氧化物的干擾及損害[12]。因此，血清中GSHPx活性越高，機(jī)體保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)及功能的能力越強(qiáng)；反之，保護(hù)能力越弱。MDA是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，其含量反映脂質(zhì)過氧化及細(xì)胞損傷的程度。研究表明，陳化玉米飼喂肉鴨后，機(jī)體攝入游離脂肪酸增加，導(dǎo)致外源性自由基增多，機(jī)體損傷增加，血清抗氧化能力降低[13]；氧化魚油顯著降低了蛋雞血清中GSH-Px活性，但對(duì)SOD活性沒有顯著影響[14]。本研究結(jié)果類似，陳化玉米極顯著降低了42日齡肉鴨血清GSH-Px活性。

血清抗氧化劑還包括多種抗氧化劑，如非酶促體系中維生素E和維生素C，可協(xié)同阻止脂肪過氧化。研究表明，伴隨著維生素E添加量（0～20 ⅠU/kg）增加可提高蛋鴨血液中GSH-Px活性[15]。同樣，維生素C具有抗氧化作用和間接的抗應(yīng)激特性[16]，保護(hù)機(jī)體免于自由基的威脅。血清中維生素C水平降低，則表明機(jī)體清除自由基的能力減弱。劉比一等[13]研究表明，飼喂儲(chǔ)存時(shí)期分別為2、3、4、5年的陳化玉米對(duì)42 d肉雞血清維生素C和維生素E含量的影響均不顯著。與本試驗(yàn)結(jié)果一致，可能原因是一定儲(chǔ)存期的玉米中脂肪酸影響不足以引起機(jī)體的抗氧化失衡。而本試驗(yàn)中，對(duì)于26日齡肉鴨，陳化玉米會(huì)顯著降低血清維生素C水平，說明陳化玉米對(duì)生長前期肉鴨血清維生素C的影響較大，而對(duì)生長后期肉鴨的影響并不顯著。

4 結(jié) 論

飼糧中使用30%陳化玉米會(huì)降低肉鴨的生長性能，降低血清GSH-Px活性，對(duì)機(jī)體抗氧化能力有一定影響。