飼料n-3高不飽和脂肪酸水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)以及肌肉和肝臟脂肪酸組成的影響

黃欽成 史 俊 董曉慧* 譚北平 遲淑艷 楊奇慧 章 雙 劉泓宇 楊原志

(1.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料實(shí)驗(yàn)室，湛江 524088；2.農(nóng)業(yè)部華南水產(chǎn)與畜禽飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湛江 524000)

軍曹魚(yú)(Rachycentroncanadum)隸屬鱸形目(Perciformes),軍曹魚(yú)科(Rachycentridae),軍曹魚(yú)屬(Rachycentron)，俗稱(chēng)海竺魚(yú)、海龍、海鱺、竹五、海甘草，廣泛分布于除東太平洋外的熱帶及亞熱帶地區(qū)[1-2]。軍曹魚(yú)屬于暖水性魚(yú)類(lèi)，主要以網(wǎng)箱養(yǎng)殖為主，一年可生長(zhǎng)至6～8 kg，具有巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前，有關(guān)軍曹魚(yú)對(duì)飼料中蛋白質(zhì)、脂肪、維生素[5-7]、礦物元素[8-10]及碳水化合物[11]需要量等營(yíng)養(yǎng)參數(shù)的研究已有報(bào)道，但大多只涉及幼魚(yú)階段，而魚(yú)類(lèi)在不同生長(zhǎng)階段對(duì)營(yíng)養(yǎng)素的需求量不同[12-14]。研究魚(yú)類(lèi)不同生長(zhǎng)階段對(duì)營(yíng)養(yǎng)素的需要量有助于設(shè)計(jì)更加精準(zhǔn)高效的配合飼料，節(jié)約飼料成本，更好更快地促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展。

通常將具有2個(gè)或2個(gè)以上雙鍵的脂肪酸稱(chēng)為多不飽和脂肪酸(PUFA)[15]，碳鏈長(zhǎng)度為18～22。多不飽和脂肪酸中第1個(gè)不飽和鍵出現(xiàn)在碳鏈甲基端的第3位的脂肪酸稱(chēng)為n-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)。雙鍵為3個(gè)或3個(gè)以上，碳鏈長(zhǎng)度為20以上的n-3多不飽和脂肪酸又稱(chēng)為n-3高不飽和脂肪酸(n-3HUFA)，主要包括二十碳五烯酸(EPA，C20∶5n-3)和二十二碳六烯酸(DHA，C22∶6n-3)。大量研究結(jié)果證明，n-3HUFA在維持細(xì)胞膜的流動(dòng)性、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、增強(qiáng)免疫、提升抗氧化能力、減輕炎癥反應(yīng)以及脂肪代謝等方面發(fā)揮著重要的作用[16]-19]。而海水魚(yú)類(lèi)將較短鏈及較低不飽和程度的脂肪酸轉(zhuǎn)化為n-3HUFA的能力有限[16]，飼料中必須適量補(bǔ)充n-3HUFA魚(yú)類(lèi)才能正常生長(zhǎng)。關(guān)于n-3HUFA需要量的研究在牙鲆(Paralichthysolivaceus)[20-21]、黑鯛(Sparusmacrocephalus)[22]、斜帶石斑魚(yú)(Epinepheluscoioides)[23]及歐洲鱸(Dicentrarchuslabrax)[24]上已有報(bào)道。雖然有關(guān)軍曹魚(yú)對(duì)n-3HUFA的需要量也有研究[25]，但是只涉及到幼魚(yú)[(8.3±0.5) g]，尚未有較大規(guī)格軍曹魚(yú)對(duì)n-3HUFA需要量的報(bào)道。本文通過(guò)研究飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)生長(zhǎng)性能、體成分、血清生化指標(biāo)及肌肉和肝臟脂肪酸組成的影響，確定較大規(guī)格軍曹魚(yú)飼料中對(duì)n-3HUFA的適宜水平，為軍曹魚(yú)精準(zhǔn)飼料的研制提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以白魚(yú)粉、酪蛋白和去皮豆粕為主要蛋白質(zhì)源，面粉為糖源，魚(yú)油和玉米油為主要脂肪源，調(diào)節(jié)飼料中玉米油和魚(yú)油的添加量，配制n-3HUFA水平分別為0.49%、0.73%、0.98%、1.41%、1.51%、2.06%及2.83%(實(shí)測(cè)值)的7種試驗(yàn)飼料(表1)。飼料原料粉碎后過(guò)60目篩，根據(jù)飼料配方稱(chēng)取各原料，微量組分采用逐級(jí)擴(kuò)大法混合均勻后，加魚(yú)油、玉米油和大豆磷脂油攪拌均勻，再用V型立式混合機(jī)混合5 min，然后加30%～40%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的水，用F-26型雙螺桿擠壓機(jī)(華南理工大學(xué)，廣州)制成粒徑為3.0 mm的顆粒飼料，在避光通風(fēng)處風(fēng)干至飼料水分含量為10%左右，封口袋封裝，-20 ℃冰箱冷凍保藏。試驗(yàn)飼料脂肪酸組成及含量見(jiàn)表2。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items飼料n-3高不飽和脂肪酸水平 Dietary n-3HUFA level/%0.490.730.981.411.512.062.83氯化膽堿 Choline chloride0.500.500.500.500.500.500.50維生素預(yù)混料 Vitamin premix1)0.300.300.300.300.300.300.30礦物元素預(yù)混料 Mineral premix2)0.700.700.700.700.700.700.70誘食劑 Attractant0.100.100.100.100.100.100.10乙氧基喹啉 Ethoxyquin0.030.030.030.030.030.030.03磷酸二氫鈣 Ca(H2PO4)21.001.001.001.001.001.001.00羧甲基纖維素 Carboxymethylcellulose3.003.003.003.003.003.003.00合計(jì) Total100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient levels3)粗蛋白質(zhì) Crude protein42.5242.6642.7042.7742.5742.3142.17粗脂肪 Crude lipid11.4911.3911.4711.9211.3811.5511.88粗灰分 Ash9.218.818.638.598.579.159.47

1)每千克維生素預(yù)混料含有Contained the following per kg of vitamin premix：VA 10.00 g，VD350.00 g，VE 99.00 g，VK 5.00 g，VB125.50 g，VB225.00 g，VB650.00 g，VB120.10 g，泛酸鈣 calcium pantothenate 61.00 g，煙酸 nicotinic acid 101.00 g，生物素 biotin 25.00 g，肌醇 inositol 153.06 g，葉酸 folic acid 6.25 g，纖維素 cellulose 389.09 g。2)每千克礦物質(zhì)預(yù)混料含有Contained the following per kg of mineral premix：KIO40.03 g，CoCl2·6H2O 4.07 g，CuSO4·5H2O 19.84 g，F(xiàn)eC6H5O713.71 g，ZnSO4·7H2O 28.28 g，MgSO4·7H2O 0.12 g，CaH2PO480.00 g，MgSO4·H2O 12.43 g，KCl 15.33 g，Na2SeO32.00 g，沸石粉 zeolite power 824.19 g。3)實(shí)測(cè)值 Measured values。

表2 試驗(yàn)飼料脂肪酸組成及含量(占總脂肪酸的百分比)

續(xù)表2脂肪酸Fatty acids飼料n-3高不飽和脂肪酸水平 Dietary n-3HUFA level/%0.490.730.981.411.512.062.83∑n-3PUFA4.576.639.0912.4413.7718.5626.75∑n-3HUFA4.246.438.5811.8113.2717.8626.05DHA/EPA1.491.822.492.723.183.254.92

SFA：飽和脂肪酸 saturated fatty acids；MUFA：?jiǎn)尾伙柡椭舅?monounsaturated fatty acids；PUFA：多不飽和脂肪酸 polyunsaturated fatty acids；n-3PUFA：n-3多不飽和脂肪酸 n-3 unsaturated fatty acids；EPA：二十碳五烯酸 eicosapentaenoic acid；DHA：二十二碳六烯酸 docosahexaenoic acid；n-3HUFA：n-3高不飽和脂肪酸 n-3 high unsaturated fatty acid。表6和表7同The same as Table 6 and Table 7。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

軍曹魚(yú)購(gòu)自海南省三亞市，為同一批人工培育苗。養(yǎng)殖試驗(yàn)在廣東省湛江市近海浮式網(wǎng)箱中進(jìn)行。正式試驗(yàn)前，軍曹魚(yú)在網(wǎng)箱(4.5 m×4.5 m×3.0 m)中暫養(yǎng)，投喂打碎后的冰鮮雜魚(yú)3周，然后投喂商業(yè)飼料(廣東粵佳飼料有限公司，粗蛋白質(zhì)含量為42%)馴食2周至試驗(yàn)所需規(guī)格，飽食投喂，使之逐漸適應(yīng)人工配合飼料。軍曹魚(yú)禁食24 h后分組，挑選體格健壯及規(guī)格均一(初重約為70 g)的軍曹魚(yú)隨機(jī)分為7組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾，以重復(fù)為單位放養(yǎng)于網(wǎng)箱(1.4 m×1.9 m×2.5 m)中，每網(wǎng)箱放養(yǎng)的軍曹魚(yú)30尾。養(yǎng)殖期為8周。每天投喂2次(09:00和17:00)，飽食投喂。養(yǎng)殖期間水溫29.0～32.5 ℃，鹽度26～29，pH 7.5～7.8，氨氮濃度低于0.28 mg/L，溶解氧濃度為6～7 mg/L。

1.3 樣本采集及測(cè)定

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，將軍曹魚(yú)饑餓24 h后用丁香酚麻醉，每個(gè)網(wǎng)箱逐一稱(chēng)重和計(jì)數(shù)，用于計(jì)算生長(zhǎng)指標(biāo)。從每個(gè)網(wǎng)箱中挑出5尾軍曹魚(yú)，封口袋凍存待測(cè)體成分。再?gòu)拿總€(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)選取5尾魚(yú)，用2 mL注射器從心臟采血，采集的血樣放入不含抗凝劑的離心管中，血樣在室溫下靜置至少4 h，然后離心(5 000×g，10 min，4 ℃)，收集血清保存于-80 ℃冰箱，待測(cè)血清生化指標(biāo)。采血后的軍曹魚(yú)然后解剖，取肝臟和少量背肌，迅速放入液氮中，再轉(zhuǎn)入-80 ℃冰箱，用于脂肪酸組成和含量分析。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

飼料和全魚(yú)樣品水分含量測(cè)定采用105 ℃ 烘干恒重法，粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定采用凱氏定氮法(KjeltecTM8400，瑞典)，粗脂肪含量測(cè)定采用索氏抽提法(乙醚為抽提劑)；粗灰分含量測(cè)定采用馬福爐550 ℃ 灼燒法。

血清總蛋白(TP)、低密度脂蛋白(HDL)、高密度脂蛋白(LDL)含量及堿性磷酸酶(ALP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性使用全自動(dòng)生化分析儀(日立7600-110)測(cè)定。

脂肪酸組成及含量使用Varian 430-GC氣相色譜儀(安捷倫)測(cè)定。色譜分析條件：色譜柱，HP-88(60 m×0.25 mm×0.2 μm)；氫離子火焰檢測(cè)器(FID)溫度為260 ℃，進(jìn)樣口溫度為260 ℃，分流比為30∶1；柱溫程序升溫，初始溫度140 ℃，反應(yīng)5 min，以5 ℃/min的速率升至240 ℃，反應(yīng)20 min；柱流量2 mL/min，線(xiàn)速度59.6 cm/min；載氣為高純度氮?dú)?25 mL/min)；燃?xì)鉃楦呒兌葰錃?30 mL/min)。以單種和混合標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯進(jìn)行定性分析，脂肪酸組成用面積歸一法計(jì)算。

1.5 計(jì)算公式

成活率(SR)=100×Nt/N0；增重率(WGR)=100×(Wt-W0)/W0；特定生長(zhǎng)率(SGR)=100×(lnWt-lnW0)/t；肥滿(mǎn)度(CF)=100×Wt/L3；飼料系數(shù)(FCR)=Id/(Wt-W0)。

式中：Wt為終末體重(FBW)(g)；W0為初始體重(IBW)(g)；t為試驗(yàn)天數(shù)(d)；N0為初始尾數(shù)；Nt為終末尾數(shù)；Id為攝食飼料總干重(g)；L為體長(zhǎng)(cm)。

1.6 統(tǒng)計(jì)方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差(mean±SE)表示，采用SPSS 17.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，當(dāng)差異顯著(P<0.05)時(shí)，采用Duncan氏法進(jìn)行組間多重比較檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

由表3可知，0.73%～1.41%組的WGR和SGR顯著高于除1.51%組外的其他各組(P<0.05)，0.49%、2.06%及2.83%組的WGR和SGR無(wú)顯著差異(P>0.05)。2.83%組的SR顯著低于其他各組(P<0.05)，其他各組間SR無(wú)顯著差異(P>0.05)。CF和FCR均不受飼料n-3HUFA水平的顯著影響(P>0.05)，但在數(shù)值上以1.41%組最小。以SGR為判據(jù)，經(jīng)折線(xiàn)模型[圖1，線(xiàn)性方程分別為y=0.575x+1.797 8(R2=0.800 3)和y=-0.171 8x+2.505 3 (R2=0.859 8)]模擬得出，飼料n-3HUFA水平為0.95%時(shí)SGR最大。

表3 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。Values with different letter superscripts in the same line differ significantly (P<0.05). The same as below.

圖1 較大規(guī)格軍曹魚(yú)特定生長(zhǎng)率與飼料n-3高不飽和脂肪酸水平的關(guān)系

2.2 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)體成分的影響

由表4可知，魚(yú)體粗蛋白質(zhì)、水分和粗灰分含量均不受飼料n-3HUFA水平的顯著影響(P>0.05)。魚(yú)體粗脂肪含量隨飼料n-3HUFA水平的升高呈先上升后下降的趨勢(shì)，2.83%組顯著低于除2.06%組外的其他各組(P<0.05)，0.98%和1.41%組顯著高于2.06%組(P<0.05)，0.49%～1.51%組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.3 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，2.06%組血清ALT活性顯著低于0.49%組(P<0.05)，但與其他各組無(wú)顯著差異(P>0.05)。血清TG含量隨飼料n-3HUFA水平的升高呈波動(dòng)下降，0.49%組顯著高于其他各組(P<0.05)；0.73%組顯著低于0.49%組(P<0.05)，并顯著高于其他各組(P<0.05)；1.51%～2.83%組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)，但顯著低于除0.98%組外的其他各組(P<0.05)。血清CHOL含量隨飼料n-3HUFA水平的升高呈先升高后下降趨勢(shì)，以0.73%組最高，顯著高于0.49%、2.06%和2.83%組(P<0.05)。血清HDL和LDL含量隨飼料n-3HUFA水平的升高均呈先上升后下降趨勢(shì)。其中，0.98%組血清HDL含量顯著高于其他各組(P<0.05)，1.41%組血清HDL含量顯著低于0.98%、2.83%組(P<0.05)，與其他各組差異不顯著(P>0.05)；0.49%和0.73%組血清LDL含量顯著低于其他各組(P<0.05)，1.51%和2.06%組血清LDL含量無(wú)顯著差異(P>0.05)，但顯著高于其他各組(P<0.05)，2.83%組血清LDL含量較2.06%組顯著下降(P<0.05)。

表4 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)體成分的影響

表5 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

2.4 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)肌肉和肝臟脂肪酸組成的影響

由表6可知，0.73%～2.83%組軍曹魚(yú)肌肉C14∶0和C18∶0含量相比0.49%組差異不顯著(P>0.05)，2.83%組C14∶0和C18∶0含量均最高，且其C14∶0含量顯著高于1.41%和1.51%組(P<0.05)，C18∶0含量顯著高于0.73%和0.98%組(P<0.05)。軍曹魚(yú)肌肉C21∶0含量以2.83%組最高，顯著高于其他各組(P<0.05)。各組肌肉飽和脂肪酸總量(∑SFA)和C16∶0含量均沒(méi)有顯著差異(P>0.05)，飽和脂肪酸中C16∶0在含量上最高。在肌肉單不飽和脂肪酸中，各組均以C18∶1n-9含量最高，單不飽和脂肪酸總量(∑MUFA)與此變化趨勢(shì)一致，均隨n-3HUFA水平的升高而下降。2.06%～2.83%組肌肉C16∶1n-9和C18∶1n-7含量與0.49%組相比有所增加，但差異不顯著(P>0.05)。1.51%～2.83%組肌肉n-6多不飽和脂肪酸總量(∑n-6PUFA)顯著高于其他各組(P<0.05)。隨n-3HUFA水平的升高，肌肉C18∶2n-6含量呈降低的趨勢(shì)，C20∶4n-6含量呈先升高后降低的趨勢(shì)。各組n-3多不飽和脂肪酸中C20∶5n-3(EPA)和C22∶6n-3(DHA)含量均呈上升的趨勢(shì)，除EPA含量在0.49%和0.73%組之間差異不顯著(P>0.05)外，其他各組間均差異顯著(P<0.05)。相比0.49%組，各組DHA/EPA值顯著上升(P<0.05)。

表6 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)肌肉脂肪酸組成的影響

由表7可知，各組肝臟飽和脂肪酸總量、C16∶0、C21∶0含量變化趨勢(shì)與肌肉中的變化趨勢(shì)一致，C14∶0顯著上升且2.83%水平下最大(P<0.05)。肝臟C18∶0含量較為平穩(wěn)，但2.06%組顯著低于0.49%組(P<0.05)。肝臟C16∶1n-9含量以2.06%組最高，顯著高于0.49%和0.73%組(P<0.05)。肝臟C18∶1n-7含量隨n-3HUFA水平的升高呈顯著上升(P<0.05)。肝臟C18∶1n-9含量和∑MUFA隨n-3HUFA水平的升高均呈下降的趨勢(shì)。和肌肉中變化趨勢(shì)一致，肝臟∑n-6PUFA也表現(xiàn)為1.51%～2.83%組顯著高于其他各組(P<0.05)。隨n-3HUFA水平的升高，肝臟C20∶4n-6含量呈顯著上升(P<0.05)，C18∶2n-6含量則持續(xù)下降。肝臟∑n-3PUFA和DHA/EPA值的變化趨勢(shì)與肌肉中一致。與2.06%組相比，肝臟DHA/EPA值在2.83%組顯著下降(P<0.05)。

從表中數(shù)據(jù)看，無(wú)論是肌肉還是肝臟，C16∶0、C18∶1n-9和C18∶2n-6的含量均最高，其次是C18∶0、DHA和EPA等，和飼料中各脂肪酸組成情況基本一致。各組肌肉中∑n-6PUFA、∑n-3PUFA及n-3HUFA總量(∑n-3HUFA)均高于肝臟中，但∑MUFA均低于肝臟中。除2.83%組外，其他各組肌肉中DHA/EPA值高于肝臟中。

表7 飼料n-3HUFA水平對(duì)較大規(guī)格軍曹魚(yú)肝臟脂肪酸組成的影響

續(xù)表7脂肪酸Fatty acids飼料n-3高不飽和脂肪酸水平 Dietary n-3HUFA level/%0.490.730.981.411.512.062.83C22∶6n-3(DHA)1.48±0.12a4.21±0.14b9.26±0.50c14.30±0.13d20.96±0.68e26.03±0.24f28.67±0.48g∑n-3PUFA2.82±0.20a7.25±0.29b14.20±0.52c21.14±0.25d30.08±0.82e36.80±0.38f41.25±0.33g∑n-3HUFA2.18±0.19a6.45±0.25b13.27±0.52c20.11±0.27d28.91±0.80e35.55±0.41f39.85±0.38gDHA/EPA1.50±0.05a2.68±0.09b3.31±0.18c3.60±0.06cd3.84±0.12de4.02±0.04e3.78±0.13cd

3 討 論

本試驗(yàn)中，0.73%～1.51%組相比0.49%組均顯著提升了WGR和SGR，以SGR為判據(jù)，較大規(guī)格軍曹魚(yú)(70 g)對(duì)n-3HUFA的需要量為0.95%。有關(guān)n-3HUFA需要量的研究已有大量報(bào)道，如歐洲鱸[24](14 g)為0.7%、斜帶石斑魚(yú)[23](50 g)為1.27%～1.42%、黑鯛[22][(8].08±0.09) g]為0.87%、金頭鯛(Sparusaurata)[19][(1]1.5±0.2) g]為1%、牙鲆[21][(8].50±0.06) g]為0.8%～1.0%，由此可見(jiàn)，不同養(yǎng)殖品種n-3HUFA需要量不同。本試驗(yàn)得出的較大規(guī)格軍曹魚(yú)(70 g)對(duì)n-3HUFA的需要量(0.95%)低于軍曹魚(yú)幼魚(yú)[25][(8].3±0.5) g]對(duì)n-3HUFA的需要量(1.49%)，證明相同品種養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)在不同生長(zhǎng)階段n-3HUFA需要量也不同。馮曉宇等[26]在對(duì)丁魚(yú)(TincatincaL.)的研究中發(fā)現(xiàn)，成魚(yú)和親魚(yú)肌肉中DHA和EPA含量顯著高于幼魚(yú)肌肉，不同生長(zhǎng)階段丁魚(yú)肌肉中脂肪酸含量及組成有明顯差異，這可能間接說(shuō)明不同生長(zhǎng)階段丁魚(yú)脂肪酸的需要量也不同。凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)成蝦(8.50 g)對(duì)n-3HUFA的需要量(0.51%)低于幼蝦(0.50 g)(0.89%)和中蝦(4.25 g)(0.90%)[27]。這些都說(shuō)明不同生長(zhǎng)階段水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)n-3HUFA需要量不同。相比軍曹魚(yú)幼魚(yú)，較大規(guī)格軍曹魚(yú)對(duì)n-3HUFA需要量變低，這可能說(shuō)明機(jī)體合成n-3HUFA能力變強(qiáng)，其具體原因還有待研究。在歐洲鱸上的試驗(yàn)顯示，相比適宜水平(0.7%)，飼料中低水平的n-3HUFA(0.2%)使生長(zhǎng)性能顯著降低，高水平(1.9%以上)時(shí)生長(zhǎng)性能不再提升，飼料效率無(wú)顯著變化[24]。據(jù)報(bào)道，n-3HUFA水平為1.75%時(shí)能顯著提高黑棘鯛(Acanthopagrusschlegelii)的WGR、SGR及飼料效率，n-3HUFA水平為0.87%～2.53%時(shí)WGR和SGR并沒(méi)有隨n-3HUFA水平的上升而提高，n-3HUFA水平為2.53%時(shí)SR最低[16]；n-3HUFA水平為0.4%～1.6%時(shí)顯著提升牙鲆幼魚(yú)的體增重和飼料效率，而在n-3HUFA水平為2.4%時(shí)上述指標(biāo)顯著降低[21]；飼料n-3HUFA水平最低(0.7%)時(shí)，黃帶鲹(Longirostrisdelicatissimus)表現(xiàn)出較高的死亡率和較差的食欲[28]。這些結(jié)果說(shuō)明n-3HUFA為魚(yú)類(lèi)生存和生長(zhǎng)所必需，且適宜水平的n-3HUFA可促進(jìn)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)發(fā)育，而過(guò)低或過(guò)高則均不利于魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)，且不利于飼料利用。本試驗(yàn)中高水平n-3HUFA的2.83%組和低水平n-3HUFA的0.49%組均表現(xiàn)出較低的WGR和SGR，而WGR和SGR在0.73%～1.51%組間無(wú)顯著差異，且均顯著高于2.83%%和0.49%組，同時(shí)2.83%組SR顯著低于其他各組，1.41%組FCR均低于其他各組，這些結(jié)果與上述結(jié)論基本一致。較大規(guī)格軍曹魚(yú)的CF不受飼料n-3HUFA水平的顯著影響，這與在石斑魚(yú)[23]和黑鯛幼魚(yú)[22]上的研究結(jié)果一致。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，魚(yú)體粗蛋白質(zhì)、水分、粗灰分含量均不受飼料n-3HUFA水平的顯著影響，但對(duì)魚(yú)體粗脂肪含量有顯著影響，魚(yú)體粗脂肪含量隨飼料n-3HUFA水平的升高呈先上升后下降的趨勢(shì)。研究顯示，歐洲黑鱸魚(yú)體水分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量不受飼料n-3HUFA水平的顯著影響[24]；黑棘鯛魚(yú)體粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分含量均未受飼料n-3HUFA水平的顯著影響[16]，與之類(lèi)似的結(jié)果在石斑魚(yú)[23]及軍曹魚(yú)幼魚(yú)[25]上均有報(bào)道。這些結(jié)果與本試驗(yàn)中大規(guī)格軍曹魚(yú)魚(yú)體粗脂肪含量變化的結(jié)果不一致。另有研究顯著，黑鯛幼魚(yú)肌肉組織中粗脂肪含量隨飼料n-3HUFA的水平的升高顯著下降[22]，n-3HUFA水平為6.2%時(shí)顯著降低牙鲆受精卵總脂肪含量[20]；飼料n-3HUFA水平對(duì)花鱸(Lateolabraxjaponicus)肌肉粗脂肪含量無(wú)顯著影響，但顯著降低了魚(yú)體粗脂肪含量[29]，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。然而，EPA和DHA可大幅提升牙鲆幼魚(yú)肌肉總脂肪含量[30]，三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)幼蟹粗脂肪含量隨n-3HUFA水平升高先上升后下降但均高于最低添加水平組[31]，高水平(24.51 g/kg)n-3HUFA顯著提升了花鱸肝臟粗脂肪含量[29]。因此，飼料n-3HUFA水平對(duì)脂肪代謝有調(diào)節(jié)作用，但脂肪含量可能因養(yǎng)殖品種或組織器官不同而呈現(xiàn)不同的結(jié)果。

血清指標(biāo)廣泛用于評(píng)價(jià)魚(yú)類(lèi)的健康、營(yíng)養(yǎng)及代謝狀況。ALT是反映肝臟功能的重要指標(biāo)，正常情況下，血清中ALT的活性保持在較低水平，當(dāng)肝臟或腎臟等組織發(fā)生受損或病變時(shí)，通常伴隨血清ALT活性的升高。本試驗(yàn)中，血清ALT活性在0.49%組最大，在其他各組均較低，這可能說(shuō)明n-3HUFA有利于改善肝臟的健康狀況。研究表明，過(guò)高或過(guò)低水平的n-3HUFA可能對(duì)大黃魚(yú)(Larmichthyscrocea)肝臟、心臟機(jī)能產(chǎn)生負(fù)面影響，并使血清ALT活性升高[32]。適宜水平的n-3HUFA降低了凡納濱對(duì)蝦中蝦及成蝦血清ALT活性[27]。血清TG、CHOL、HDLC和LDLC含量是衡量血脂水平的重要指標(biāo)，TG含量的升降通常伴隨著CHOL含量的升降，二者是評(píng)價(jià)脂肪沉積的重要因素。HDLC的作用是將血液或組織多余的CHOL運(yùn)回至肝臟分解，LDLC的作用則是將肝臟CHOL運(yùn)至全身組織細(xì)胞。本試驗(yàn)中血清TG、CHOL含量在0.73%～2.83%組整體呈下降趨勢(shì)，這與高露姣等[33]在施氏鱘(Acipenserschrenckii)上的研究結(jié)果一致。血清CHOL含量通常與多價(jià)不飽和脂肪酸攝取量呈負(fù)相關(guān)[34]，凡納濱對(duì)蝦血清CHOL含量也隨飼料n-3HUFA水平的升高呈現(xiàn)整體下降趨勢(shì)[27]。而血清CHOL含量在0.73%組顯著高于0.49%組，這可能是由于0.49%組只單獨(dú)添加了玉米油而沒(méi)有添加魚(yú)油(含較多膽固醇)[35-36]，因此出現(xiàn)突然上升。雖然Jin等[16]報(bào)道黑棘鯛血清固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1(SREBP-1，主要調(diào)控脂肪酸、脂質(zhì)及膽固醇合成)的表達(dá)量隨n-3HUFA水平的上升而下調(diào)，但是黑棘鯛血清CHOL含量卻呈上升趨勢(shì)，推測(cè)n-3HUFA可能會(huì)增加血清CHOL含量。褐菖鲉(Sebastiscusmarmoratus)血清CHOL含量也隨n-3HUFA水平的上升而上升[18]。有關(guān)n-3HUFA對(duì)CHOL的調(diào)節(jié)作用仍需進(jìn)一步研究。血清HDL含量在0.98%組顯著提升并達(dá)到最大，之后下降但與0.49%組無(wú)顯著差異，0.49%～0.73%組血清LDL含量顯著低于其他組，這說(shuō)明一定水平的n-3HUFA可提升血清HDL和LDL含量，這與在褐菖鲉[18]上得出的結(jié)果一致。飼料n-3HUFA水平的升高可能促進(jìn)了魚(yú)體對(duì)飼料脂肪的消化吸收，使飼料中脂肪的利用率逐漸提高，魚(yú)體代謝能力逐漸增強(qiáng)，因此血清HDL和LDL含量增加[18]。然而，不同生長(zhǎng)階段凡納濱對(duì)蝦血清LDL含量隨飼料n-3HUFA水平的升高顯著降低[27]，其原因可能是不同養(yǎng)殖動(dòng)物代謝情況不同。

本試驗(yàn)通過(guò)增加魚(yú)油減少玉米油的添加量來(lái)控制大規(guī)格軍曹魚(yú)飼料n-3HUFA的水平，這與劉興旺等[25]等通過(guò)增加魚(yú)油減少牛油的添加量來(lái)控制軍曹魚(yú)幼魚(yú)飼料中n-3HUFA水平的方法相似。大規(guī)格軍曹魚(yú)各組織中C16∶0、C18∶0、C18∶1n-9、C18∶2n-6、DHA和EPA含量較多，這與在歐洲鱸[24]、花尾胡椒鯛[37](Plectorhynchuscinctus)、斜帶石斑魚(yú)[23]及軍曹魚(yú)幼魚(yú)[25]上得出的結(jié)果一致，說(shuō)明這些脂肪酸在組織中有著重要的生物學(xué)作用。本試驗(yàn)中，肌肉和肝臟C18∶1n-9含量、∑n-3PUFA和∑n-3HUFA均隨著飼料n-3HUFA水平的升高而升高，說(shuō)明大規(guī)格軍曹魚(yú)對(duì)飼料中n-3HUFA有著良好的吸收能力；肌肉和肝臟∑SFA沒(méi)有顯著變化，主要是受比例較大的C16∶0和C18∶0的影響，各組C16∶0、C18∶0含量在肌肉和肝臟組織中雖有差異但波動(dòng)不大，這與在軍曹魚(yú)[25]、花尾胡椒鯛[37]、黃帶鲹[28]上得出的結(jié)果一致。C16∶0、C18∶0等飽和脂肪酸以及單不飽和脂肪酸作為魚(yú)體的主要能量來(lái)源，同時(shí)也參與細(xì)胞膜磷脂的合成，由于機(jī)體自身可以合成，在肌肉中含量較為穩(wěn)定[23-25]。然而，隨飼料n-3HUFA水平的升高，黑棘鯛肌肉C16∶0、C18∶0含量及∑SFA均呈下降的趨勢(shì)[16]。三疣梭子蟹肌肉和肝胰腺∑SFA隨飼料n-3HUFA水平的升高而顯著提高[31]。這可能與不同養(yǎng)殖品種以及養(yǎng)殖動(dòng)物的脂肪酸代謝情況不同有關(guān)。本試驗(yàn)中∑MUFA主要受C18∶1n-9(所占比例最大)的影響，在肌肉和肝臟中兩者均隨飼料n-3HUFA水平的升高而下降。Rodriguez等[38]報(bào)道C18∶1n-9和C16∶0可能是金頭鯛幼魚(yú)期的最大能量來(lái)源物質(zhì)，因此C18∶1n-9可能被軍曹魚(yú)作為能量物質(zhì)消耗。黃顙魚(yú)(Pelteobagrusfulvidraco)仔魚(yú)饑餓期間對(duì)體內(nèi)脂肪酸的利用順序?yàn)镸UFA>n-6PUFA>n-3PUFA和SFA[39]，而本試驗(yàn)中∑n-6PUFA和∑n-3PUFA隨飼料n-3HUFA水平的升高均有上升的趨勢(shì)(n-3PUFA趨勢(shì)更明顯)，∑MUFA顯著下降，∑SFA變化不顯著，可能說(shuō)明MUFA(主要是C18∶1n-9)在軍曹魚(yú)中優(yōu)先于SFA及n-3PUFA被機(jī)體利用，而DHA和EPA則優(yōu)先被儲(chǔ)存。n-6PUFA中比重較大的C18∶2n-6被機(jī)體利用而下降，和∑n-6PUFA上升的趨勢(shì)相反，其機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，肌肉和肝臟DHA和EPA含量隨飼料n-3HUFA水平的升高顯著上升，DHA/EPA值隨飼料n-3HUFA水平的升高先升高后降低，2.83%組肝臟DHA/EPA值顯著低于2.06%組，在肌肉中雖也下降但并不顯著，這可能說(shuō)明大規(guī)格軍曹魚(yú)肌肉比肝臟有更強(qiáng)的積累DHA的能力，這與劉興旺等[25]的結(jié)論一致。然而，不同魚(yú)類(lèi)對(duì)DHA和EPA的利用或積累情況可能不同，如Jin等[16]報(bào)道，飼料n-3HUFA水平為0.87%～2.53%時(shí)黑棘鯛肌肉和肝臟DHA/EPA值顯著低于n-3HUFA水平為0.23%時(shí)。本試驗(yàn)中，大規(guī)格軍曹魚(yú)肌肉DHA/EPA值在1.41%～2.83%組間保持穩(wěn)定，這說(shuō)明大規(guī)格軍曹魚(yú)肌肉中可能存在脂肪酸調(diào)控機(jī)制。各組肌肉中∑SFA、∑n-6PUFA、∑n-3PUFA及∑n-3HUFA基本高于肝臟中，但∑MUFA均低于在肝臟中，DHA和EPA也優(yōu)先保存在肌肉中，這與甲殼動(dòng)物三疣梭子蟹中的研究結(jié)果不太一致，在三疣梭子蟹中，C16∶0、C18∶0、C18∶1n-9、C18∶2n-6、SFA等供能脂肪酸主要集中在肝胰腺中，而DHA、EPA等必需脂肪酸則被優(yōu)先保存于肌肉中[31]。飼料中適宜水平的n-3HUFA促進(jìn)了大規(guī)格軍曹魚(yú)的生長(zhǎng)，原因可能是：1)適宜水平的n-3HUFA調(diào)節(jié)了機(jī)體脂肪的代謝，減少了脂肪沉積，有利于組織器官的健康；2)適宜水平的n-3HUFA促進(jìn)了組織對(duì)MUFA及PUFA的積累與利用。

4 結(jié) 論

飼料中適宜水平的n-3HUFA可促進(jìn)較大規(guī)格軍曹魚(yú)的生長(zhǎng)，降低體脂沉積，促進(jìn)脂肪代謝以及促進(jìn)組織器官對(duì)脂肪酸的利用和積累。以SGR為判據(jù)，較大規(guī)格軍曹魚(yú)飼料中n-3HUFA的適宜水平為0.95%。