單核細(xì)胞HLA-DR指數(shù)在燒傷患者中的表達(dá)及臨床意義

邢娟娟

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院燒傷科，南昌 330006)

在燒傷患者中，感染是常見且嚴(yán)重并發(fā)癥之一，是導(dǎo)致患者高死亡率的主要因素。有文獻(xiàn)報道，近30年來燒傷感染是燒傷患者死亡的首要原因[1-3]。由于感染癥狀不具典型性和特異性，因此在早期診斷中很難發(fā)現(xiàn)。本研究通過流式細(xì)胞儀檢測燒傷患者外周血單核細(xì)胞表面HLA-DR指數(shù)，對預(yù)警早期燒傷并發(fā)感染具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 70例均為我院燒傷科住院病例，將其設(shè)為觀察組，納入標(biāo)準(zhǔn)為燒傷后24h內(nèi)入住我院成年患者，其中，男44例，女26例，年齡18歲-87歲，平均年齡36.8歲，燒傷原因為火焰燒傷20例，熱液燒傷36例，電燒傷9例，其它5例，燒傷面積≥30%9例，燒傷面積 10%-29%16例，燒傷面積＜10%45例。同時選取同期來南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院健康體檢的70例設(shè)為對照組，納入標(biāo)準(zhǔn)為無發(fā)熱、WBC計數(shù)、肝腎功能正常，其中，男性40例，女性30例，平均年齡35.6歲。觀察組入院后給予及時的抗感染，抗休克，創(chuàng)面換藥及手術(shù)治療等對癥治療。

1.2 儀器與試劑 美國BD FACSCanto II流式細(xì)胞儀， 試劑 CD14-PE，HLA-DR-APC，CD45-PerCP，溶血素均購置美國BD公司。

1.3 檢測方法 對入院治療前患者及健康體檢者均在嚴(yán)格無菌操作下抽取抗凝靜脈血2ml，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測單核細(xì)胞HLA-RD指數(shù)，取流式專用管，依次加入HLA-DR-APC，CD14-PE，CD45-PerCP 抗體各 5μl，加入全血 50μl，混勻，室溫下避光孵育20min.每管加入溶血劑1ml，混勻，室溫下避光 20min，離心 1500 轉(zhuǎn)/min，5min，棄上清，加入PBS 1ml，1500轉(zhuǎn)/min離心5min，棄上清，再加入300μl PBS重懸，上機(jī)檢測。

1.4 HLA-DR指數(shù)計算公式 HLA-DR指數(shù)=單核細(xì)胞HLA-DR平均熒光強度/粒細(xì)胞HLA-DR平均熒光強度；通過CD45/SSC設(shè)定淋巴細(xì)胞，中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞亞群。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 22.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計量資料用（±s）表示，組間差異比較采用兩獨立樣本t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組、對照組HLA-DR指數(shù)、白細(xì)胞（WBC）計數(shù)比較 觀察組HLA-DR指數(shù)明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，觀察組WBC計數(shù)較對照組顯著增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 觀察組、對照組HLA-DR指數(shù)、WBC比較

2.2 不同燒傷面積患者HLA-DR指數(shù)、WBC計數(shù)比較 燒傷面積≥30%患者HLA-DR指數(shù)明顯低于燒傷面積10%-29%、燒傷面積＜10%患者和對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），WBC均高于其它燒傷面積組及對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；燒傷面積10%-29%患者HLA-DR指數(shù)低于燒傷面積?10%患者及對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05），但燒傷面積10%-19%和燒傷面積＜10%患者間WBC計數(shù)無統(tǒng)計學(xué)意義 （P＞0.05）.燒傷面積＜10%的患者HLA-DR指數(shù)表達(dá)低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表 2。

表2 不同燒傷面積患者HLA-DR指數(shù)、WBC計數(shù)比較

3 討論

燒傷外科中感染是最常見的并發(fā)癥，具有高發(fā)病率、高死亡率特點，是造成燒傷患者死亡的主要原因之一[4]。傳統(tǒng)的血培養(yǎng)是燒傷感染診斷的臨床常用方法，但血培養(yǎng)周期長，陽性率低，部分細(xì)菌培養(yǎng)困難，且特異性不高；WBC與感染的臨床分級相關(guān)，但出現(xiàn)較晚，受患者本身基礎(chǔ)WBC水平和感染后應(yīng)激反應(yīng)強度影響.這些都嚴(yán)重影響患者的及時診斷。在燒傷患者中感染的發(fā)生率和死亡率居高不下，因此感染的早期診斷和治療顯得十分重要[5，6]。本研究表明，單核細(xì)胞表面HLA-DR指數(shù)的表達(dá)與燒傷感染具有一定的相關(guān)性，可預(yù)警燒傷早期感染及嚴(yán)重程度。

HLA-DR屬MHC II類分子，是抗原提呈細(xì)胞向T細(xì)胞提呈抗原時所必須的一個蛋白，正常情況下外周血單核細(xì)胞HLA-DR高表達(dá)，嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷或大手術(shù)后單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)顯著下降，從而抑制抗原遞呈功能，抑制免疫應(yīng)答，導(dǎo)致免疫功能低下，甚至出現(xiàn)免疫麻痹[7]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組HLA-DR指數(shù)顯著低于對照組，觀測組WBC計數(shù)高于對照組；燒傷面積組間比較：燒傷面積越大，皮膚損傷相對嚴(yán)重，HLA-DR指數(shù)隨之降低，提示HLA-DR指數(shù)與燒傷面積有一定相關(guān)性，其水平與燒傷面積呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。燒傷面積≥30%患者WBC均高于其它燒傷面積組及對照組，有相對診斷價值，但燒傷面積10%-29%和燒傷面積＜10%患者間WBC計數(shù)無統(tǒng)計學(xué)意義，說明該兩組患者對燒傷感染的預(yù)警及嚴(yán)重程度不及HLA-DR指數(shù)敏感，因此，HLADR指數(shù)的檢測對于燒傷患者早期感染的診斷有著重要意義。

綜上所述，HLA-DR指數(shù)是細(xì)胞感染特異性和靈敏度的指標(biāo)，燒傷面積越大HLA-DR指數(shù)相對降低，預(yù)示著感染的發(fā)生及嚴(yán)重程度，因此可作為早期診斷燒傷感染敏感指標(biāo)，對燒傷患者早期診斷感染有著重要作用。HLA-DR指數(shù)作為早期監(jiān)測感染的指標(biāo)，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)血培養(yǎng)、WBC計數(shù)，為臨床燒傷感染的預(yù)警及嚴(yán)重程度的提供可靠價值，具有良好的臨床應(yīng)用前景。種種原因本研究沒能跟蹤觀察，有待深入。