改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法在臨床生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值

徐登波

（四川省成都市武侯區(qū)人民醫(yī)院 四川 成都 610041）

目前，臨床生化檢驗(yàn)較為常用的一種方法則為終點(diǎn)法，指將試劑與樣品混合，相應(yīng)反應(yīng)時(shí)間內(nèi)，達(dá)到終點(diǎn)。在呈色反應(yīng)穩(wěn)定階段進(jìn)行檢測(cè)顏色吸光度[1]，進(jìn)而計(jì)算標(biāo)本濃度。終點(diǎn)法包含兩點(diǎn)終點(diǎn)法和一點(diǎn)終點(diǎn)法。按照其原理，本研究納入70例接受臨床生化檢驗(yàn)的患者討論改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法的應(yīng)用價(jià)值。具體報(bào)告如下。

1.資料及方法

1.1 材料

由日本貝克曼庫(kù)爾特自動(dòng)生化分析儀（AU-680型），由北京中生北控生物科技股份有限公司提供試劑盒，單試劑型（氧化酶法），由英國(guó)RANDOX公司提供標(biāo)準(zhǔn)血清；美國(guó)伯樂(lè)公司提供質(zhì)控血清。從我院2017年2月至2018年3月期間收治的住院和門(mén)診患者中收集70份標(biāo)本，要求無(wú)脂濁、無(wú)黃疸、無(wú)溶血，收集后1h內(nèi)實(shí)施檢測(cè)。配置葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液[2.00g/dl(111.0mmol/L）]。

1.2 方法

45份標(biāo)本均采用改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法進(jìn)行檢測(cè)。終點(diǎn)法設(shè)置參數(shù)：測(cè)光點(diǎn)33，波長(zhǎng)510nm，樣品量4ul，試劑量R1300ul，線性范圍0～16mmol/L，反應(yīng)方向?yàn)樯仙?，單點(diǎn)定標(biāo)為1-point；改良法參數(shù)：測(cè)光點(diǎn)33，波長(zhǎng)510nm，樣品量2ul，試劑量R1 150ul，試劑量R2 水150ul，線性范圍0～20mmol/L，反應(yīng)方向?yàn)樯仙?，單點(diǎn)定標(biāo)為1-point。在保證儀器工作狀態(tài)良好且質(zhì)控合格的情況下時(shí)進(jìn)行測(cè)定。

1.3 指標(biāo)判定

線性判定：嚴(yán)格按照NCCLS制定原終點(diǎn)法和改良終點(diǎn)法的線性范圍方案，加入111mmol/L葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液加入血清內(nèi)，配置為5號(hào)高值標(biāo)本和1號(hào)低值標(biāo)本，濃度為29.96mmol/L和3.59mmol/L，均勻混合，高值+低值=標(biāo)本濃度。按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)提出的標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算精密度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件（SPSS13.0版本）分析數(shù)據(jù)，t檢驗(yàn)計(jì)量資料，表示為±s，χ2檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料，表示為%，若P＜0.05，則有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 相關(guān)性

原始法與改良法比較，共測(cè)45份標(biāo)本，回歸方程：y=1.0113x-0.0380，r=0.9991。t檢驗(yàn)：t=1.8951，P=0.213。此兩種方法檢測(cè)結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 精密度

正常濃度下，改良終點(diǎn)法批內(nèi)CV和總CV比原終點(diǎn)法高，異常濃度下，原終點(diǎn)法批內(nèi)CV值和總CV值比改良終點(diǎn)法高，組間數(shù)據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1 比較改良終點(diǎn)和原終點(diǎn)測(cè)定精密度結(jié)果[n，(%)]

2.3 線性結(jié)果

分析線性結(jié)果得知，高濃度狀態(tài)下，改良終點(diǎn)法線性濃度優(yōu)于原終點(diǎn)法，低濃度、中濃度下，改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法線性關(guān)系較為良好。詳見(jiàn)表2。

表2 比較線性結(jié)果（±s）

表2 比較線性結(jié)果（±s）

原終點(diǎn)法 3.55 9.65 15.71 18.47 21.05理論濃度 3.59 10.18 16.77 22.39 29.96改良終點(diǎn)法 3.57 9.47 15.91 22.94 27.52

3.討論

臨床生化檢驗(yàn)中應(yīng)用較為廣泛的一種檢測(cè)方式則為終點(diǎn)法[2]，常用實(shí)驗(yàn)為總蛋白、葡萄糖氧化酶等，一般用手工操作完成終點(diǎn)法。因臨床各項(xiàng)儀器逐步普及，生化檢驗(yàn)智能化和微量化特征日益突出，現(xiàn)各醫(yī)護(hù)人員關(guān)注的熱點(diǎn)和重點(diǎn)也包括臨床生化檢驗(yàn)方式改良，需應(yīng)用先進(jìn)儀器，讓試劑成本盡量減至最低。因廠家試劑、檢測(cè)項(xiàng)目等對(duì)測(cè)定線性和靈敏度有深刻且直接的影響，臨床在檢驗(yàn)中需嚴(yán)格設(shè)定參數(shù)，確保試驗(yàn)結(jié)果線性和精密度更為準(zhǔn)確，指導(dǎo)臨床診治疾病。同時(shí)也有研究指出[3]，生化檢驗(yàn)者，改良終點(diǎn)法精確度高。本研究結(jié)果與之相符，測(cè)定線性范圍廣，檢測(cè)時(shí)降低一半試劑，進(jìn)而節(jié)約了試劑成本。綜上，改良法在臨床生化檢驗(yàn)中，精密度高，線性范圍廣泛，且檢測(cè)中可節(jié)約試劑成本，值得推廣。