單核細胞HLA-DR指數在燒傷患者中的表達及臨床意義

邢娟娟

(南昌大學第一附屬醫(yī)院燒傷科，南昌 330006)

在燒傷患者中，感染是常見且嚴重并發(fā)癥之一，是導致患者高死亡率的主要因素。有文獻報道，近30年來燒傷感染是燒傷患者死亡的首要原因[1-3]。由于感染癥狀不具典型性和特異性，因此在早期診斷中很難發(fā)現。本研究通過流式細胞儀檢測燒傷患者外周血單核細胞表面HLA-DR指數，對預警早期燒傷并發(fā)感染具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 70例均為我院燒傷科住院病例，將其設為觀察組，納入標準為燒傷后24h內入住我院成年患者，其中，男44例，女26例，年齡18歲-87歲，平均年齡36.8歲，燒傷原因為火焰燒傷20例，熱液燒傷36例，電燒傷9例，其它5例，燒傷面積≥30%9例，燒傷面積 10%-29%16例，燒傷面積＜10%45例。同時選取同期來南昌大學第一附屬醫(yī)院健康體檢的70例設為對照組，納入標準為無發(fā)熱、WBC計數、肝腎功能正常，其中，男性40例，女性30例，平均年齡35.6歲。觀察組入院后給予及時的抗感染，抗休克，創(chuàng)面換藥及手術治療等對癥治療。

1.2 儀器與試劑 美國BD FACSCanto II流式細胞儀， 試劑 CD14-PE，HLA-DR-APC，CD45-PerCP，溶血素均購置美國BD公司。

1.3 檢測方法 對入院治療前患者及健康體檢者均在嚴格無菌操作下抽取抗凝靜脈血2ml，應用流式細胞術檢測單核細胞HLA-RD指數，取流式專用管，依次加入HLA-DR-APC，CD14-PE，CD45-PerCP 抗體各 5μl，加入全血 50μl，混勻，室溫下避光孵育20min.每管加入溶血劑1ml，混勻，室溫下避光 20min，離心 1500 轉/min，5min，棄上清，加入PBS 1ml，1500轉/min離心5min，棄上清，再加入300μl PBS重懸，上機檢測。

1.4 HLA-DR指數計算公式 HLA-DR指數=單核細胞HLA-DR平均熒光強度/粒細胞HLA-DR平均熒光強度；通過CD45/SSC設定淋巴細胞，中性粒細胞和單核細胞亞群。

1.5 統計學方法 統計學軟件SPSS 22.0對數據進行分析和處理，計量資料用（±s）表示，組間差異比較采用兩獨立樣本t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組、對照組HLA-DR指數、白細胞（WBC）計數比較 觀察組HLA-DR指數明顯低于對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)，觀察組WBC計數較對照組顯著增高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 觀察組、對照組HLA-DR指數、WBC比較

2.2 不同燒傷面積患者HLA-DR指數、WBC計數比較 燒傷面積≥30%患者HLA-DR指數明顯低于燒傷面積10%-29%、燒傷面積＜10%患者和對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05），WBC均高于其它燒傷面積組及對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)；燒傷面積10%-29%患者HLA-DR指數低于燒傷面積?10%患者及對照組，差異均有統計學意義 （P＜0.05），但燒傷面積10%-19%和燒傷面積＜10%患者間WBC計數無統計學意義 （P＞0.05）.燒傷面積＜10%的患者HLA-DR指數表達低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表 2。

表2 不同燒傷面積患者HLA-DR指數、WBC計數比較

3 討論

燒傷外科中感染是最常見的并發(fā)癥，具有高發(fā)病率、高死亡率特點，是造成燒傷患者死亡的主要原因之一[4]。傳統的血培養(yǎng)是燒傷感染診斷的臨床常用方法，但血培養(yǎng)周期長，陽性率低，部分細菌培養(yǎng)困難，且特異性不高；WBC與感染的臨床分級相關，但出現較晚，受患者本身基礎WBC水平和感染后應激反應強度影響.這些都嚴重影響患者的及時診斷。在燒傷患者中感染的發(fā)生率和死亡率居高不下，因此感染的早期診斷和治療顯得十分重要[5，6]。本研究表明，單核細胞表面HLA-DR指數的表達與燒傷感染具有一定的相關性，可預警燒傷早期感染及嚴重程度。

HLA-DR屬MHC II類分子，是抗原提呈細胞向T細胞提呈抗原時所必須的一個蛋白，正常情況下外周血單核細胞HLA-DR高表達，嚴重創(chuàng)傷、燒傷或大手術后單核細胞HLA-DR表達顯著下降，從而抑制抗原遞呈功能，抑制免疫應答，導致免疫功能低下，甚至出現免疫麻痹[7]。

本研究結果顯示，觀察組HLA-DR指數顯著低于對照組，觀測組WBC計數高于對照組；燒傷面積組間比較：燒傷面積越大，皮膚損傷相對嚴重，HLA-DR指數隨之降低，提示HLA-DR指數與燒傷面積有一定相關性，其水平與燒傷面積呈負相關關系。燒傷面積≥30%患者WBC均高于其它燒傷面積組及對照組，有相對診斷價值，但燒傷面積10%-29%和燒傷面積＜10%患者間WBC計數無統計學意義，說明該兩組患者對燒傷感染的預警及嚴重程度不及HLA-DR指數敏感，因此，HLADR指數的檢測對于燒傷患者早期感染的診斷有著重要意義。

綜上所述，HLA-DR指數是細胞感染特異性和靈敏度的指標，燒傷面積越大HLA-DR指數相對降低，預示著感染的發(fā)生及嚴重程度，因此可作為早期診斷燒傷感染敏感指標，對燒傷患者早期診斷感染有著重要作用。HLA-DR指數作為早期監(jiān)測感染的指標，明顯優(yōu)于傳統血培養(yǎng)、WBC計數，為臨床燒傷感染的預警及嚴重程度的提供可靠價值，具有良好的臨床應用前景。種種原因本研究沒能跟蹤觀察，有待深入。