持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞生長性能、器官指數(shù)、血清生化指標(biāo)和抗氧化功能的影響

鐘 光 邵 丹 胡 艷 施壽榮 宋志剛 童海兵*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所，揚(yáng)州 225125；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，泰安 271018；3.農(nóng)業(yè)部飼料和飼料添加劑有效性試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，揚(yáng)州 225125)

高溫環(huán)境是影響動(dòng)物生產(chǎn)、繁殖的重要因素之一，會(huì)造成細(xì)胞和組織損傷，使器官發(fā)育受阻，機(jī)體抗氧化功能降低，而血液指標(biāo)會(huì)隨著組織細(xì)胞機(jī)能和新陳代謝而變化，研究中常用血清生化指標(biāo)反映機(jī)體營養(yǎng)代謝情況。近年來許多學(xué)者報(bào)道了熱應(yīng)激對(duì)血糖、血脂和載脂蛋白等生理生化指標(biāo)的影響[1]。因此著眼于熱應(yīng)激對(duì)血液指標(biāo)的影響，是探索熱應(yīng)激對(duì)機(jī)體損傷機(jī)理的基礎(chǔ)[2]。國內(nèi)外對(duì)熱應(yīng)激進(jìn)行了大量的研究。Sun等[3]研究表明，熱應(yīng)激會(huì)使血液指標(biāo)發(fā)生改變，影響機(jī)體脂肪代謝，劉梅等[4]試驗(yàn)也表明，急性熱應(yīng)激能提高肉仔雞血清中甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量，激活脂肪酸合成相關(guān)酶，造成脂肪沉積。黃毅[5]研究表明，熱應(yīng)激能夠降低肝臟中過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性，破壞機(jī)體的氧化還原平衡。Jin等[6]和Zhang等[7]研究則表明，熱應(yīng)激能降低機(jī)體的抗氧化功能，而隨著熱應(yīng)激時(shí)間的延長，機(jī)體會(huì)逐步建立新的氧化還原平衡。我國黃羽肉雞主要以農(nóng)戶地面散養(yǎng)為主，環(huán)境控制差，夏季極易產(chǎn)生熱應(yīng)激，而當(dāng)前研究主要以白羽肉雞、羅斯308等商品肉雞為主，對(duì)黃羽肉雞熱應(yīng)激的研究較少。因此，本試驗(yàn)旨在研究持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞生長性能、器官指數(shù)、血清生化指標(biāo)和抗氧化功能的影響，為尋找緩解規(guī)?；S羽肉雞養(yǎng)殖過程中熱應(yīng)激損傷的方法提供思路。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

隨機(jī)選取體重相近、體況健康的35日齡中速型“優(yōu)麻”黃羽肉雞192只，隨機(jī)分為常溫組(normal group)和持續(xù)熱應(yīng)激組(persistent heat stress group)，每組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只雞。2組均飼喂基礎(chǔ)飼糧。常溫組溫度為26 ℃，持續(xù)熱應(yīng)激組給予34 ℃持續(xù)熱應(yīng)激，相對(duì)濕度均為55%左右。試驗(yàn)期14 d。分別在熱應(yīng)激3、7、14 d后采集樣品。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所試驗(yàn)基地開展，采用3層籠養(yǎng)，雞籠規(guī)格為120 cm×80 cm×60 cm(長×寬×高)，按照黃羽肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，并使用北京庫藍(lán)科技有限公司生產(chǎn)的動(dòng)物營養(yǎng)與代謝環(huán)控倉進(jìn)行試驗(yàn)。黃羽肉雞購自揚(yáng)州立華畜禽有限公司，基礎(chǔ)飼糧按照我國《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長性能

試驗(yàn)開始時(shí)統(tǒng)計(jì)每個(gè)重復(fù)的體重，每次喂料時(shí)稱料重，采集樣品前統(tǒng)計(jì)每個(gè)重復(fù)的體重和剩余料重，計(jì)算持續(xù)熱應(yīng)激1～14 d的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.3.2 器官指數(shù)

分別于熱應(yīng)激3、7、14 d后從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取2只雞，稱重后宰殺，打開腹部皮膚，用游標(biāo)卡尺測量腹部脂肪帶寬度，測量兩端和中間3處并取平均值，分離肝臟、脾臟、胸肌和腓腸肌并稱重。計(jì)算器官指數(shù)。

1.3.3 血清生化指標(biāo)

分別于熱應(yīng)激3、7、14 d后從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取2只雞，翅下靜脈采血并置于促凝管中，靜置、離心，分離血清并置于-20 ℃保存。用UniCel DxC 800 Synchron全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)(Beckman Coulter，美國)測定血清中葡萄糖(GLU)、尿酸(UA)、尿素氮(UN)、TG、總膽固醇(T-CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和鈣離子(Ca2+)的含量，試劑盒購自中山標(biāo)佳生物科技有限公司。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)微量元素為每千克飼糧提供 The microelements provided the following per kg of the diet：Mn 12.13 mg，F(xiàn)e 78.18 mg，Cu 9.26 mg，Zn 25.44 mg，Se 0.04 mg。2)維生素為每千克飼糧提供 The vitamins provided the following per kg of the diet：胡蘿卜素 carotene 0.06 mg，VE 13.88 mg，VB12.93 mg，VB21.56 mg，VB31.16 mg，煙酸 nicotinic acid 1.12 mg，VB67.74 mg，生物素 biotin 0.15 mg，葉酸 folic acid 0.32 mg，VB120.15 mg。3)代謝能為計(jì)算值，其余為實(shí)測值。ME was a calculated value, while the others were measured values.

1.3.4 血清抗氧化酶活性

分別于熱應(yīng)激3、7、14 d后從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取2只雞，翅下靜脈采血并置于促凝管中，靜置、離心，分離血清并置于-20 ℃保存。測定血清中CAT、SOD、GSH-Px活性和一氧化氮(NO)含量，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3.5 肝臟抗氧化酶活性

分別于熱應(yīng)激3、7、14 d后從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取2只雞，在肝臟相同部位取少量樣品置于凍存管中，進(jìn)行勻漿和稀釋等前處理，測定肝臟中CAT、SOD、GSH-Px活性和NO含量，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2013進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和簡單處理后，使用SPSS 20.0軟件的t檢驗(yàn)進(jìn)行分析，并進(jìn)行平均值比較，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，并以P<0.05作為顯著差異，以0.05≤P<0.10作為有差異趨勢。

2 結(jié) 果

2.1 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞生長性能的影響

由表3可知，熱應(yīng)激1～14 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的體重、平均日增重和平均日采食量顯著低于常溫組(P<0.05)，料重比顯著高于常溫組(P<0.05)。

表2 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞器官指數(shù)的影響

由表3可知，熱應(yīng)激3 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的脾臟指數(shù)顯著低于常溫組(P<0.05)。

表3 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞器官指數(shù)的影響

2.3 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，熱應(yīng)激3 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的血清中UA、TG和Ca2+含量顯著低于常溫組(P<0.05)。熱應(yīng)激7 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的血清中T-CHO和HDL含量顯著高于常溫組(P<0.05)，血清中TG含量顯著低于常溫組(P<0.05)。熱應(yīng)激14 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的血清中GLU和TG含量顯著高于常溫組(P<0.05)，血清中T-CHO含量有高于常溫組的趨勢(P=0.098)。

表4 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

2.4 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞血清抗氧化功能的影響

由表5可知，熱應(yīng)激3 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的血清中CAT活性有低于常溫組的趨勢(P=0.065)。熱應(yīng)激7 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的血清中CAT、SOD活性和NO含量顯著低于常溫組(P<0.05)。

2.5 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞肝臟抗氧化功能的影響

由表6可知，熱應(yīng)激3 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的肝臟中GSH-Px活性和NO含量顯著低于常溫組(P<0.05)，肝臟中SOD活性有低于常溫組的趨勢(P=0.060)。熱應(yīng)激7 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的肝臟中NO含量顯著高于常溫組(P<0.05)，肝臟中CAT活性有高于常溫組的趨勢(P=0.072)。

3 討 論

3.1 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞生長性能的影響

大量試驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)，充足的采食量是動(dòng)物生存和更好發(fā)揮生產(chǎn)潛力的必要保證。而熱應(yīng)激會(huì)降低采食量，導(dǎo)致機(jī)體的生理機(jī)能會(huì)發(fā)生改變，并隨應(yīng)激強(qiáng)度的加強(qiáng)，機(jī)體代謝發(fā)生紊亂，體重下降甚至出現(xiàn)負(fù)增長，免疫功能降低，甚至?xí)?dǎo)致死亡[8]。Deng等[9]和Lin等[10]研究表明，采食量下降是熱應(yīng)激降低生長性能的根源，并直接導(dǎo)致機(jī)體的體重、飼料利用率、產(chǎn)蛋量和蛋品質(zhì)下降，從而降低機(jī)體的生長性能。Sohail等[11]研究也表明，熱應(yīng)激能夠顯著降低42日齡肉仔雞的體重和

飼料利用效率，給生產(chǎn)帶來不利影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，熱應(yīng)激14 d后，黃羽肉雞的平均日增重、平均日采食量顯著降低，料重比顯著升高，說明持續(xù)熱應(yīng)激降低了黃羽肉雞的采食、生長和飼料利用效率，從而降低了生長性能，這與前人研究結(jié)果一致。

表5 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞血清抗氧化功能的影響

表6 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞肝臟抗氧化功能的影響

3.2 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞器官指數(shù)的影響

器官指數(shù)是機(jī)體系統(tǒng)發(fā)育狀況的重要指標(biāo)[12]，并直接影響機(jī)體的代謝水平。脾臟是禽類重要的免疫器官，咼于明等[13]研究發(fā)現(xiàn)，隨熱應(yīng)激時(shí)間的延長，機(jī)體器官的發(fā)育會(huì)受到阻礙，免疫器官比重尤其是脾臟比重顯著降低。劉思當(dāng)?shù)萚14]也通過試驗(yàn)證明熱應(yīng)激能夠降低肉仔雞的脾臟比重。王超等[15]則研究表明，熱應(yīng)激對(duì)小鼠的器官發(fā)育無顯著影響，并認(rèn)為出現(xiàn)不同的結(jié)果可能與試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)條件有關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，熱應(yīng)激3 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的脾臟指數(shù)顯著低于常溫組，其他時(shí)間和器官均未出現(xiàn)顯著差異，這表明在本試驗(yàn)條件下，持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)機(jī)體的器官發(fā)育無顯著作用，與前人研究結(jié)果不一致，可能是因?yàn)樵囼?yàn)采用的是黃羽肉雞，其抗性相對(duì)較高，對(duì)不良環(huán)境的適應(yīng)能力相對(duì)較強(qiáng)所致。

3.3 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

3.4 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞血清抗氧化功能的影響

熱應(yīng)激條件下，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生過量自由基并通過各類反應(yīng)破壞氧化還原平衡，使機(jī)體的正常秩序及生理代謝發(fā)生紊亂，機(jī)體自由基的清除主要依靠體內(nèi)各類抗氧化酶，包括SOD、CAT和GSH-Px等[20-21]。李葉涵等[22]研究表明，熱應(yīng)激顯著增加了肉雞的過氧化程度，使血清丙二醛(MDA)含量增加，血清GSH-Px活性降低，機(jī)體的抗氧化功能被破壞。也有研究表明，NO是心血管機(jī)能的重要調(diào)節(jié)性物質(zhì)，也是一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)，具有廣泛的生理功能[23]。熱應(yīng)激發(fā)生時(shí)，機(jī)體的NO可引起血管擴(kuò)張，介導(dǎo)和調(diào)節(jié)心肺功能，調(diào)節(jié)體溫[24]。王松波等[25]通過試驗(yàn)證明，熱應(yīng)激會(huì)顯著降低血清GSH-Px的活性，進(jìn)而導(dǎo)致血清MDA含量的增加。應(yīng)激48 h后細(xì)胞中MDA含量增加，SOD活性降低[26]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，熱應(yīng)激3 d，持續(xù)熱應(yīng)激組血清CAT活性有低于常溫組的趨勢，而到熱應(yīng)激7 d時(shí)，血清CAT、SOD活性顯著低于常溫組，說明本試驗(yàn)條件下，持續(xù)熱應(yīng)激能夠降低血清的抗氧化功能，且隨著熱應(yīng)激時(shí)間的延長，血清抗氧化酶的活性持續(xù)降低，說明持續(xù)熱應(yīng)激能隨時(shí)間的延長進(jìn)一步加深對(duì)機(jī)體抗氧化功能的影響，這與前人研究結(jié)果相一致。熱應(yīng)激14 d，血清中抗氧化酶的活性未出現(xiàn)顯著差異，可能是機(jī)體逐步適應(yīng)熱環(huán)境并建立了新的氧化還原平衡，機(jī)體的抗氧化功能逐漸恢復(fù)所致。本試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)在熱應(yīng)激7 d時(shí)，持續(xù)熱應(yīng)激組的血清NO含量顯著低于常溫組，這與前人研究結(jié)果不同，其原因仍需要進(jìn)一步研究。

3.5 持續(xù)熱應(yīng)激對(duì)黃羽肉雞肝臟抗氧化功能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，熱應(yīng)激3 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的肝臟GSH-Px活性顯著低于常溫組；熱應(yīng)激7 d，持續(xù)熱應(yīng)激組的肝臟NO含量顯著高于常溫組；而熱應(yīng)激14 d，肝臟抗氧化酶的活性未出現(xiàn)顯著差異。這表明在本試驗(yàn)條件下，持續(xù)熱應(yīng)激降低了肝臟中的抗氧化酶活性，增加了NO的含量，而隨著時(shí)間延長，機(jī)體可能逐步適應(yīng)熱環(huán)境并建立新的氧化還原平衡，因而各種酶活性的差異性消失。這與王斌等[24]和王松波等[25]的研究結(jié)果相同，而持續(xù)熱應(yīng)激組在熱應(yīng)激3 d，肝臟中NO含量顯著低于常溫組，這與前人研究結(jié)果不同，但與本試驗(yàn)熱應(yīng)激3 d后血清中NO含量的結(jié)果相符合，作者認(rèn)為出現(xiàn)這種現(xiàn)象并非測定誤差造成的，可能與試驗(yàn)動(dòng)物、日齡和其他條件有關(guān)，具體原因仍需要進(jìn)一步試驗(yàn)的驗(yàn)證。

4 結(jié) 論

持續(xù)熱應(yīng)激能降低黃羽肉雞生長性能，影響機(jī)體脂肪代謝，降低機(jī)體的抗氧化功能。