黑果腺肋花楸對小鼠肝腎抗氧化性的初步研究

李美蘭，黃金珠，李紅梅，姜成哲

（延邊大學農(nóng)學院，吉林 延吉 133002）

黑果腺肋花楸 （Aronia melanocarpa）屬薔薇科，腺肋花楸屬灌木，是無公害果樹作物［1］，高可達 3 m，花白色，果實為漿果、黑紫色、無核、直徑10～12 mm，于每年7月底至8月中旬成熟。黑果腺肋花楸屬粗放型管理樹種，具有一些獨特的生物學特性，如耐寒、耐旱、耐澇，對病蟲害、土質、氣候都有較強的適應性，適合在平原、荒山大量種植，且對其進行適當?shù)墓芾?，可以實現(xiàn)無農(nóng)藥種植。此外，黑果腺肋花楸樹高在2 m左右，因此，栽培管理及采摘作業(yè)可以節(jié)省很多的人力、物力。研究表明，黑果腺肋花楸中含有豐富的花青素、黃酮、多酚類等有效的抗氧化元素［2］，能夠通過血腦屏障，直接保護大腦和神經(jīng)系統(tǒng)，具有抗氧化、抗炎、降血糖、防治心血管疾病、抗腫瘤等多種藥理作用，是一種非常有價值的有待于開發(fā)的抗氧化產(chǎn)品的原料，受到國內(nèi)外醫(yī)藥和食品界的廣泛重視［3-5］。

肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的腺體和最重要的代謝和生物轉化器官，具有很強的新陳代謝能力，并能產(chǎn)生大量的自由基。腎臟也是機體的重要器官，具有生成尿液、清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物的功能。肝腎細胞內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)主要由抗氧化酶以及一些非酶抗氧化劑組成，其中，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶是機體的主要抗氧化酶，可以維持機體的自由基平衡［6-8］。該試驗利用比色法測定肝腎組織中的超氧化物歧化酶 （SOD）活性、丙二醛（MDA）的含量及谷胱甘肽（GSH）的相對含量，研究黑果腺肋花楸的抗氧化性，旨在為開發(fā)黑果腺肋花楸功能提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

昆明小鼠16只，由延邊大學農(nóng)學院提供；黑果腺肋花楸果購自吉林延吉，將黑果腺肋花楸果實利用噴霧干燥法制作成黑果腺肋花楸果粉，并用蒸餾水溶解后配制成3%的黑果腺肋花楸溶液。

表1 小鼠的平均周增重 g

表2 黑果腺肋花楸溶液對小鼠各器官臟器系數(shù)的影響 %

1.2 試驗試劑

濃硫酸、TBA（硫代巴比妥酸）、冰醋酸、磷酸緩沖液、SDS（十二烷基磺酸鈉）、考馬斯亮藍、聯(lián)苯三酚等，均為國產(chǎn)分析純。

1.3 試驗儀器

分光光度計（型號：722S，上海精密科學儀器有限公司）；電子天平（型號：FA1004A，上海精天電子儀器有限公司）；電熱恒溫水槽 （型號：DK-8D，上海精宏實驗設備有限公司）；臺式高速冷凍離心機（型號：CT15RT，中國天美科學儀器有限公司）；超純水系統(tǒng)（美國MILLIPORE公司）。

1.4 試驗方法

1.4.1實驗動物與試驗設計：取16只平均日齡在（197±18）d的小鼠，按體重隨機分成 2組，包括 1個對照組和1個試驗組，每組有雌鼠4只、雄鼠4只，其中，對照組給予蒸餾水，試驗組給予濃度為3%的黑果腺肋花楸溶液，連續(xù)8周。試驗過程中，所有小鼠均自由采食、采光，每天觀察飲水、進食量、外觀、體征以及行為活動，每周對試驗小鼠進行稱重。試驗結束后，剖檢取臟器稱重（-20℃保存），肉眼觀察動物臟器變化，計算臟器系數(shù)。

1.4.2SOD活性、MDA含量及GSH相對含量測定：分別取試驗小鼠肝臟和腎臟100 mg，加入1 mL生理鹽水勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清液，待測。其中，采用鄰苯三酚自氧化法測定SOD活性；硫代巴比妥酸法測定MDA活性；四氧嘧啶法測定GSH相對含量，其測定波長分別為342、592、532、305 nm。

2 結果與分析

2.1 剖檢結果

在試驗期間各組動物飲食及活動均正常，未發(fā)現(xiàn)小鼠死亡的現(xiàn)象。剖檢后，肉眼觀察對照組和試驗組的主要臟器變化，未見明顯的變化。

2.2 平均周增重測定結果

小鼠的平均周增重結果見表1。由表1可知，對照組及試驗組的小鼠之間差異不顯著。

2.3 小鼠各臟器系數(shù)測定結果

各臟器的臟器系數(shù)結果見表2。由表2可知，對照組與試驗組之間差異不顯著，雌鼠與雄鼠間差異也不顯著。

2.4 SOD活性、MDA含量及GSH相對含量測定結果

腎臟和肝臟組織中的SOD活性、MDA含量及GSH相對含量結果見圖1和圖2。由圖1可知，試驗組腎臟組織中MDA含量明顯低于對照組，腎臟組織中GSH相對含量高于對照組，肝臟組織中MDA含量及GSH相對含量無顯著差異。由圖2可知，試驗組肝臟的SOD活性高于對照組SOD活性，但差異不顯著。綜上表明，黑果腺肋花楸有一定增強機體抗氧化的能力。

3 討論

抗氧化酶是生物抗氧化系統(tǒng)的重要組成部分，通過酶反應直接去除多余的有害分子氧。其中，SOD活性的高低能間接地反映機體消除自由基能力的強弱。細胞膜富含不飽和脂肪酸，最易受到氧自由基的攻擊而發(fā)生脂質過氧化反應，其分解產(chǎn)物之一是MDA，因此，MDA的含量也能直接反映細胞膜被氧化的程度。

圖1 肝臟和腎臟組織中MDA含量及GSH相對含量

圖2 肝臟和腎臟組織中的SOD活性

該試驗研究顯示，各組間小鼠體重變化、臟器系數(shù)無顯著差異，表明黑果腺肋花楸對小鼠體重、臟器功能均無影響。與對照組相比，腎臟組織中MDA含量降低，GSH相對含量增大，說明黑果腺肋花楸能夠加快消除自由基的含量，從而抑制腎臟內(nèi)過氧化脂質的二級分解產(chǎn)物MDA的含量，使抗氧化酶能力增強，提高了抗氧化能力［9-10］。

4 結論

用3%的黑果腺肋花楸溶液飼喂小鼠8周，能夠提高小鼠肝腎的抗氧化能力。