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    乙肝小三陽與HBV~DNA的關(guān)系分析

    2018-11-06 10:19陽仕榮
    健康大視野 2018年12期

    陽仕榮

    【 磕康模骸糎TF〗分析乙肝小三陽患者(即HBsAg陽性、HBeAb陽性、HBcAb陽性)與HBV~DNA的關(guān)系。方法:選擇2016年9月-2017年9月我院所接收的300例乙肝小三陽患者和50例健康者的血清進行研究,對其血清進行乙肝五項和HBV~DNA的檢測。采用時間分辨免疫熒光法(TRFIA)檢測乙肝五項,并用聚合酶鏈式反應(yīng)法(PCR)檢測HBV~DNA,分析比較乙肝小三陽患者(HBsAg陽性、HBeAb陽性、HBcAb陽性)與HBV~DNA的關(guān)系。結(jié)果:乙肝小三陽患者(HBsAg陽性、HBeAb陽性、HBcAb陽性)的檢出率是77.1%,HBV~DNA的檢出率是62.6%,其中兩組數(shù)據(jù)進行比較(x2=11.1511,P=0.0008),即其差異有顯著性。結(jié)論:HBeAg 呈陰性情況,可能也有病毒復(fù)制的情況,HBV~DNA和HBsAg陽性、HBeAb陽性、HBcAb陽性之間有著較好的相關(guān)性,對乙肝小三陽患者來講其可以有效的指導(dǎo)乙肝疾病的診斷、診斷及臨床療效,也有助于臨床治療方案的制訂和預(yù)后情況的判斷。

    【關(guān)鍵詞】乙肝小三陽;HBV~DNA;PCR

    【中圖分類號】R373.2

    【文獻標志碼】A

    【文章編號】1005-0019(2018)12-032-01

    乙型病毒性肝炎是由于感染乙型肝炎病毒(HBV)引起的,乙型肝炎患者和HBV攜帶者是本病的主要傳染源。感染HBV后,由于受病毒因素、宿主因素、環(huán)境因素等影響,會出現(xiàn)不同的結(jié)局和臨床類型。臨床上,對乙型肝炎患者的血清標志物有著多種檢測方法,所以急需尋找出一種能夠快速靈敏、又具有特異性的檢測方法。HBV~DNA是否被感染,有無進行復(fù)制,判斷標志就是檢測HBsAg、HBeAb和HBcAb表達情況,三者全部表現(xiàn)陽性也是乙肝小三陽患者臨床診治、療效及預(yù)后情況判定的重要依據(jù)[1]。但因為“窗口期”等問題的存在,通常乙肝病毒即HBV~DNA在機體內(nèi)的含量多少,是醫(yī)護人員用來判定病毒等復(fù)制與活躍度的重要依據(jù),也是是否具有傳染性的直接依據(jù),通過對HBV~DNA的定量檢測,判定患者體內(nèi)乙肝病毒的含量變化。本實驗通過研究300例乙肝小三陽病患的血清標志物與HBV~DNA的關(guān)系,分析了臨床檢測HBV~DNA的意義?,F(xiàn)將結(jié)果報告如下:

    1 材料與方

    1.1 一般資料 選取的300例研究對象是2016年9月至2017年9月期間,前來我院接受治療的乙肝小三陽患者。其中男200例,女100例;年齡5至78歲,平均年齡為35.6±5.9歲;其中慢性肝炎患者有172例,肝硬化患者有127例。另外有50例健康者組成的對照組,其中男29例,女21例;年齡6至76歲,平均年齡為36.9±5.8歲。所有研究對象在清晨時空腹抽取靜脈血5mL,將血清分離出來,保存在在-20℃的環(huán)境中。

    1.2 方法

    (1)血清標志物的檢測

    采用時間分辨免疫熒光法檢測乙肝五項,儀器采用的是由美國珀金埃爾默公司所生產(chǎn)的全自動時間分辨熒光分析儀Easycuta,輔以乙型肝炎病毒前S1(PreS1) 抗原檢測試劑盒及乙型肝炎病毒e抗原檢測試劑盒,用EU標記物的配備專用稀釋劑對生物素抗原或EU標記物復(fù)溶,具體的加水量及檢測步驟,均按儀器說明書上的方法進行。

    (2)HBV~DNA檢測

    采取上??寺∩锔呒夹g(shù)有限公司的乙型肝炎病毒核酸定量檢測試劑盒,用PE5700 PCR熒光檢測儀檢測,輔以熒光探針在體外擴增與檢測。結(jié)果判斷:HBV~DNA值>1×103拷貝/mL為陽性。

    1.3 統(tǒng)計學分析 數(shù)據(jù)資料的分析選擇spss18.0進行,計數(shù)資料用百分比形式表示為[n(%)],數(shù)據(jù)的比較采用x2檢驗,當P<0.05時,表明差異具有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    300例乙肝小三陽患者中HBV~DNA的總檢出率是62.6%(188/300),HBsAg、HBeAb和HBcAb表現(xiàn)陽性(小三陽)的有145例,占比48.3%,陰性有74例,占比24.7%。在HBV~DNA呈陽性的188人中,HBsAg、HBeAb和HBcAb表現(xiàn)陽性的為77.1%(145/188),在HBV~DNA呈陰性的112人中,HBsAg、HBeAb和HBcAb陰性的檢出率為66.1%(74/112),HBsAg、HBeAb和HBcAb與HBV~DNA的檢出率不一致,將兩組數(shù)據(jù)進行比較(x2=11.1511,P=0.0008),即其差異有顯著性。

    3 討論

    乙型肝炎診斷指標最常用的是血清標志物HBV~DNA的檢測數(shù)據(jù),它能夠反映出乙肝病毒在機體內(nèi)免疫反應(yīng)的情況,但不能夠直接將機體內(nèi)HBV~DNA復(fù)制情況反映出來。臨床上HBV~DNA血清標志物具有復(fù)雜性,根據(jù)檢測結(jié)果難以準確判斷HBV~DNA有無感染及其復(fù)制情況。時間分辨免疫熒光法檢測通常需要病原體在1015~1017個之間,才能將陽性檢測出來,但如果在感染后的“窗口期”,通常有假陰性結(jié)果出現(xiàn)。PCR依靠熒光定量的方法,將被感染后的病原體其發(fā)病時間、數(shù)量及病情狀況,兩者之間建立了關(guān)系[2]。

    研究乙肝小三陽血清標志物與HBV~DNA兩者之間的相關(guān)性,對乙型肝炎在臨床上的診斷、治療效果及預(yù)后情況有著極其重要的意義。在本實驗中,通過采取TRFIA和PCR兩種手段,對300例乙肝小三陽患者HBsAg、HBeAb和HBcAb與HBV~DNA表達情況進行檢測。結(jié)果表明,乙肝小三陽患者中HBsAg、HBeAb和HBcAb陽性的檢出率是77.1%,HBV~DNA的檢出率是62.6%。大多認為若HBeAg呈陽性,HBV~DNA其復(fù)制一般呈積極活躍態(tài)。這項實驗的結(jié)果說明,即使HBeAg呈陰性也不能表說明HBV~DNA完全終止其復(fù)制或血清中的病毒消失,該結(jié)論也與以往的研究結(jié)果一致[3]。HBV~DNA的檢出率與HBsAg、HBeAb和HBcAb的檢出率不一樣,其原因可能是HBV~DNA與HBsAg、HBeAb和HBcAb在檢測中,其表達的含義沒有完全一致。在臨床上,以往的觀念認為,抗病毒治療取得療效的依據(jù)就是,慢性乙型肝炎病人HBeAg呈現(xiàn)陰性后,傳染性變?nèi)跚也∏橐驳靡院棉D(zhuǎn)。本實驗中,在HBeAg呈陰性的患者中,利用信號敏感的DNA擴增,血清中大約可以檢測出40%左右的病毒在進行復(fù)制。在HBeAg呈陰性的乙肝小三陽患者面前,HBV~DNA是否存在復(fù)制情況,可作為疾病發(fā)展與預(yù)后情況的重要指標,判斷出抗病毒的效果[4]。

    在本實驗中,HBsAg、HBeAb和HBcAb陽性表達情況和HBV~DNA相關(guān)性極高,表明HBsAg、HBeAb和HBcAb陽性和HBV~DNA其復(fù)制情況是一致的,但其陽性的檢出率是77.1%,HBV~DNA的檢出率是62.6%,二者的檢出率有顯著性差異,這也說明,在臨床的判斷上,乙肝病毒其復(fù)制情況與其在機體內(nèi)的活躍程度,不能僅僅只依靠HBsAg、HBeAb和HBcAb陰陽性情況,正確的方法是對HBV-DNA采用定量檢測的熒光PCR方法[5]。

    血清標志物中HBV~DNA含量的多少是病毒是否繼續(xù)復(fù)制最直接最重要的標志,也是判斷感染程度的有效方法,熒光PCR方法可以在DNA程度上,識別在體內(nèi)的潛伏情況與活躍情況,故此可認定為HBV~DNA有否感染的診斷標準。血清學標志物在此基礎(chǔ)上,對于乙肝小三陽患者,通過熒光PCR方法對HBV~DNA動態(tài)觀測其數(shù)量,可以有效的指導(dǎo)乙肝疾病的診斷、診斷及臨床療效,也有助于臨床治療方案的制訂和預(yù)后情況的判斷。

    參考文獻

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