博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞生長性能、血清生化指標(biāo)及脂質(zhì)過氧化的影響

胡貴麗 劉 靖 劉勇強(qiáng) 宋澤和 范志勇 張石蕊 賀 喜

(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，飼料安全與高效利用教育部工程研究中心，湖南畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，長沙 410128)

博落回又名號筒桿、山號筒，隸屬罌粟科，為多年生草本植物；其果實中含有較豐富的生物堿，主要有血根堿(sanguinarine)、原阿片堿(protopine)、白屈菜紅堿(chelerythrine)、α-別隱品堿(α-allocryptopine)、β-別隱品堿(β-allocryptopine)等。博落回生物堿的藥理活性較廣，如抗菌消炎、抗腫瘤、改善肝功能和殺蟲作用等，可以替代抗生素發(fā)揮中藥作用。

植物多糖廣泛存在于植物中，是一類由單糖通過糖苷鍵組合而成的化合物，常見的有黃芪多糖、枸杞多糖、海藻多糖和茶籽多糖等。研究發(fā)現(xiàn)，植物多糖具有降血糖、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用。

目前，已有許多關(guān)于博落回生物堿和茶籽多糖在動物生產(chǎn)中的研究。饒華等研究顯示，博落回提取物能顯著改善斷奶仔豬的生長性能。李美奎等報道認(rèn)為，飼糧中添加5.0 mg/kg博落回提取物能顯著提高仔豬的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)，降低料重比(F/G)，極顯著降低血清丙二醛(MDA)含量。徐春燕研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加一定量的苜蓿多糖和黃芪多糖能提高肉仔雞的抗氧化能力，顯著提高血清總抗氧化能力(T-AOC)，降低血清MDA含量。陳桂冰等研究顯示，茶籽多糖能清除羥基自由基、氮自由基、過氧化氫等，同時對過氧化氫引起的DNA氧化損傷具有保護(hù)作用。但有關(guān)博落回生物堿和茶籽多糖在家禽生產(chǎn)中的研究還較少。因此，本試驗旨在研究博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞生長性能、血清生化指標(biāo)及脂質(zhì)過氧化的影響，從飼料添加劑角度為其開發(fā)利用提供條件，并探索其作為新型、高效綠色飼料添加劑的可能性，從而為博落回生物堿和茶籽多糖在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

博落回生物堿：總堿含量為70%，其中血根堿占60%，白屈菜紅堿占20%，由湖南中藥提取工程研究中心提供；茶籽多糖：純度為43.4%，由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院油脂教研室提供；抗生素：前期為抗敵素，后期為黃霉素。

1.2 試驗動物與試驗設(shè)計

選擇同批次、遺傳背景相同、發(fā)育正常的1日齡黃羽肉雞750羽，隨機(jī)分為5個組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)25只雞。各組雞的初始體重?zé)o顯著差異(P>0.05)。采用單因子隨機(jī)試驗設(shè)計，對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加抗生素(1～28日齡為10 mg/kg抗敵素，29～56日齡為5 mg/kg黃霉素；抗生素組)、茶籽多糖(0.04%；多糖組)、博落回生物堿(1～28日齡為10 mg/kg，29～56日齡為20 mg/kg；博落回組)、茶籽多糖(0.04%)+博落回生物堿(1～28日齡為10 mg/kg，29～56日齡為20 mg/kg；多糖+博落回組)。抗生素的添加符合我國現(xiàn)行法律法規(guī)規(guī)定。試驗雞采用粉料飼喂。試驗期56 d，分為1～28日齡和29～56日齡2個階段進(jìn)行。

1.3 試驗飼糧

基礎(chǔ)飼糧參照NRC(1994)和《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)中的肉雞營養(yǎng)需要，選用玉米、豆粕等原料配制而成，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of diets：Cu 25 mg，F(xiàn)e 96 mg，Mn 105.4 mg，Zn 98 mg，Na 0.9 mg，I 1.29 mg，Se 0.225 mg，VA 12 000 IU，VD32 500 IU，VE 20 mg，VK33.0 mg，VB13.0 mg，VB28.0 mg，VB67.0 mg，VB120.03 mg，泛酸 pantothenic acid 20.0 mg，煙酸 niacin 50.0 mg，生物素 biotin 0.1 mg，葉酸 folic acid 1.5 mg。2)營養(yǎng)水平為計算值。Nutrient levels were calculated values.

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗雞舍選用開放式，采用高低床平養(yǎng)，光照為14 h光明：10 h黑暗(14 L:10 D)；1～7日齡30～33 ℃、8～14日齡27～29 ℃、15～21日齡24～26 ℃、22～28日齡22～23 ℃、29～56日齡20～21 ℃，保持正常溫度，舍內(nèi)采取鍋爐控溫，自然通風(fēng)。定期打掃雞舍衛(wèi)生，相對濕度保持在55%～65%，自由飲水和采食，按常規(guī)程序免疫。

1.5 測定指標(biāo)與方法

1.5.1 生長性能

試驗期間觀察試雞的生長和健康狀況，按重復(fù)記錄飼料消耗量；于28、56日齡早晨稱重(空腹8 h)，計算各組試雞的ADFI、ADG和F/G。

1.5.2 血清生化指標(biāo)

于28、56日齡早晨(空腹8 h)，分別從每個重復(fù)中選擇1只接近該組平均體重的試雞，翅靜脈采血10 mL，靜置凝固后，3 000 r/min離心10 min，收集離心管上層血清分裝，于-20 ℃保存，用于血清生化指標(biāo)的測定。血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)活性和尿素氮(UN)含量采用邁瑞B(yǎng)S-200全自動生化分析儀測定，試劑盒均購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，所有指標(biāo)嚴(yán)格按照相關(guān)試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.5.3 胴體性狀和肌肉MDA含量

于56日齡時，分別從每個重復(fù)中選擇1只接近該組平均體重的試雞，稱重后頸部放血、屠宰，參考《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T 823—2004)計算胸肌率和腿肌率。計算公式如下：

胸肌率(%)=100×胸肌重/全凈膛重；腿肌率(%)=100×腿肌重/全凈膛重。

取相同部位的胸肌50 g左右，于4 ℃保存，用于胸肌MDA含量的測定。測定方法如下：將肌肉于4 ℃保存2、4、6 d后，嚴(yán)格按照南京建成生物工程研究所試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.6 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件的one-way ANOVA程序進(jìn)行系統(tǒng)分析，組間差異顯著者則采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，以P<0.05為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。試驗結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié) 果

2.1 生長性能

由表2可知，1～28日齡時，各組黃羽肉雞的ADG、ADFI和F/G均無顯著差異(P>0.05)。29～56日齡和1～56日齡時，博落回組的ADFI顯著高于其他各組(P<0.05)，對照組、抗生素組、多糖組和多糖+博落回組的ADFI無顯著差異(P>0.05)；各組的ADG和F/G均無顯著差異(P>0.05)。

表2 博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞生長性能的影響

續(xù)表2項目 Items對照組 Control group抗生素組 Antibiotic group多糖組 Polysaccharide group博落回組 Macleaya cordata group多糖+博落回組 Polysaccharide+Macleaya cordatagroupP值 P-value1～56日齡 1 to 56 days of age平均日增重 ADG/(g/d)29.42±0.7229.56±0.2429.61±0.7430.54±0.2729.73±0.180.532平均日采食量 ADFI/(g/d)69.30±1.07b69.93±0.55b69.47±1.07b72.73±1.35a70.29±0.77b0.011料重比 F/G2.36±0.032.37±0.042.35±0.032.38±0.042.36±0.030.412

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。In the same row, values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

2.2 血清生化指標(biāo)

由表3可知，28日齡時，與對照組相比，其他各組黃羽肉雞的血清ALT、LDH活性和UN含量顯著降低(P<0.05)，抗生素組、多糖組、博落回組和多糖+博落回組的血清ALT、LDH活性和UN含量無顯著差異(P>0.05)；與對照組相比，其他各組的血清ALP活性極顯著降低(P<0.01)，多糖組、博落回組和多糖+博落回組的血清ALP活性極顯著低于抗生素組(P<0.01)，多糖組、博落回組和多糖+博落回組的血清ALP活性無顯著差異(P>0.05)；各組的血清AST活性無顯著差異(P>0.05)。56日齡時，與對照組相比，其他各組的血清ALP活性極顯著降低(P<0.01)，血清LDH活性顯著降低(P<0.05)，抗生素組、多糖組、博落回組和多糖+博落回組的血清ALP、LDH活性無顯著差異(P>0.05)；各組的血清ALT、AST活性和UN含量均無顯著差異(P>0.05)。

表3 博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

續(xù)表3項目 Items對照組 Control group抗生素組 Antibiotic group多糖組 Polysaccharide group博落回組 Macleaya cordatagroup多糖+博落回組 Polysaccharide+Macleaya cordatagroupP值P-value56日齡 56 days of age谷丙轉(zhuǎn)氨酶 ALT/(U/L)13.23±1.8210.85±3.469.47±3.208.86±5.3510.30±2.660.284谷草轉(zhuǎn)氨酶 AST/(U/L)315.88±27.94307.98±24.93298.22±13.62288.97±13.15289.00±23.860.220堿性磷酸酶 ALP/(U/L)2 823.10±192.80Aa2 392.66±127.70Bbc2 281.68±187.88Bbc2 251.54±166.22Bc2 289.50±169.14Bbc<0.001乳酸脫氫酶 LDH/(U/L)541.47±76.84a453.98±42.32b449.18±47.02b439.78±53.22b427.78±85.87b0.049尿素氮 UN/(mmol/L)0.18±0.030.21±0.050.15±0.070.16±0.020.17±0.030.475

2.3 胴體性狀和肌肉MDA含量

由表4可知，與對照組相比，博落回組黃羽肉雞的胸肌率和腿肌率、多糖組和多糖+博落回組的腿肌率均顯著提高(P<0.05)；與抗生素組相比，博落回組和多糖+博落回組的胸肌率和腿肌率及多糖組的腿肌率均顯著提高(P<0.05)；博落回組的胸肌率顯著高于多糖組(P<0.05)，與多糖+博落回組無顯著差異(P>0.05)；多糖組、博落回組和多糖+博落回組的腿肌率無顯著差異(P>0.05)。肌肉于4 ℃保存2、4、6 d后，抗生素組、多糖組、博落回組和多糖+博落回組的肌肉MDA含量極顯著低于對照組(P<0.01)，多糖組、博落回組和多糖+博落回組的肌肉MDA含量無顯著差異(P>0.05)；2 d時，多糖組、博落回組和多糖+博落回組的肌肉MDA含量極顯著低于抗生素組(P<0.01)；6 d時，多糖組、博落回組和多糖+博落回組的肌肉MDA含量顯著低于抗生素組(P<0.05)。

表4 博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞胴體性狀和肌肉MDA含量的影響

3 討 論

3.1 博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞生長性能的影響

本試驗結(jié)果表明，飼糧中添加博落回生物堿在一定程度上提高了黃羽肉雞的ADG，顯著提高了ADFI，而F/G與對照組和抗生素組相比無顯著差異；博落回組黃羽肉雞的生長性能與抗生素組相比無顯著差異。這一結(jié)果與Vieira等在飼糧中添加37.5 mg/kg博落回提取物可提高21日齡火雞的ADG相一致。云龍研究顯示，飼糧中添加博落回血根堿提取物能顯著改善黃羽肉雞生長后期的ADG和ADFI。Kantas等[10]和蔡鵬等[11]在仔豬上的研究顯示，飼糧中添加博落回生物堿可改善斷奶仔豬的生長性能。飼糧中添加博落回生物堿可改善動物的ADG、ADFI和飼料利用效率，一方面可能是因為博落回生物堿中重要的成分血根堿具有抑制膽堿酯酶活性、刺激唾液分泌等功能及利尿、外周抗腎上腺素解交感等作用[12]，且通過抑制芳香族氨基酸脫羧酶調(diào)節(jié)色氨酸-5-羥色胺代謝途徑，從而提高動物的采食量[13]；另一方面可能是因為博落回生物堿能保障腸道健康，促進(jìn)腸細(xì)胞增值、分化、更新，促進(jìn)小腸對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而提高了動物的體增重[14]。

目前，多種被分離出來的植物多糖均表現(xiàn)出促生長作用。本試驗結(jié)果也顯示，飼糧中添加茶籽多糖能改善黃羽肉雞的生長性能，作用效果與抗生素相當(dāng)。這與袁鐘宇等[15]試驗結(jié)果相似，飼糧中添加300 mg/kg茶籽多糖對肉雞生長性能的影響與5 mg/kg恩拉霉素相當(dāng)。李學(xué)軍等[16]研究顯示，飼糧中添加茶籽多糖能改善仔豬的生長性能。茶籽多糖對肉雞生長性能的改善可能與其促進(jìn)腸道菌群平衡，提高動物健康水平，從而促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和蛋白質(zhì)的合成有關(guān)。

3.2 博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血清AST和ALT活性是檢查肝功能是否正常的理化指標(biāo)，肝功能不全時，血清中的AST和ALT活性會升高[17]。本試驗中，多糖組、博落回組和多糖+博落回組黃羽肉雞的血清ALT和AST活性低于對照組，除28日齡時的血清ALT活性與對照組相比差異顯著外，其他均無顯著差異，這表明茶籽多糖和博落回生物堿不會給機(jī)體代謝帶來不良影響，且不會損傷肝臟細(xì)胞。正常情況下，血清中的ALP和LDH活性較低，當(dāng)細(xì)胞因各種因素(如應(yīng)激)刺激而受到損傷時，細(xì)胞膜的通透性增加，ALP釋放入血液的速度增加，血清ALP活性顯著升高[18]；當(dāng)機(jī)體組織細(xì)胞受到廣泛損傷時，LDH活性顯著升高。本試驗結(jié)果表明，與對照組相比，茶籽多糖、博落回生物堿及二者聯(lián)用均可使黃羽肉雞的血清ALP活性極顯著下降，血清LDH活性顯著下降；與抗生素組相比，茶籽多糖、博落回生物堿及二者聯(lián)用均可使28日齡時的血清ALP活性極顯著下降。這表明茶籽多糖和博落回生物堿可能具有保護(hù)腸黏膜，降低其受損程度的作用。血清UN含量與動物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝情況及飼糧氨基酸的平衡狀況有關(guān)，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)代謝異常時，血清UN含量升高；蛋白質(zhì)代謝良好時，血清UN含量降低[19]。本試驗結(jié)果顯示，與對照組相比，茶籽多糖、博落回生物堿及二者聯(lián)用均能顯著降低28日齡黃羽肉雞的血清UN含量。這說明茶籽多糖和博落回生物堿并未對肝腎的正常功能造成影響，蛋白質(zhì)的利用率有所改善。血清UN含量降低說明蛋白質(zhì)代謝終產(chǎn)物的排泄正常，體內(nèi)無有毒物質(zhì)聚積，給黃羽肉雞飼喂茶籽多糖和博落回生物堿不僅不會損害腎臟，反而有保護(hù)腎臟、增強(qiáng)腎臟排泄功能的作用；此外，血清UN含量降低說明蛋白質(zhì)的分解代謝降低，蛋白質(zhì)在體內(nèi)的沉積增加。

3.3 博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞胴體性狀和脂質(zhì)過氧化的影響

本試驗結(jié)果表明，飼糧中添加博落回生物堿可顯著提高黃羽肉雞的胸肌率和腿肌率；多糖組的胸肌率和腿肌率高于對照組，胸肌率顯著高于抗生素組。MDA是體內(nèi)自由基攻擊生物膜上的多不飽和脂肪酸，從而引發(fā)脂質(zhì)過氧化所產(chǎn)生的一類較穩(wěn)定的脂質(zhì)過氧化物。組織中的MDA含量是反映脂質(zhì)過氧化程度的重要指標(biāo)，是體內(nèi)脂質(zhì)反應(yīng)的最終產(chǎn)物，肉品中的MDA含量直接反映肉品脂質(zhì)過氧化的程度[20]，直接關(guān)系到肉品的貨架壽命。本試驗結(jié)果顯示，肌肉于4 ℃保存2、4、6 d后，抗生素組、多糖組、博落回組和多糖+博落回組的肌肉MDA含量極顯著低于對照組。這與Lee等[21]研究結(jié)果相一致，飼糧中添加20和50 mg/kg血根堿能顯著降低肉雞的腿肌MDA含量。云龍試驗亦顯示，飼糧中添加血根堿能降低28日齡黃羽肉雞的血清MDA含量；血根堿添加水平小于150 mg/kg時，56日齡肉雞的血清MDA含量顯著低于對照組和抗生素組。多糖類物質(zhì)具有清除自由基和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能作用。薛凌峰等[22]在飼糧中添加150～450 mg/kg香菇多糖，發(fā)現(xiàn)能夠顯著提高仔豬的血漿超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性，降低血漿MDA含量。李學(xué)軍等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加600 mg/kg茶籽多糖能提高生長豬的血清SOD活性，降低血清MDA含量。這說明添加茶籽多糖和博落回生物堿均可延長雞肉的貨架存放時間，作用效果與抗生素相似。

4 結(jié) 論

飼糧中添加博落回生物堿和茶籽多糖對黃羽肉雞的生長性能和血清生化指標(biāo)均有改善作用，其中，博落回生物堿的作用效果優(yōu)于茶籽多糖，且二者均能延長雞肉在4 ℃時的保存時間；這說明博落回生物堿和茶籽多糖均能替代抗生素在肉雞中的使用，且二者聯(lián)用與單獨(dú)添加效果相當(dāng)。