不同品種菊花總黃酮的含量比較

摘 要：菊花有很好的藥用和食用價值，在杭州也算特產(chǎn)，桐鄉(xiāng)的種植面積較大。本文以杭州萬向?qū)W院花圃采摘的九種菊花品種為實驗材料，研究九種菊花的總黃酮含量，比較每個菊花品種的質(zhì)量差異，為制定菊花的相關(guān)質(zhì)量標準提供相應(yīng)的理論參考，為選育菊花的優(yōu)良品種提供科學依據(jù)。

關(guān)鍵詞：不同品種菊花；總黃酮；含量比較

菊花，Dendranthema morifolium（Ramat. ）Tzvel. 為菊科菊屬多年生的宿根草本植物，是中國的傳統(tǒng)花卉，有極高的觀賞價值，也具有很高的藥用價值。臨床上多用于治療風熱感冒、頭暈?zāi)垦?、眼目昏花、目赤腫痛等疾病。除此之外菊花還具有抑菌消炎、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、抗疲勞等作用，近年來的新發(fā)現(xiàn)菊花對肝的保護作用、鎮(zhèn)痛作用。黃酮成分具有抗衰老和抗菌抗病毒作用。

1.藥用菊花的化學成分

菊花中的有效成分主要包括三類：黃酮類、揮發(fā)油、多糖等。隨著近幾年檢測方法以及提取工藝的提高，對于菊花的黃酮類成分研究越來越深入。從菊花中已經(jīng)分離得到的黃酮類成分有香葉木素、香葉木素 7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素、金合歡素7-O-β-D-葡萄糖苷、金合歡素 7-O-（6″-O-乙酰）-β-D-葡萄糖苷、金合歡素、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素和異澤蘭黃素。

2.菊花的總黃酮測定方法構(gòu)建

2.1建立菊花的種質(zhì)資源圃

菊花是藥材，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和生活等方面，本次研究的菊花樣品是我院花圃種質(zhì)資源圃中選取9個不同菊花花序的品種，進行總黃酮的測定，相對來說貯藏時間較短，成分較為完整。先是菊花殺青1分鐘，然后放入烘箱干燥再粉碎，然后裝袋標記。

2.2 菊花總黃酮的測定方法

不同栽培類型的品種中的菊花總黃酮含量存在明顯的差異，因此采用高效的提取工藝是非常重要的。通常采用回流提取法、超聲提取法和60℃水溫恒溫萃取法。除了這些提取方法還有一些別的提取方法，如索氏提取法、超臨界流體提取法等等，而方法的選擇是根據(jù)測定的化學成分而定的。測定總黃酮的最佳方法就是超聲提取法。相比普通的回流提取更加節(jié)能、省時、高效等優(yōu)點。

2.3 儀器與試藥及菊花品種

紫外-可見分光光度計；精確到0.0001g的電子天平；蘆丁對照品。1%氫氧化鈉溶液，10%硝酸鋁溶液， 5%亞硝酸鈉溶液，70%乙醇溶液。所用的水均為蒸餾水，試劑均為分析純。采集品種有錦菊1號（區(qū)試）、早小洋菊（區(qū)試）、金菊3號（區(qū)試）、金絲黃菊、婺源黃菊、大洋菊、金菊1號、小黃菊、早小洋菊。

2.4 定制標準曲線

首先要將蘆丁對照品配成溶液濃度為0.1992mg/ml。精密稱取蘆丁對照品0.0996g，用無水甲醇溶解，轉(zhuǎn)移入50ml容量瓶中，用無水甲醇定容至50ml刻度線，搖勻。精確移取5.0ml到50ml容量瓶中，用無水甲醇定容到50ml，搖勻。準確吸取該蘆丁對照品溶液0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5ml分別移入10ml的容量瓶中，加甲醇至3.5ml，先加入5%亞硝酸鈉溶液0.5ml，搖勻，放置6分鐘后再加入10%硝酸鋁溶液0.5ml搖勻，放置6分鐘，最后加入1%氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，用水定容至10ml刻度線，放置12分鐘后，以空白溶液（不加蘆丁對照品，直接用無水甲醇）為參比，在波長510nm出測吸光度，得到方程式：Y=10.129C-0.0065（r=0.9992）。線性范圍：0.212～0.742mg/ml。

2.5樣品液的制備

實驗所需的試液都要提前準備。取藥材0.2500±0.0010g，精確稱定重量，放入具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，密塞，稱定重量，并記錄，超聲處理40分鐘，放置冷卻，再稱定重量，用70%乙醇補足損失的重量，再搖勻，過濾，取續(xù)濾液1ml，用70%乙醇定容于10ml容量瓶至刻度線，從中取3.5ml，移入10ml的容量瓶種，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.5ml，搖勻，放置6分鐘后分別加10%硝酸鋁溶液0.5ml搖勻，放置6分鐘，再分別加1%氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，用水定容至10ml刻度線，放置12分鐘后，以空白溶液（不加菊花超聲過濾的續(xù)濾液，用70%乙醇代替）為參比，在波長510nm出測吸光度。并記錄數(shù)據(jù)。

2.6重復(fù)性實驗

精密稱取同一樣品2份，按含量測定方法，重復(fù)測定總黃酮的含量，結(jié)果RSD小于5%，實驗重復(fù)性良好。

3.數(shù)據(jù)分析

每一種樣品是稱取2份做重復(fù)性實驗，測定數(shù)據(jù)分別為重復(fù)1、重復(fù)2。結(jié)合重復(fù)1、重復(fù)2的數(shù)據(jù)RSD小于5%則為合格，并記錄，若數(shù)據(jù)RSD大于5%則為不合格，樣品需要重復(fù)實驗，表格中的數(shù)據(jù)均為重復(fù)性實驗合格。測定結(jié)果見表。

%，去掉最高值最低值，中間水平大約在7.2281%之間。其中每個品種都做了2份重復(fù)性實驗，達到重復(fù)性合格才放到表格之中。

4.總結(jié)

所有樣品的總黃酮含量在5.3899 %～9.6367%之間，以婺源黃菊最高，小黃菊最低，錦菊1號（區(qū)試）、早小洋菊（區(qū)試）、婺源黃菊、金菊1號、早小洋菊在7%以上，通過本研究，得出婺源黃菊的總黃酮含量上較有優(yōu)勢，為選育高總黃酮菊花的優(yōu)良品種提供科學依據(jù)。

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[3]賈凌云，孫毅，王春陽，孫啟時. 菊花總黃酮提取工藝研究[J] .中藥材，2003，26（01）：35-37.

作者簡介：

劉茂泉（1968、2--），男，漢族，浙江杭州人，講師，碩士，主要從事園藝植物生產(chǎn)技術(shù)研究。