探討蒸汽安瓿檢漏滅菌器滅菌性能驗(yàn)證方法

摘 要：確保XG1.DN-3.0蒸汽安瓿檢漏滅菌器按設(shè)定的滅菌參數(shù)對小容量注射液進(jìn)行滅菌，能有效地達(dá)到滅菌效果，保證小容量注射液的無菌。用經(jīng)過校準(zhǔn)合格的溫度探頭分別對蒸汽安瓿檢漏滅菌器進(jìn)行連續(xù)三次空載熱分布、滿載熱分布、熱穿透及生物指示劑挑戰(zhàn)測試，驗(yàn)證過程滅菌溫度設(shè)定為115℃，滅菌時間為30min。熱分布驗(yàn)證過程，蒸汽安瓿檢漏滅菌器腔體內(nèi)所有探頭溫度均維持在115℃～117℃，蒸汽安瓿檢漏滅菌器空載熱分布、滿載熱分布/熱穿透及生物指示劑挑戰(zhàn)測試結(jié)果表明，滅菌過程，在設(shè)備空載、滿載情況下，蒸汽安瓿檢漏滅菌器溫度分布均勻，熱穿透各探頭溫度F0值均>8，滅菌后所有生物指示劑挑戰(zhàn)檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽性對照檢驗(yàn)結(jié)果為陽性。因此，按照預(yù)期的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌，滅菌過程蒸汽安瓿檢漏滅菌器空載熱分布、滿載熱穿透及滅菌效果有效。該設(shè)備符合滅菌設(shè)備設(shè)計及GMP要求。

關(guān)鍵詞：蒸汽安瓿檢漏滅菌器 熱分布 熱穿透 生物指示劑挑戰(zhàn)

中圖分類號：R11 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2018）05（c）-0099-02

蒸汽安瓿檢漏滅菌器性能驗(yàn)證的目標(biāo)是，按預(yù)期的滅菌工藝參數(shù)對小容量注射液進(jìn)行滅菌，保證小容量注射液的無菌性。蒸汽安瓿檢漏滅菌器滅菌性前應(yīng)確保設(shè)備的真空保壓及B-D測試結(jié)果合格。筆者就XG1.DN-3.0蒸汽安瓿檢漏滅菌器的滅菌性能驗(yàn)證介紹如下，以便互相學(xué)習(xí)和借鑒。

1 器材與試劑

1.1 XG1.DN-3.0蒸汽安瓿檢漏滅菌器

該設(shè)備系采用飽和蒸汽，利用蒸汽的穿透性以及冷凝時釋放出大量的潛熱，使被滅菌物品處于高溫和潮濕的狀態(tài)下，從而使細(xì)菌蛋白質(zhì)凝固而被殺死。

1.2 溫度驗(yàn)證儀

溫度計量干井爐為FLUKE-914X系列；濕熱探頭（傳感器）為德國UST原產(chǎn)高精度薄膜鉑電阻芯片，芯片等級為1/3B級。

1.3 安瓿瓶

山東力諾特種玻璃股份有限公司生產(chǎn)、規(guī)格2mL、批號201611012。

1.4 生物指示劑

美國3M公司生產(chǎn)、批號S-495、含菌量（>1.0x106 cfu/支）。

2 方法與結(jié)果

2.1 熱電偶校準(zhǔn)

熱分布前后用三點(diǎn)校準(zhǔn)法（低點(diǎn)溫度、驗(yàn)點(diǎn)溫度、高點(diǎn)溫度）分別對驗(yàn)證用的15組熱電偶進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)時間設(shè)定為3min，校準(zhǔn)精度為0.5℃。校準(zhǔn)過程如下。

（1）將驗(yàn)證儀的15組熱電偶置于溫度干井之中，打開溫度干井的電源，待其穩(wěn)定后，將驗(yàn)證儀打開使之處于測試狀態(tài)，進(jìn)行90℃校驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)并保持3min。

（2）將驗(yàn)證儀的15組熱電偶置于溫度干井之中，打開溫度干井的電源，待穩(wěn)定在130℃后，將驗(yàn)證儀打開，使之處于測試狀態(tài)，進(jìn)行130℃校驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)并保持3min。

（3）進(jìn)行115℃校驗(yàn)，校驗(yàn)過程同⑵。

合格標(biāo)準(zhǔn)：熱電偶在確認(rèn)試驗(yàn)前后于90℃、115℃、130℃三個點(diǎn)校驗(yàn)，恒溫保持3min，各熱電偶溫差≤±0.5℃。

（4）數(shù)據(jù)分析。在校準(zhǔn)的3個溫度點(diǎn)，驗(yàn)證用測試熱電偶與標(biāo)準(zhǔn)探頭的溫差最大值沒有超過0.5℃，因此，驗(yàn)證用測試探頭的精度和范圍符合規(guī)定要求。

2.2 空載熱分布試驗(yàn)

（1）將經(jīng)校準(zhǔn)合格的15組溫度探頭通過驗(yàn)證接口放入滅菌腔室。其中1支探頭置于蒸汽進(jìn)口處，1支探頭置于滅菌器溫度控制探頭旁（冷凝水出口處），其余均勻分布在滅菌室各處。按《02車間滅菌檢漏崗位SOP》進(jìn)行操作，運(yùn)行過程中每隔0.5min記錄各點(diǎn)溫度，按設(shè)定滅菌溫度為115℃、滅菌壓力為75kPa、滅菌時間為30min，連續(xù)運(yùn)行3次，以檢查其滅菌效果及重現(xiàn)性。

（2）按上述空載（熱分布）測試⑴，反復(fù)進(jìn)行3次驗(yàn)證測試過程。

（3）檢測后用檢測儀讀取、打印數(shù)據(jù)。

合格標(biāo)準(zhǔn)：達(dá)到115℃后，各測點(diǎn)最大值與平均值、平均值與最小值溫度之差不應(yīng)越過1℃。

（4）數(shù)據(jù)分析。

①空載熱分布。

探頭布點(diǎn)位置：其中1支探頭置于蒸汽進(jìn)口處，1支探頭置于滅菌器溫度控制探頭旁（冷凝水出口處），其余均勻分布在滅菌室各處。

開啟滅菌程序，滅菌程序設(shè)定為115℃滅菌30min，連續(xù)運(yùn)行3次，檢查其重現(xiàn)性，根據(jù)滅菌過程15組探頭溫度，檢驗(yàn)其滅菌性能。

第一，空載1滅菌期間。

最大值：116.18℃；最小值：115.03℃；平均值： 115.51℃；

最大值-平均值：0.67℃；平均值-最小值：0.48℃。

第二，空載2滅菌期間。

最大值：116.14℃；最小值：115.08℃；平均值： 115.48℃；

最大值-平均值：0.66℃；平均值-最小值：0.40℃。

第三，空載3滅菌期間。

最大值：116.07℃；最小值 115.04℃；平均值： 115.43℃；

最大值-平均值：0.64℃；平均值-最小值：0.39℃。

結(jié)論：空載滅菌期間，滅菌設(shè)備腔室各點(diǎn)溫度分布均勻，前門下部溫度稍低，經(jīng)分析為滅菌柜的冷點(diǎn)，該設(shè)備滿足生產(chǎn)工藝及符合GMP要求。

②滿載熱分布/熱穿透試驗(yàn)。

滅菌器內(nèi)裝載的物品：小容量注射液（2mL）。裝載量：滿載約13.5萬支。

探頭布點(diǎn)位置：其中1支探頭置于熱水進(jìn)口處，1支探頭置于滅菌器溫度控制探頭旁（冷凝水出口處），其余均勻插入在滅菌室各處的藥液中（將裝有內(nèi)容物的安瓿瓶頸部切開，插入探頭，然后用生膠布將切口包裹嚴(yán)密）。

開啟滅菌程序，滅菌程序設(shè)定為115℃滅菌30min，滿載連續(xù)運(yùn)行3次，檢查其重現(xiàn)性，根據(jù)滅菌過程15組探頭溫度，檢驗(yàn)其滅菌性能。

第一，滿載熱分布1：最大值：115.70℃；最小值： 115.04℃；平均值：115.45℃；

最大值-平均值：0.25℃；平均值-最小值：0.41℃。

第二，滿載熱分布2：最大值：115.98℃；最小值： 115.06℃；平均值：115.46℃；

最大值-平均值：0.52℃；平均值-最小值：0.40℃。

第三，滿載熱分布3最大值：115.73℃；最小值：115.00℃；平均值：115.50℃；

最大值-平均值：0.23℃；平均值-最小值：0.50℃。

結(jié)論：滿載滅菌期間，滅菌設(shè)備腔室各測點(diǎn)溫度分布均勻，該設(shè)備滿足生產(chǎn)工藝及符合GMP要求。滿載熱穿透測試結(jié)果見表1。

由表1可知以上三次滿載各探頭溫度符合設(shè)計及GMP要求，各探頭F0值均>8，滿足滅菌要求。

③生物指示劑挑戰(zhàn)。

同步滿載熱穿透試驗(yàn)，將15支含菌量為3.3×106的3M嗜熱脂肪桿菌指示劑均勻分布在設(shè)備腔室內(nèi)，連續(xù)運(yùn)行3次，并對滅菌后的各BI指示劑取樣檢驗(yàn)，同時做陽性對照，結(jié)果表明，未滅指示劑培養(yǎng)結(jié)果呈陽性，被滅指示劑培養(yǎng)結(jié)果均呈陰性，指示劑滅菌后均已失活；滅菌結(jié)果生物指示劑挑戰(zhàn)合格。

3 結(jié)語

連續(xù)三次空載及滿載運(yùn)行結(jié)果表明，滅菌過程，蒸汽安瓿檢漏滅菌器腔體內(nèi)所有探頭溫度均維持在115℃～117℃，平均值與最小值溫度之差小于1℃，蒸汽安瓿檢漏滅菌器空載熱分布及滿載熱分布均勻；三次滿載熱穿透及生物指示劑挑戰(zhàn)結(jié)果表明，滅菌過程，在設(shè)備滿載情況下，各探頭溫度F0值均>8，滅菌后所有生物指示劑檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽性對照檢驗(yàn)結(jié)果為陽性。因此，按照預(yù)期批準(zhǔn)的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌，蒸汽安瓿檢漏滅菌器熱分布均勻、滅菌效果有效。該設(shè)備符合滅菌設(shè)備設(shè)計及GMP要求。

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