九節(jié)菖蒲水提液對小鼠胃腸運動的作用

黃春佳 梁華益 韋家河 農(nóng)生斌 韓光順 焦 雯 黃彥峰 (右江民族醫(yī)學院，廣西 百色 533000)

九節(jié)菖蒲(Rhizoma Anemones Altaicae)為毛莨科植物阿爾泰銀蓮花(AnemonealtaicaFisch.ex C.A.Mey)根莖，又名小菖蒲、節(jié)菖蒲、外菖蒲、雞爪蓮、穿骨七、九節(jié)離、京玄參、菊形雙瓶梅等，有效成分為β-谷甾醇、琥珀酸、5-羥基乙酰丙酸、白頭翁、阿魏酸、綠原酸、苯丙氨酸等〔1～3〕，有芳香開竅、化痰、醒脾安神、驅(qū)風解毒、健胃作用，主治胸脹腹悶、癲癇、神經(jīng)官能癥〔4～6〕、惡心嘔吐、消化不良、脘腹痞滿〔7〕等。在《藥材資料匯編》也有記載，九節(jié)菖蒲“避穢，開竅，宣氣，逐痰，治神經(jīng)衰弱，消化不良”〔8〕，可見九節(jié)菖蒲能影響胃腸運動，但未見其對小鼠胃排空、腸推進影響的相關(guān)實驗報道。本文觀察九節(jié)菖蒲水提液對小鼠在體胃腸運動的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 九節(jié)菖蒲(廣西百色市售);硫酸阿托品注射液(天津金耀藥業(yè)有限公司售，批號:1502051);甲硫酸新斯的明注射液(上海信誼金朱藥業(yè)有限公司售，批號:1630302);西沙必利(浙江京新藥業(yè)股份有限公司售，批號:B1501041);活性炭(西隴化工股份有限公司售，批號:150114);羧甲基纖維素鈉(成都市科龍化工試劑廠售，批號:20120727)。昆明小鼠150只，體重20～30 g，雌雄各半，由右江民族醫(yī)院實驗動物中心提供，合格證號:SCXK(桂)2012-0003。ARII40/C電子天平(奧豪斯，上海公司生產(chǎn))。

1.2 九節(jié)菖蒲水提液制備〔9〕取500 g九節(jié)菖蒲，常溫浸泡于10倍量蒸餾水中18 h，大火煮沸后慢火煎煮1 h，過濾留液，取濾渣加入10倍量蒸餾水大火煮沸后慢火煎煮1 h，過濾，合并兩次濾液，用16層紗布過濾，蒸發(fā)濃縮至100 ml，即濃度為5 g/ml，冰箱冷藏，用時恢復至室溫。

1.3 炭末懸液制備方法〔9〕取10 g活性炭末、2 g羧甲基纖維素鈉溶于200 ml雙蒸水中，攪拌均勻制成炭末懸液，冰箱冷藏，用時恢復至室溫。

1.4 九節(jié)菖蒲水提液對無負荷小鼠胃腸運動的影響〔9～11〕取小鼠50只(雌雄各半)，按體重隨機分為正常對照組、西沙比利組(0.003 g/kg)、九節(jié)菖蒲水提液低、中、高劑量(1.25、2.50、5.00 g/kg)組，每組 10只，連續(xù)灌胃給藥7 d，每天一次，每組均按每公斤體重劑量灌胃給藥，正常對照組灌胃等體積蒸餾水。末次給藥前，小鼠禁食不禁水 12 h，灌胃 30 min后，按0.25 ml/10 g給予炭末灌胃給藥，20 min后采用頸椎脫臼法處死小鼠，迅速結(jié)扎胃賁門及幽門，取出胃，濾紙吸干稱胃全重，沿胃大彎剪開胃體，蒸餾水洗凈內(nèi)容物，濾紙吸干稱胃凈重。胃殘留率(%)=(胃全重－胃凈重)/炭末懸液質(zhì)量×100%，以胃殘留率為指標，比較小鼠胃排空速度，殘留率越低，說明胃排空能力越強，反之越弱。同時取出小腸，測量幽門至回盲部距離為小腸全長，幽門至炭末前端距離為炭末推進長度。炭末推進率(%)=炭末推進長度/小腸全長×100%。以炭末推進率為指標，比較小腸推進速度，推進率越高，說明推進能力越強，反之越弱。

1.5 九節(jié)菖蒲水提液對新斯的明負荷小鼠胃腸亢進模型的影響〔9～11〕取小鼠50只(雌雄各半)，按體重隨機分為正常對照組、單純新斯的明組、新斯的明+九節(jié)菖蒲水提液低、中、高劑量(1.25、2.50、5.00 g/kg)組，每組10只。各組給藥時間、劑量、方法同1.4，單純新斯的明組灌胃等體積蒸餾水。末次灌胃前，小鼠禁食不禁水12 h，灌胃時各組同時腿部肌肉注射新斯的明0.05 mg/kg，正常對照組注射等體積蒸餾水，30 min后，操作及計算方法同1.4。

1.6 九節(jié)菖蒲水提液對阿托品負荷小鼠胃腸抑制模型的影響〔9～11〕小鼠50只(雌雄各半)，按體重隨機分正常對照組、單純阿托品組、阿托品+九節(jié)菖蒲水提液低、中、高劑量(1.25、2.50、5.00 g/kg)組，每組 10只。各組給藥時間、劑量、方法同1.4，單純阿托品組灌胃等體積蒸餾水。末次灌胃前，小鼠禁食不禁水12 h，灌胃時各組同時腿部肌肉注射阿托品0.5 mg/kg，正常對照組注射等體積蒸餾水，30 min后，操作及計算方法同1.4。

1.7 統(tǒng)計學處理 使用統(tǒng)計軟件SPSS17.0進行單因數(shù)方差分析。

2 結(jié)果

2.1 九節(jié)菖蒲水提液對無負荷小鼠胃腸運動的影響

與正常對照組比較，西沙比利組及九節(jié)菖蒲中、高劑量組小腸推進率均升高(P=0.005，P=0.010，P＜0.001)，提示西沙比利組造模成功，中、高劑量組有促進正常小鼠小腸推進作用;九節(jié)菖蒲各劑量組胃殘留率均顯著升高(P=0.003，P=0.002，P＜0.001)，說明九節(jié)菖蒲水提液有抑制無負荷小鼠胃排空作用且隨劑量增加作用愈顯著。與西沙比利組比較，九節(jié)菖蒲高劑量組小腸推進率顯著升高，九節(jié)菖蒲各劑量組胃殘留率均顯著升高(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)，說明其作用效果優(yōu)于西沙比利。見表1。

2.2 九節(jié)菖蒲水提液對新斯的明負荷小鼠胃腸亢進的影響 與正常對照組比較，單純新斯的明組小腸推進率顯著提高(P=0.014)，胃殘留率顯著降低(P=0.035)，提示胃腸亢進模型造模成功，九節(jié)菖蒲各劑量組小腸推進率均顯著提高(均P＜0.001)，提示九節(jié)菖蒲有促進新斯的明加快小腸推進作用，九節(jié)菖蒲中、高劑量組胃殘留率均升高(均P＜0.01)，提示九節(jié)菖蒲中、高劑量有抑制新斯的明、減慢胃排空作用。

與單純新斯的明組比較，九節(jié)菖蒲高劑量組小腸推進率升高(P=0.010)，提示其效果優(yōu)于單純新斯的明，有協(xié)同新斯的明促進小腸蠕動作用，九節(jié)菖蒲各劑量組胃殘留率均不同程度升高(P=0.022，P＜0.001，P＜0.001)，提示九節(jié)菖蒲有拮抗新斯的明、抑制胃運動作用。見表1。

2.3 九節(jié)菖蒲水提液對阿托品負荷小鼠胃腸抑制的影響 與正常對照組比較，單純阿托品組小腸推進率顯著降低(P=0.027)，胃殘留率顯著升高(P=0.002)，提示胃腸抑制模型造模成功，九節(jié)菖蒲各劑量組小腸推進率均顯著升高(P=0.030，P=0.007，P＜0.001)，提示九節(jié)菖蒲有抑制阿托品，加快小腸推進作用，九節(jié)菖蒲中、高劑量組胃殘留率均顯著升高(均P＜0.001)，提示中、高劑量九節(jié)菖蒲有抑制胃排空作用。與單純阿托品組比較，九節(jié)菖蒲各劑量組小腸推進率均明顯升高(均P＜0.001)，提示九節(jié)菖蒲有拮抗阿托品，促進小腸推進作用，九節(jié)菖蒲低劑量組胃殘留率顯著降低(P=0.018)，高劑量組顯著升高(P＜0.001)，提示低劑量九節(jié)菖蒲對抑制胃排空的作用不如阿托品，而高劑量優(yōu)于阿托品。見表1。

表1 各組無負荷小鼠、新斯的明負荷小鼠、阿托品負荷小鼠胃腸運動(，n=10，%)

表1 各組無負荷小鼠、新斯的明負荷小鼠、阿托品負荷小鼠胃腸運動(，n=10，%)

與正常對照組比較:1)P＜0.01，2)P＜0.05;與西沙比利組比較:3)P＜0.01;與單純新斯的明組比較:4)P＜0.01，5)P＜0.05;與單純阿托品組比較:6)P＜0.01，7)P＜0.05

組別 無負荷小鼠 新斯的明負荷小鼠 阿托品負荷小鼠小腸推進率 胃殘留率 小腸推進率 胃殘留率 小腸推進率 胃殘留率九節(jié)菖蒲 低劑量組 69.89±10.39 10.45±4.021)3) 79.02±7.031) 6.40±2.815) 71.30±6.642)6) 7.10±3.267)中劑量組 73.47±6.382) 10.66±2.361)3) 81.03±6.471) 12.90±4.781)4)74.17±22.401)6) 13.23±2.881)高劑量組 94.11±8.851)3) 16.02±3.431)4) 86.16±9.021)6) 22.82±3.431)4) 83.53±12.991)6) 23.18±6.411)6)正常對照組 60.12±6.67 6.14±1.54 60.12±6.67 6.14±1.54 60.12±6.67 6.14±1.54西沙比利組 71.48±9.121) 3.09±0.802) － － － －單純新斯的明組 － － 72.79±10.372) 3.12±0.992) － －單純阿托品組 － － － － 48.72±18.62) 10.49±2.021)

3 討論

胃腸運動在食物消化吸收中起著重要作用，胃具有收納食物，對之進行酸化、研磨形成食糜，節(jié)奏性地排送入腸的功能。食糜入腸后，通過神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)，在完整機體內(nèi)，胃腸運動的調(diào)節(jié)由交感神經(jīng)系統(tǒng)、副交感神經(jīng)系統(tǒng)、腸神經(jīng)系統(tǒng)及多種體液因素共同調(diào)控〔12〕。交感神經(jīng)神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素，激活腎上腺素能受體，抑制胃腸運動。副交感神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，激活胃腸道平滑肌細胞膜上M受體，促進胃腸運動。壁內(nèi)神經(jīng)叢局部反射，獨立支配胃腸運動，當食物刺激胃壁引起壁內(nèi)神經(jīng)叢局部反射，使胃運動增強，促進排空〔13〕。體液調(diào)節(jié)主要為胃腸激素(促胃液素、胃動素等)調(diào)節(jié)。食物對胃的刺激擴張和食物中某些化學成分可引起胃腸激素釋放，影響胃腸運動〔13〕。本實驗結(jié)果提示，九節(jié)菖蒲水提液對正常小鼠小腸運動有促進作用，而對正常小鼠胃運動有抑制作用，與黃雪梅〔7〕研究結(jié)果不同，分析主要有以下原因:①九節(jié)菖蒲產(chǎn)地不同，提取的成分可能有所不同。②九節(jié)菖蒲的劑量不同，大劑量和小劑量可能產(chǎn)生不同的作用。③本實驗研究的是九節(jié)菖蒲對正常和病理狀態(tài)下小鼠胃腸運動的影響。

胃腸道平滑肌上主要存在腎上腺素α和β受體、膽堿能M受體、組胺受體及多種胃腸激素受體〔9〕。新斯的明為易逆性抗乙酰膽堿酯酶藥，興奮M受體，促進胃腸道平滑肌收縮，促進胃腸活動〔14〕。本實驗結(jié)果顯示預先給予九節(jié)菖蒲水提液高、中、低三種劑量灌胃，均可以拮抗新斯的明對胃運動的作用，高劑量可協(xié)同新斯的明對小腸運動的作用。阿托品為膽堿受體阻斷藥，競爭性拮抗M膽堿受體，抑制胃腸道平滑肌痙攣，降低蠕動的幅度和頻率〔14〕。本實驗提示，預先給予高劑量九節(jié)菖蒲水提液灌胃可以協(xié)同阿托品對胃運動的作用，低劑量可拮抗阿托品對胃運動的作用，預先給予九節(jié)菖蒲水提液高、中、低三種劑量灌胃，均可以拮抗阿托品對小腸運動的作用。綜上，九節(jié)菖蒲水提液對胃腸道的作用與其平滑肌細胞膜上的M膽堿能受體有關(guān)，九節(jié)菖蒲作用機制還有待進一步研究。