劉桂艷
(武漢華夏理工學(xué)院,湖北武漢 430223)
紅景天為多年生草本植物,主要生長在海拔1600~4000m的高寒、干燥、缺氧、強紫外線照射、晝夜溫差大的地區(qū),具有極強的環(huán)境適應(yīng)能力和生命力。紅景天苷是從紅景天中提取而來,在醫(yī)學(xué)中,紅景天苷具有增強免疫力、消除憂郁感、保護心血管、美白、抗輻射等功效,其與其他藥物相互作用還能夠提高T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和吞噬細(xì)胞活力、抑制腫瘤細(xì)胞的增長[1],因此具有一定的研究價值。
在市場中購買了紅景天,經(jīng)過鑒定后,確定其為紅景天,將其作為實驗的主要材料。為制備溶劑準(zhǔn)備乙醇(分析醇)、純凈水以及氫氧化鈉[2]。
在實驗中,我們選取的實驗設(shè)備為AB135-S天平;6002-8高速粉碎機;高效冷凍離心機以及高效液相色譜儀[5]。
1.2.1 紅景天苷含量測定
為了確保紅景天提取紅景天苷實驗的精確性,通過單因素實驗的方法對影響提取率的因素進行了排除實驗。然后通過公式計算,得到紅景天苷的提取率。
1.2.2 溶液制備
利用6002-8高速粉碎機將紅景天粉碎,磨成實驗可以用的粉末,利用AB135-S天平稱取5g的紅景天粉末,然后進行水浴回流提取,提取剩余殘渣使用乙醇進行清洗[4],然后使用甲醇溶液對其進行溶解,最后通過濾膜,將濾液進行過濾處理,制定出適宜的濾液,準(zhǔn)備在實驗中使用。
1.2.3 響應(yīng)面優(yōu)化工藝
在提取過程中料液比、溫度、時間都會對實驗產(chǎn)生一定的影響,因此,采用了單因素變化實驗方法,實驗設(shè)計見表1。
表1 響應(yīng)面因素
在實驗中,設(shè)置溫度為65℃、提取時間為60min,然后將pH值分別設(shè)置為6.5、7.0、8.0、8.5和9.0,結(jié)果如圖1所示。由圖1可看出,在溫度與提取時間相同時,當(dāng)pH值為8.2時提取率達到了最高,由此可見,在紅景天苷的提取過程中,pH值最佳設(shè)定參數(shù)為8.2。
圖1 pH值對提取率的影響
在研究提取時間對提取率的影響時,將pH值固定為7.5,提取溫度固定為65℃,將提取時間分別設(shè)置為25min、40min、55min、70min和85min,經(jīng)過實驗,我們對比了不同時間段的提取值,時間在40min左右時,提取率出現(xiàn)高峰,隨后我們從40min開始觀察,當(dāng)時間處于45.11min時,提取率最佳,因此得出提取時間為45.11min時,能夠達到3.9%,由此得到了最佳的提取時間為45.11min。
對料液比的比值對提取率影響進行了研究,與上述方法相同,將pH值設(shè)定為7.5,將提取時間設(shè)定為45min,然后將料液比分別設(shè)置為1∶39、1∶33、1∶29、1∶22、1∶19,實驗結(jié)果表明,1∶39時提取率為3.1%;1∶33時提取率為3.7%;1∶29時提取率能夠達到4.4%;1∶22時提取率為4.0%;1∶19時提取率為3.9%。在料液比為1∶29時,提取率能夠達到4.4%,由此可見,料液比的最佳比值為1∶ 29。
通過實驗與對比,最終得到了單因素分析法優(yōu)化紅景天中紅景天苷提取工藝最佳參數(shù),其中乙醇的濃度為61%,料液比的比值為1:32:90。最佳的提取時間為45.11min,最佳提取溫度為63℃,其最佳pH值為8.2。由此可見單因素分析法優(yōu)化紅景天中紅景天苷提取方法具有較高的穩(wěn)定性,提取的過程十分科學(xué),適合在紅景天苷提取過程中使用。通過上述的最佳參數(shù)對紅景天中的紅景天苷進行提取,其提取率能夠達到5.72%,由實驗前根據(jù)相關(guān)實驗進行推測的理論提取率值相比較,兩者能夠吻合,因此響應(yīng)面法在紅景天苷的提取中確實可行。該提取方法不僅能夠?qū)t景天苷的提取提供最佳方法,與此同時也為未來的相關(guān)實驗研究提供的實踐依據(jù)。