• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    紫外線照射實驗動物的皮膚光老化模型研究進(jìn)展

    2018-10-31 10:52:46王詩萌李甜楊田野
    中國美容醫(yī)學(xué) 2018年7期
    關(guān)鍵詞:抗衰老動物模型

    王詩萌 李甜 楊田野

    [摘要]皮膚像人類其他器官一樣,隨時間而衰老。但又不同于其他器官,影響皮膚衰老的一項重要的環(huán)境因素是紫外線輻射。隨著大氣臭氧空洞的增加、環(huán)境光污染的加重及人們生活水平的提高,大家越來越注重皮膚因光損傷導(dǎo)致的紅斑、皺紋、色沉、彈性減弱等問題。對光老化皮膚的治療方法則更是目前的研究熱點,但因自然光老化是一個十分漫長的過程,所以有關(guān)光老化的實驗大多建立在光老化實驗動物模型的基礎(chǔ)上。因此,建立一個可靠的更接近于人類皮膚自然光老化的模型具有重要意義。本文就當(dāng)前光老化的發(fā)生機制、光老化模型造模方法、檢測標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展歸納總結(jié)如下。

    [關(guān)鍵詞]皮膚衰老;光老化;抗衰老;動物模型;紫外線輻射

    [中圖分類號]R339.3+8 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A [文章編號]1008-6455(2018)07-0146-05

    Abstract:Skin,like other human organs, skin anginghappens with time. But different from other organs, an important environmental factor affecting skin aging is ultraviolet radiation . With the increase of ozone hole in the atmosphere, the aggravation of environmental light pollution and the improvement of people's living standard, people pay more and more attention to the changes of skin caused by photo damage and photoaging, such as erythema, wrinkles, pigmentation and elasticity decline. Therefore, the research on the mechanism and treatment of photoaging has become a hot topic. However, natural photoaging is a long process, so most of the experiments of photoaging is a step after the establishment of the experimental animal model of photoaging. Therefore, it is important to establish a reliable model closer to the natural photoaging of human skin. This review mainly summarizedthe mechanism of photoaging, the modeling methods of photoaging, and the progress of detection standard.

    key words: skin aging; photoaging; anti-aging; animal model; UV radiation

    皮膚是人體最大的器官,并作為人體的第一道防線,保護(hù)著人體免受外界理化因素及微生物的侵襲。但與此同時,它也是最容易受外界環(huán)境影響的器官,其中紫外線、寒冷、風(fēng)吹及化學(xué)暴露均可導(dǎo)致皮膚受損及老化,而紫外線是誘發(fā)人類皮膚光老化所有因素中最重要的一個[1-2]。光老化的外觀特點是皮膚粗糙,皺紋加深并伴有色素沉著,病理特點是表皮角化不良伴異常增生,真皮變薄、膠原減少、彈性纖維降解等[3]。而紫外線在誘導(dǎo)光老化的同時,也可以引起多種皮膚病變,甚至是皮膚惡性腫瘤。所以光老化在當(dāng)代已經(jīng)以一種疾病及綜合征的姿態(tài)而成為研究熱點[4-5]?,F(xiàn)今對于抗光老化的治療研究中,由于存在倫理限制及不便因素,研究者們常常先建立起實驗動物光老化模型后,再進(jìn)行下一步治療研究。但由于光老化發(fā)生機制復(fù)雜、臨床表現(xiàn)多樣,如何建立起更具有代表性及更貼近于人類光老化皮膚的模型,尚缺乏一定評價標(biāo)準(zhǔn)。本文通過對光老化的發(fā)生機制、目前國內(nèi)外常用的光老化實驗動物及照射光源的選擇進(jìn)行一定歸納,并最后總結(jié)出評價光老化的研究指標(biāo),以期為進(jìn)行實驗的研究者提供參考。

    1 光老化的發(fā)生機制

    太陽發(fā)射多種色譜光源,波長各不相同并相互作用,包括紫外線(ultraviolet, UV)、可見光和紅外線(Infrared Radiation,IR)。光老化的發(fā)生機制不僅復(fù)雜又相互作用,其主要機制及學(xué)說有:細(xì)胞基質(zhì)異常降解、自由基及線粒體突變學(xué)說、免疫抑制及炎癥浸潤等[6]。從分子機制講,UV輻射可以使大量的活性氧自由基(ROS)得到累積,一方面ROS可以使端??s短,另一方面又可以損傷核DNA,同時又可活化細(xì)胞表面受體,誘導(dǎo)核轉(zhuǎn)錄復(fù)合物活性蛋白(activator,protein,AP-1)活化,而AP-1的主要作用就是抑制膠原蛋白合成、促進(jìn)膠原蛋白分解,同時又參與免疫調(diào)節(jié),促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)的轉(zhuǎn)錄(MMP是一種膠原酶,可促進(jìn)膠原降解);而AP-1不僅會阻止轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)轉(zhuǎn)錄及還會降低TGF-β受體水平,從而抑制膠原合成[7-8]。

    自然光中的紫外線按照不同的波段,又分為UVA(ultraviolet, UVA)、UVB(ultraviolet, UVB)、UVC(ultraviolet, UVC)。由于UVC在穿過地球時會被臭氧吸收,所以紫外線所引起的皮膚光老化基本可以看作是UVA及UVB的作用。簡單地說,UVA通過激活絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK) 信號傳導(dǎo)通路,促進(jìn) MMPs表達(dá)生成,抑制膠原的合成[9-10]。而UVB則通過抑制機體免疫系統(tǒng),促進(jìn)MMPs表達(dá)生成,抑制膠原的合成[2,11]。日光中紅外線和熱量可以誘導(dǎo)皮膚新生血管的生成[12]。CHO[13]曾經(jīng)通過研究證實,IR和熱能夠誘導(dǎo)皮膚新生血管和炎癥性細(xì)胞浸潤,再通過MMPs破壞真皮的細(xì)胞外基質(zhì),改變皮膚的結(jié)構(gòu)蛋白,從而加速皮膚的光衰老表現(xiàn)。

    2 光老化的分型

    光老化的臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣且程度不同,進(jìn)行光老化的分型研究有助于我們在光老化的模型研究中進(jìn)行分類描述?,F(xiàn)今仍然沿用的是Glogau分型,它是通過對患者的不同臨床表現(xiàn)程度及情況進(jìn)行光老化分型[10],見表1。

    3 光老化與自然老化的區(qū)別

    自然情況下,隨著人類年齡的增長及外出活動的影響,在光老化和自然老化同時相疊加的作用,形成了人類老年時的皮膚臨床表現(xiàn)。然而,自然老化與光老化,因其機制不同,而形成不同的區(qū)別表現(xiàn)。了解這些區(qū)別有助于我們建立更貼近于人類皮膚衰老的模型。劉瑋等[14]曾經(jīng)根據(jù)年齡、原因、影響因素、范圍、臨床及組織學(xué)特征、并發(fā)腫瘤等方面對皮膚光老化和皮膚自然老化進(jìn)行區(qū)別,見表2。

    4 光老化模型實驗動物的選擇

    在模型動物選擇方面,可以選擇嚙齒類的實驗鼠和及小型豬。但因為小型豬具有難飼養(yǎng),價格高以及難以操作等缺點,所以國內(nèi)外大多學(xué)者選用更易于操作和飼養(yǎng)的實驗鼠作為光老化模型動物。20世紀(jì)80年代,國外研究者使用Skh-1(hr/hr)無毛小鼠,成功地模擬出了光老化的皮膚[15],并且認(rèn)為該小鼠的皮膚組織學(xué)改變十分貼近人類皮膚光老化改變[16]。SKH-1無毛小鼠由Charles Rive從斯坦福大學(xué)引進(jìn),它因具有穩(wěn)定無毛基因,是國外常用的皮膚病、皮膚腫瘤及皮膚光老化損傷的動物模型,但因價格昂貴限制了其在國內(nèi)的應(yīng)用。2015年,Jeong[17]首次使用裸鼠(nu/nu)作為光老化模型實驗動物,并發(fā)現(xiàn)因為裸鼠的修復(fù)能力較強,所以其最小紅斑計量(MED)比無毛老鼠更大,需要更頻繁的照射。裸鼠因同樣具有無毛特征、無胸腺缺乏細(xì)胞免疫,因而更適合進(jìn)行光老化模型后的人細(xì)胞治療實驗,而成為研究學(xué)者探討后續(xù)干細(xì)胞治療的熱門動物。但因裸鼠的飼養(yǎng)及環(huán)境需要較高的清潔等級,限制了其國內(nèi)應(yīng)用。由于各種因素,國內(nèi)學(xué)者常常選擇使用人工脫毛后的SD大鼠作為光老化模型動物[4-5,18]。然而在自然狀態(tài)下,SD大鼠因喜夜間活動所以并不會受到紫外線的照射而產(chǎn)生光老化皮膚改變,同時反復(fù)多次人工脫毛會給皮膚帶來一定的刺激,影響實驗結(jié)果,所以SD大鼠并不適合作光老化模型動物[19]。

    5 造模的紫外線光源選擇

    從上述光老化的發(fā)生機制中可以看出,UVA及UVB是引起光老化發(fā)生的主要影響因素。UVA是指波長315~400nm的紫外線,穿透能力較強,可穿透表皮至皮膚基底層和真皮層,是皮膚變黑的主要元兇;UVB是指波長280~320nm的紫外線,易被表皮所吸收,主要引起皮膚紅斑、皮膚皺紋粗糙加深[2]。根據(jù)不同的實驗需求及實驗室環(huán)境,研究人員選擇的輻照光源往往不同。由于老鼠的皮膚常常較人皮膚薄,所以有許多學(xué)者選擇用穿透能力不是那么強的UVB作為光源。但在自然日光中UVA的劑量是UVB的500~1 000倍,所以也有許多學(xué)者選擇用UVA+UVB光源同時照射來模仿自然狀態(tài)下的光照[4,20]。

    6 造模過程中的注意事項

    6.1 紫外線的危害:紫外線照射具有殺菌作用,可以影響和調(diào)節(jié)人體呼吸、循環(huán)及免疫系統(tǒng)等,但過量的紫外線照射,會危害人體健康,甚至?xí)痣姽庑匝垩准鞍變?nèi)障[21]。Podskochy等[22]采用波長310nm的紫外線照射兔眼角膜76h后,兔眼的角膜出現(xiàn)細(xì)胞損傷、水腫、混濁的改變。所以在造模的過程中,實驗員及實驗動物都應(yīng)該進(jìn)行一定的保護(hù)措施,以避免紫外線給實驗動物帶來除光老化的其他副損傷,而影響實驗結(jié)果。

    6.2 最小紅斑劑量的確定:最小紅斑量(Minimal erythema dose, MED)是指在一定光源或特定波段光線照射下所引起的照射部位在24h后仍可察覺紅斑的最小照射劑量[23],通常由兩名以上有豐富經(jīng)驗的觀察者所判定。基本在所有文獻(xiàn)中,研究員均以MED為起始照射劑量,并以周為單位逐漸遞增照射劑量。然而在不同的文章中,即使是同一種實驗動物,其最MED、照射頻率卻不盡相同。雖然MED的定義明確,但實際MED的值卻較難判斷,給實驗帶來了一定的困難。所以在進(jìn)行實驗之前,一定要進(jìn)行預(yù)實驗判斷MED,摸索照射劑量,才能最大地減小影響實驗結(jié)果的因素。

    7 檢測標(biāo)準(zhǔn)的選擇

    光老化模型是一個影響因素多、耗時長、檢測指標(biāo)復(fù)雜的模型。雖然光老化的實驗?zāi)P脱芯繑?shù)量較多,但對于光老化模型成功的檢測方法常常見仁見智。筆者通過閱讀大量文獻(xiàn),歸納出光老化的評價指標(biāo)大多集中在大體肉眼觀察、三維掃描或皺褶復(fù)制品分析法、病理切片及特殊染色的鏡下觀察、免疫組化定量分析。具體檢查指標(biāo),見表3。

    從表3可以看出,I型膠原蛋白的檢測至關(guān)重要,這從光老化的發(fā)生機制可推斷出,老化的外觀改變主要是由于皮膚膠原的成分及性狀改變。人類皮膚中的膠原主要由I型和Ⅲ型膠原組成,I型膠原占85%,既可以維持皮膚飽滿充盈又可以承受拉力;而Ⅲ型膠原是幼稚膠原,膠原纖維較細(xì);日光的照射影響了Ⅰ型膠原的合成,改變了Ⅰ型和Ⅲ型膠原比例,從而導(dǎo)致了皮膚松弛、彈性降低、皺紋加深的臨床表現(xiàn)[25]。所以,在驗證光老化模型是否成功時,應(yīng)有一定的對于皮膚膠原檢測的實驗結(jié)果。但值得注意的是,影響皮膚膠原蛋白含量的因素不僅只有紫外線。因此,僅有膠原含量的檢測并不能代表光老化模型成功,還應(yīng)該結(jié)合光老化發(fā)生機制對組織中進(jìn)行AP-1、MMP、SOD,甚至是細(xì)胞中ROS的檢測。

    8 小結(jié)與展望

    綜上所述,光老化模型實驗影響因素較多、成本較高、耗時較長。選擇不同的實驗動物、MED、照射頻率、紫外線光源等均可較大地影響到光老化模型的檢測指標(biāo)。筆者通過閱讀國內(nèi)外文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)裸鼠因其具有以下優(yōu)勢,成為學(xué)者們常用的光老化實驗動物:①裸體無毛,免除了脫毛給皮膚帶來刺激和損傷,減少了實驗影響因素;②光老化裸鼠的皮膚與人皮膚老化改變相似[19]。但是裸鼠本身皮膚松弛,幼年裸鼠皮膚便有大量褶皺,這對模擬人類正常老化中的皺紋具有一定影響,加之其表皮十分菲薄,較低的照射劑量即可造成皮膚損傷,出現(xiàn)表皮破損、出血,如此反復(fù)還會生成瘢痕。而一旦形成瘢痕,則會因瘢痕存在的大量膠原組織而影響最終膠原的檢測,從而導(dǎo)致實驗失敗。所以,把握準(zhǔn)確的MED及照射劑量是實驗關(guān)鍵。筆者認(rèn)為MED不僅與動物本身的種類、年齡、皮膚薄厚程度不同而不同,還與實驗室本身的環(huán)境有關(guān)。所以,如果使用裸鼠作光老化動物模型,一定要開展本實驗室的模擬預(yù)實驗,切不可參照其他文獻(xiàn)照射劑量而盲目開始照射。

    光老化造模的時間相對較長,根據(jù)不同動物皮膚厚度不同,照射劑量亦不同。但無疑過長的紫外線照射會致動物眼睛損傷,一旦損傷則會給實驗帶來干擾因素,影響實驗結(jié)果。所以,為了確保照射劑量較準(zhǔn)確,照射部位精準(zhǔn),照射時固定實驗動物是一個不錯的選擇。麻醉雖然操作簡單,但難以控制麻醉劑量,易致死,而且光老化照射次數(shù)多,反復(fù)麻醉不推薦使用。如果可以就不同的實驗動物進(jìn)行頭部及重要部位的遮擋及四肢固定,這樣既可以進(jìn)行自身照射后效果對比,又可以簡易地判斷MED,是較為理想的照射方法。

    未來,隨著人類科技的不斷進(jìn)步,求美者的不斷增多,治療光老化皮膚的方法將多種多樣?,F(xiàn)已有多篇文章證明了脂肪干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、維甲酸、點陣激光等均具有治療皮膚光老化的作用[17,26-28]。鑒于這一特點,未來光老化老模型必定會在對抗衰治療的探索中不斷完善,更加與人類衰老皮膚相似。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1]Fisher GJ,Kang S,VaraniJ,et al.Mechanisms of photoaging and chronological skin aging[J].Arch Dermatol,2002,138(11):1462-1470.

    [2]曾麗,胡晗菲,謝紅炬,等.皮膚光老化的研究進(jìn)展[J].中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志,2015,43(2):226-229.

    [3]ImayamaS,UedaS,Isoda M.Histologic Changes in skin of hairless mice following peeling with salicvic acid[J]. Arch Dermatol,2000, 136(11):1390-1394.

    [4]郭魯義.實用光老化動物模型建立方法的探討[J].中國美容醫(yī)學(xué),2008,17(2):235-237.

    [5]張璃,梁虹.小白鼠皮膚光老化模型的建立[J].廣東醫(yī)學(xué),2005,26(12): 1642-1643.

    [6]Fisher GJ,Kang S,Varani J,et al.Mechanisms of photoaging and chronological skin aging[J].Arch Dermatol,2002,138(11):1462-1470.

    [7]W?sterP,RosdahlI,?llingerK.Cell fate regulated by nuclear factor-κB- and activator protein-1-dependent signalling in human melanocytes exposed to ultraviolet A and ultraviolet B[J].J Br Dermatol,2014,171(6):1336-1346.

    [8]劉媛,李福民,廖金鳳,等.皮膚光老化機制研究進(jìn)展[J].臨床皮膚科雜志,2016,45(6):479-481.

    [9]Xu Q,HouW,ZhengY,et al.Ultraviolet A-induced cathepskin K expression is mediated via MAPK/AP-1 pathway in human dermal fibroblasts [J].PLoS One,2014,9(7):e102732.

    [10]Glogau RG.Physiologic and structural changes associated with agingskin.[J].Dermatol Clin,1997,15(4):555-559.

    [11]Wenk J,Btenneisen P,Meewes C,et al.UV-induced oxidative stress and photosging[J].Curr Probl Dermatol,2001,29:83-94.

    [12]宣敏,程飚.皮膚衰老的分子機制[J].中國老年學(xué)雜志,2015,35(15): 4375-4380.

    [13]Cho,Shin MH,Kim YK,et al.Effects of infrared radition and heat on human skin aging in vivo[J].J Investing Dermatol Symp Proc,2009,14(1):15-19.

    [14]劉瑋.皮膚光老化[J].臨床皮膚科雜志,2003,32(7):424-427.

    [15]Molonely SI.The hairless mouse model of photoaging:evaluation of the relationship between dermal elastin,collagen,skin thickness and wrinkles[J].Photochemi Photobiol,1992,56(4):505-511.

    [16]Svohodva A,Waherova D,Vostalova J.Ultraviolet light induced alteration to the skin[J].Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Oipmoue Czech Repu,2006,150(1):25-38.

    [17]Jeong JH,F(xiàn)an Y,You GY,et al.Improvement of photoaged skin wrinkles with cultured human fibroblasts and adipose-derived stem cells:a comparative study[J].J Plast Reconstr Aesthet Surg,2015,68(3):372-381.

    [18]楊汝斌,萬屏,劉玲,等.SD大鼠光老化模型中氧化性損傷及燈盞花素的保護(hù)作用[J].中國老年學(xué)雜志,2012,32(6):1180-1182.

    [19]石瀟,陳煒.反復(fù)紫外線照射建立皮膚光老化模型[J].中國老年學(xué)雜志,2013,33(20):5046-5048.

    [20]陳旭,王瑩,鞠梅,等.皮膚光老化小鼠模型的構(gòu)建[J].中國麻風(fēng)皮膚病雜志,2014,30(3):131-136.

    [21]孫曉晨,張放,邵華.紫外線對人體健康影響[J].中國職業(yè)醫(yī)學(xué),2016,43(3):380-383.

    [22]Podskochy A,Gan L,F(xiàn)agerholm P.Apoptosis in UV-exposed rabbit corneas [J].Comea,2000,19(1):99-103.

    [23]葉聰秀,萬苗堅,易金玲,等.廣州地區(qū)正常人紫外線最小紅斑量的測定[J].中國美容醫(yī)學(xué),2012,21(15):1994-1996.

    [24]Hee Jung L,Eo Gin L,Sangjin K,et al.Efficacy of microneedling plus human stem cell conditioned medium for skin rejuvenation:a randomized,controlled,blinded split-face study[J].Ann Dermatol,2014,26(5):584-591.

    [25]史春艷,姚春麗.紫外線致皮膚光老化治療過程中Ⅰ型、Ⅲ型膠原的表達(dá)變化[J].中國老年學(xué)雜志,2011,31(10):1831-1832.

    [26]史春艷,王兵,張萍,等.MSCs對紫外線誘導(dǎo)皮膚光老化大鼠模型凋亡的影響[J].中國老年學(xué)雜志,2011,31(22):4413-4414.

    [27]佟佳馨,吳景東.桃紅四物湯大鼠含藥血清對光老化人皮膚模型成纖維細(xì)胞增殖影響與維甲酸等效性隨機平行對照[J]. 實用中醫(yī)內(nèi)科雜志,2015,29(10):154-157.

    [28]許曉鶯.點陣激光治療皮膚老化的療效觀察及護(hù)理[J].中國實用醫(yī)藥,2016,11(30):239-240.

    [收稿日期]2018-05-07 [修回日期]2018-06-22

    編輯/李陽利

    猜你喜歡
    抗衰老動物模型
    肥胖中醫(yī)證候動物模型研究進(jìn)展
    胃癌前病變動物模型復(fù)制實驗進(jìn)展
    學(xué)會4招科學(xué)抗衰老
    潰瘍性結(jié)腸炎動物模型研究進(jìn)展
    地黃貌不起眼補腎增強免疫抗衰老
    侗族養(yǎng)生防病抗衰老經(jīng)驗薈萃
    糖尿病性視網(wǎng)膜病變動物模型研究進(jìn)展
    血管性癡呆動物模型的建立與中醫(yī)藥干預(yù)進(jìn)展
    常搓八部位抗衰老
    玉米多糖的抗衰老作用
    午夜福利在线观看免费完整高清在 | 99精品在免费线老司机午夜| 国产毛片a区久久久久| 国产免费一级a男人的天堂| 精品久久久久久久久亚洲| 成人特级av手机在线观看| 在线观看午夜福利视频| 免费黄网站久久成人精品| 成人永久免费在线观看视频| 日韩av不卡免费在线播放| 国产成人91sexporn| 成人午夜高清在线视频| 如何舔出高潮| 少妇的逼水好多| 久久精品91蜜桃| 亚洲美女视频黄频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产成人aa在线观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲综合色惰| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 色综合亚洲欧美另类图片| 久久6这里有精品| 一级av片app| 欧美日本视频| 日本与韩国留学比较| 亚洲无线在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 波野结衣二区三区在线| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产成人aa在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲熟妇熟女久久| 国产人妻一区二区三区在| 青春草视频在线免费观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 99久久中文字幕三级久久日本| 精品久久久久久久末码| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲av五月六月丁香网| 不卡一级毛片| 国产av在哪里看| 久久久久久久久大av| 日韩强制内射视频| 久久韩国三级中文字幕| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 午夜视频国产福利| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美+日韩+精品| 在线观看免费视频日本深夜| 嫩草影视91久久| 最新中文字幕久久久久| 99在线人妻在线中文字幕| 日韩高清综合在线| 亚洲在线观看片| 免费观看在线日韩| 99在线人妻在线中文字幕| 国产真实乱freesex| 免费一级毛片在线播放高清视频| 在线观看av片永久免费下载| 综合色av麻豆| 久久久国产成人免费| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 日韩成人伦理影院| 国产 一区精品| 深爱激情五月婷婷| 中出人妻视频一区二区| 精品福利观看| 日韩制服骚丝袜av| 久久久色成人| 啦啦啦韩国在线观看视频| 淫妇啪啪啪对白视频| a级毛片免费高清观看在线播放| 免费观看人在逋| 色视频www国产| 成人永久免费在线观看视频| 最新中文字幕久久久久| 插阴视频在线观看视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 一本久久中文字幕| 成人综合一区亚洲| av天堂在线播放| 18禁在线播放成人免费| 91精品国产九色| 亚洲av五月六月丁香网| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 精品少妇黑人巨大在线播放 | 97碰自拍视频| 午夜亚洲福利在线播放| 别揉我奶头 嗯啊视频| 国产高清不卡午夜福利| 国产亚洲91精品色在线| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲,欧美,日韩| www日本黄色视频网| 嫩草影院新地址| 亚洲人成网站在线播| 网址你懂的国产日韩在线| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 俺也久久电影网| 又爽又黄a免费视频| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 久久精品国产亚洲av涩爱 | 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲综合色惰| 精品人妻熟女av久视频| 国产免费男女视频| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 我要搜黄色片| 高清毛片免费看| 亚洲中文字幕日韩| 九九热线精品视视频播放| 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲色图av天堂| 亚洲综合色惰| 热99re8久久精品国产| 日韩成人伦理影院| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 亚洲熟妇熟女久久| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 人妻制服诱惑在线中文字幕| av免费在线看不卡| 久久精品夜色国产| 国内精品一区二区在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲国产色片| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 香蕉av资源在线| 最近在线观看免费完整版| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产一区二区在线观看日韩| 午夜精品在线福利| 波多野结衣巨乳人妻| 一级a爱片免费观看的视频| 欧美成人a在线观看| 国产高清三级在线| 日韩av不卡免费在线播放| 综合色丁香网| 一本精品99久久精品77| 国产乱人视频| 日本a在线网址| 天堂影院成人在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 日本一本二区三区精品| 男人舔奶头视频| 一区二区三区四区激情视频 | 全区人妻精品视频| 少妇的逼好多水| 国产视频内射| .国产精品久久| 欧美精品国产亚洲| 成人二区视频| 永久网站在线| 日韩欧美免费精品| 淫妇啪啪啪对白视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 嫩草影院入口| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品综合久久久久久久免费| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 免费一级毛片在线播放高清视频| 婷婷精品国产亚洲av| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产激情偷乱视频一区二区| 欧美三级亚洲精品| 91麻豆精品激情在线观看国产| 一区二区三区免费毛片| 99热这里只有精品一区| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 91午夜精品亚洲一区二区三区| 欧美bdsm另类| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲欧美精品自产自拍| 免费看a级黄色片| 丰满乱子伦码专区| 国产视频内射| 日本黄色视频三级网站网址| 午夜亚洲福利在线播放| 男女那种视频在线观看| 欧美日韩在线观看h| 性色avwww在线观看| 人人妻人人看人人澡| 黄片wwwwww| 日本欧美国产在线视频| 国产探花极品一区二区| 国产亚洲91精品色在线| 免费黄网站久久成人精品| 久久久久久九九精品二区国产| 日日干狠狠操夜夜爽| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 精品熟女少妇av免费看| 国内精品一区二区在线观看| 91狼人影院| 日韩av不卡免费在线播放| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 欧美精品国产亚洲| 亚洲美女搞黄在线观看 | 国产亚洲精品久久久com| 国产午夜精品论理片| 久久中文看片网| 国产69精品久久久久777片| 中文亚洲av片在线观看爽| or卡值多少钱| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 色在线成人网| 最近手机中文字幕大全| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 三级毛片av免费| 婷婷精品国产亚洲av| 综合色av麻豆| 久久久精品大字幕| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 美女 人体艺术 gogo| 国产精品1区2区在线观看.| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 久久草成人影院| 麻豆久久精品国产亚洲av| 一区二区三区四区激情视频 | 又粗又爽又猛毛片免费看| av卡一久久| 免费av观看视频| 亚洲av.av天堂| 国产日本99.免费观看| av.在线天堂| 超碰av人人做人人爽久久| 国产高清三级在线| 日本 av在线| 国产中年淑女户外野战色| 中文亚洲av片在线观看爽| 天美传媒精品一区二区| 少妇的逼水好多| 99久久中文字幕三级久久日本| 又爽又黄无遮挡网站| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 日韩av在线大香蕉| 国产精品不卡视频一区二区| 哪里可以看免费的av片| av黄色大香蕉| 在线观看一区二区三区| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久精品91蜜桃| 久久6这里有精品| 人人妻人人看人人澡| 久久中文看片网| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久久久久九九精品二区国产| 欧美成人一区二区免费高清观看| 久久久久国产网址| 国产精品精品国产色婷婷| 国产乱人偷精品视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 在线观看免费视频日本深夜| 色播亚洲综合网| 日韩欧美在线乱码| 天堂√8在线中文| 高清毛片免费看| 午夜福利18| 1024手机看黄色片| 欧美区成人在线视频| 一个人免费在线观看电影| 美女被艹到高潮喷水动态| 高清日韩中文字幕在线| 成熟少妇高潮喷水视频| 日本与韩国留学比较| 国产片特级美女逼逼视频| 国产黄片美女视频| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产精品三级大全| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 女人被狂操c到高潮| 老熟妇仑乱视频hdxx| 高清毛片免费观看视频网站| 黄色日韩在线| 久久6这里有精品| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲精品粉嫩美女一区| 久久久精品大字幕| 丰满的人妻完整版| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 日日啪夜夜撸| 成人av在线播放网站| 成人特级黄色片久久久久久久| 丝袜美腿在线中文| 久久久久国产网址| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 露出奶头的视频| 99精品在免费线老司机午夜| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲在线自拍视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 免费黄网站久久成人精品| 久久国产乱子免费精品| 日本黄色片子视频| 日本五十路高清| 乱系列少妇在线播放| 久久精品91蜜桃| 国模一区二区三区四区视频| 日本成人三级电影网站| 六月丁香七月| av天堂中文字幕网| 天天躁日日操中文字幕| 欧美不卡视频在线免费观看| 欧美在线一区亚洲| 成年版毛片免费区| 久久6这里有精品| 伦精品一区二区三区| 欧美性猛交黑人性爽| 青春草视频在线免费观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 直男gayav资源| 五月伊人婷婷丁香| 如何舔出高潮| 成人毛片a级毛片在线播放| 超碰av人人做人人爽久久| 久久久欧美国产精品| 精品国产三级普通话版| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 悠悠久久av| 免费观看的影片在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 69av精品久久久久久| 国产免费男女视频| 一区二区三区四区激情视频 | 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲av不卡在线观看| 美女大奶头视频| 在线看三级毛片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 日本黄大片高清| 禁无遮挡网站| 1000部很黄的大片| 国产美女午夜福利| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 美女 人体艺术 gogo| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产日本99.免费观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 中文字幕av在线有码专区| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 久久久久久久久中文| 九九热线精品视视频播放| 波多野结衣巨乳人妻| 久久久久久国产a免费观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 99久久精品一区二区三区| 国产精品三级大全| 欧美高清成人免费视频www| 久久精品综合一区二区三区| 看片在线看免费视频| 少妇的逼好多水| 国产欧美日韩精品一区二区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 少妇人妻精品综合一区二区 | 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 日韩一本色道免费dvd| а√天堂www在线а√下载| 亚洲三级黄色毛片| 少妇丰满av| 我要搜黄色片| 欧美一级a爱片免费观看看| www日本黄色视频网| 人妻少妇偷人精品九色| 黄色日韩在线| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲成人精品中文字幕电影| 久久国内精品自在自线图片| 黄色配什么色好看| 有码 亚洲区| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 村上凉子中文字幕在线| 老司机影院成人| 国语自产精品视频在线第100页| 日韩强制内射视频| 亚洲美女搞黄在线观看 | 在线a可以看的网站| 少妇丰满av| 午夜精品在线福利| 国产欧美日韩精品一区二区| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产真实乱freesex| 国产毛片a区久久久久| 色综合站精品国产| 又爽又黄a免费视频| 深夜a级毛片| 人妻少妇偷人精品九色| 国产高清不卡午夜福利| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产色婷婷99| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 免费在线观看成人毛片| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 亚洲第一区二区三区不卡| 日日摸夜夜添夜夜爱| 18+在线观看网站| 亚洲自偷自拍三级| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久久久久久久大av| 99热这里只有是精品50| 成年女人永久免费观看视频| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲18禁久久av| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 精品熟女少妇av免费看| 永久网站在线| 日日摸夜夜添夜夜爱| a级一级毛片免费在线观看| 日日撸夜夜添| 欧美另类亚洲清纯唯美| 2021天堂中文幕一二区在线观| 久久久久国内视频| 国产精品99久久久久久久久| 哪里可以看免费的av片| 国产91av在线免费观看| 日本五十路高清| 人妻少妇偷人精品九色| 永久网站在线| 久久午夜福利片| 看免费成人av毛片| 俄罗斯特黄特色一大片| 欧美最黄视频在线播放免费| 丰满乱子伦码专区| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久午夜福利片| 色哟哟哟哟哟哟| 秋霞在线观看毛片| 看非洲黑人一级黄片| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 欧美精品国产亚洲| av在线亚洲专区| av视频在线观看入口| av福利片在线观看| 1024手机看黄色片| 亚洲自拍偷在线| 亚洲久久久久久中文字幕| 97超视频在线观看视频| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产真实乱freesex| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲图色成人| 欧美精品国产亚洲| 久久久久久久久久成人| 亚洲精品久久国产高清桃花| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 一级av片app| 99热网站在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 91久久精品国产一区二区成人| 免费观看在线日韩| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 色吧在线观看| 亚洲在线自拍视频| 黑人高潮一二区| 国产色婷婷99| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲精品一区av在线观看| 精品一区二区免费观看| 69人妻影院| 国产69精品久久久久777片| 搞女人的毛片| 亚洲综合色惰| 国产亚洲精品久久久com| 成人综合一区亚洲| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产私拍福利视频在线观看| 国内精品宾馆在线| 国产伦精品一区二区三区四那| 日韩欧美 国产精品| 91在线精品国自产拍蜜月| av在线老鸭窝| 色在线成人网| 毛片一级片免费看久久久久| 99热这里只有精品一区| 日本成人三级电影网站| 99热只有精品国产| 美女高潮的动态| 国产成人精品久久久久久| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久欧美精品欧美久久欧美| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 欧美日韩在线观看h| 亚洲精品国产av成人精品 | 看非洲黑人一级黄片| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲色图av天堂| 久久久精品欧美日韩精品| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 欧美日韩在线观看h| 久久精品夜色国产| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产综合懂色| 国产精品无大码| 国产亚洲精品久久久com| 国语自产精品视频在线第100页| 哪里可以看免费的av片| 人妻久久中文字幕网| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品女同一区二区软件| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲美女黄片视频| 最近在线观看免费完整版| 精品福利观看| 黄色视频,在线免费观看| 成人一区二区视频在线观看| 丰满的人妻完整版| 久久久国产成人精品二区| 国产爱豆传媒在线观看| 久久久久国内视频| 久久鲁丝午夜福利片| 露出奶头的视频| 久久人妻av系列| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 国产精品野战在线观看| 日韩制服骚丝袜av| 成人鲁丝片一二三区免费| 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美成人a在线观看| 欧美日本视频| 久久久久久国产a免费观看| 国产色爽女视频免费观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 欧美色欧美亚洲另类二区| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99久国产av精品国产电影| 国内精品一区二区在线观看| 天堂动漫精品| 99热这里只有是精品50| 男人舔女人下体高潮全视频| 桃色一区二区三区在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲精品国产av成人精品 | 亚洲精品国产成人久久av| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 热99在线观看视频| 国产单亲对白刺激| 波多野结衣高清无吗| 午夜精品在线福利| 免费无遮挡裸体视频| 男女边吃奶边做爰视频| 内地一区二区视频在线| 深夜a级毛片| 少妇熟女欧美另类| 久久精品人妻少妇| 国产精品嫩草影院av在线观看| 黄色日韩在线| av在线播放精品| 国产伦一二天堂av在线观看| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 日韩三级伦理在线观看| 国产美女午夜福利| 悠悠久久av| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 看黄色毛片网站| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产91av在线免费观看| 美女大奶头视频| 免费看日本二区| 深夜a级毛片| 极品教师在线视频| 村上凉子中文字幕在线| 国产欧美日韩一区二区精品| 在线播放国产精品三级| 国产乱人视频| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产精品久久久久久av不卡| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 少妇丰满av| 精品日产1卡2卡| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 三级国产精品欧美在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 一本久久中文字幕| 亚洲中文字幕日韩| 禁无遮挡网站| 成人亚洲欧美一区二区av| 插阴视频在线观看视频| 黄色配什么色好看| 超碰av人人做人人爽久久| 国产伦在线观看视频一区| 欧美性感艳星| 日韩在线高清观看一区二区三区|