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    nidogen-2、HE4和TK1在卵巢癌中的表達(dá)意義研究

    2018-10-24 09:40:54牛艷昕
    中國(guó)婦幼健康研究 2018年10期
    關(guān)鍵詞:卵巢癌良性標(biāo)志物

    王 楠,劉 杰,周 軼,牛艷昕

    (金華市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,浙江 金華 321000)

    卵巢癌是女性生殖道常見(jiàn)的惡性腫瘤,發(fā)病率較高,臨床癥狀以月經(jīng)不調(diào)、消瘦最常見(jiàn)[1]。相關(guān)研究表明,大部分卵巢癌患者在初診時(shí)即處于晚期,5年生存率大約在30%[2-3]。采取有效的檢查方式對(duì)早期卵巢癌患者進(jìn)行準(zhǔn)確診斷,可及早確立患者病情進(jìn)展程度,并針對(duì)患者疾病嚴(yán)重程度開(kāi)展相應(yīng)的治療,在臨床中具有重要意義。目前,臨床中針對(duì)卵巢癌的診斷主要采用糖類抗原125(carbohydrate antigen125,CA125)標(biāo)志物,長(zhǎng)期的臨床研究發(fā)現(xiàn),該標(biāo)志物雖具有一定檢出率,但采用該標(biāo)志物進(jìn)行診斷特異性較低,相應(yīng)的假陽(yáng)性率較高[4]。近期,我們參考諸多學(xué)者相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),血清nidogen-2、人附睪蛋白4(human epididymisprotein 4,HE4)和胸苷激酶1(thymidine kinase1,TK1)等標(biāo)志物應(yīng)用于卵巢癌患者臨床診斷中具有較高的診斷價(jià)值[5]。為探討上述三種標(biāo)志物與卵巢癌疾病進(jìn)展的關(guān)系以及其在卵巢癌患者發(fā)病過(guò)程中的具體表現(xiàn),本次研究選取我院近期收治的多例卵巢癌患者、良性卵巢疾病患者以及近期于我院進(jìn)行體檢的健康女性作為研究對(duì)象,就血清nidogen-2、HE4和TK1聯(lián)合檢測(cè)在卵巢癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行分析,報(bào)告如下。

    1資料與方法

    1.1一般資料

    本次研究選取金華市人民醫(yī)院2015年10月至2017年10月期間收治的74例卵巢癌患者作為卵巢癌組,選同期于我院治療的48例良性卵巢作為良性組,另選同期于我院體檢的45例健康女性作為對(duì)照組。卵巢癌組中,患者最大年齡77歲,最小年齡35歲,平均年齡(54.68±6.43)歲,74例患者均參考國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(Federation International of Gynecology and Obstetrics,F(xiàn)IGO)手術(shù)病理分期,其中早期卵巢癌(Ⅰ~Ⅱ期)患者共27例,晚期卵巢癌(Ⅲ期)患者共47例,參考分化程度可分為:52例低分化、18例中分化,4例高分化;良性組中,患者最大年齡75歲,最小年齡32歲,平均年齡(52.17±6.41)歲,其中漿液性囊腺瘤9例,卵巢巧克力囊腫14例,畸胎瘤12例,子宮內(nèi)膜異位癥5例;對(duì)照組中,體檢人群最大年齡73歲,最小年齡34歲,平均年齡(53.41±6.34)歲。三組受檢人員在各項(xiàng)基本資料上無(wú)顯著差異(P>0.05),可進(jìn)行后續(xù)多組間對(duì)比研究。

    1.2納入標(biāo)準(zhǔn)

    卵巢癌組入選所有患者均符合《卵巢癌診治指南》[6]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn),患者在入院后經(jīng)多項(xiàng)常規(guī)檢查后初步診斷,后經(jīng)手術(shù)病理檢查確診。所有患者在入院后均表現(xiàn)出不同程度月經(jīng)不調(diào)、消瘦等癥狀。卵巢癌患者均為首發(fā),未經(jīng)任何治療,排除入院前于他院進(jìn)行放療與化療方式進(jìn)行治療的患者;排除合并有機(jī)體多項(xiàng)器官嚴(yán)重功能障礙的患者;排除其他系統(tǒng)性腫瘤病史的患者;排除多項(xiàng)臨床病案資料不齊全的患者。對(duì)照組體檢人群均未出現(xiàn)冠心病、糖尿病及高血壓疾病。所有患者及家屬均對(duì)本研究知情,并簽署知情同意書(shū),本研究已獲金華市人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

    1.3檢驗(yàn)方法

    進(jìn)行標(biāo)本采集時(shí),所有受檢對(duì)象均處于非月經(jīng)期,在對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行血液樣本采集時(shí)均需空腹8h以上,樣本為5mL肘靜脈血液,將所得樣本置于紅色試管中,后于4℃恒溫環(huán)境下靜置1h,在3 000r/min離心機(jī)下進(jìn)行離心處理,離心操作時(shí)間為15min,取得上層血清置入無(wú)菌EP管中,并將最終樣本放置于-20℃的恒溫環(huán)境中待測(cè)。針對(duì)血清HE4、血清TK1的檢測(cè)主要采用酶聯(lián)吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法,具體操作方法參考檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中相關(guān)要求規(guī)范進(jìn)行,血清中nidogen-2采用化學(xué)免疫增強(qiáng)發(fā)光法,檢測(cè)儀器為UniCelDxl 800型化學(xué)發(fā)光儀(Beckman Coulter)。組織中nidogen-2的檢驗(yàn)主要采用免疫組化檢測(cè)(SP試劑盒)。nidogen-2判定的標(biāo)準(zhǔn)為:上皮下基底膜組織未被染成黃色或棕褐色為陰性反應(yīng)(-);染色部位呈點(diǎn)狀為陰性反應(yīng)(-);上皮下基底膜呈現(xiàn)棕褐色不連續(xù)狀為陽(yáng)性反應(yīng)(+),上皮下基底膜呈現(xiàn)棕褐色毛細(xì)線狀為陽(yáng)性反應(yīng)(++),呈深棕色粗線狀為陽(yáng)性反應(yīng)(+++)。陽(yáng)性表達(dá)率=陽(yáng)性患者例數(shù)/總例數(shù)×100%。血清HE4值正常范圍在0~150pmol/L之間,若所檢測(cè)值超過(guò)150pmol/L則可認(rèn)為呈陽(yáng)性反應(yīng)。血清TK1正常范圍在2pmol/L之間,若所檢測(cè)值超過(guò)2pmol/L則可認(rèn)為呈陽(yáng)性反應(yīng)。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    2結(jié)果

    2.1三組檢測(cè)指標(biāo)結(jié)果比較

    三組間nidogen-2、HE4和TK1水平比較有顯著性差異(均P<0.05),進(jìn)一步每?jī)山M之間比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)卵巢癌組nidogen-2、HE4和TK1等指標(biāo)表達(dá)量顯著高于良性組、對(duì)照組(t值分別為21.36、26.97、15.22、23.69、29.55、16.01,均P<0.05),但良性組與對(duì)照組上述指標(biāo)比較無(wú)顯著性差異(t值分別為1.41、1.85、1.22、1.08,均P>0.05),見(jiàn)表1。

    組別例數(shù)(n)nidogen-2(μg/L)HE4(pmol/L)TK1(pmol/L)卵巢癌組7461.30±6.48481.47±69.383.16±1.03良性組4815.36±3.74*67.12±23.33*0.47±0.12*對(duì)照組4514.91±3.20*#60.89±23.14*#0.40±0.11*#F1 725.231 469.80318.88P0.0000.0000.000

    注:*表示與卵巢癌組對(duì)比,良性組與對(duì)照組nidogen-2、HE4和TK1等數(shù)據(jù)差異P<0.05;#表示與良性組對(duì)比,對(duì)照組nidogen-2、HE4和TK1等數(shù)據(jù)差異P>0.05。

    2.2陽(yáng)性情況分析

    卵巢癌組74例患者中,共檢出nidogen-2陽(yáng)性表達(dá)66例,HE4陽(yáng)性表達(dá)56例,TK1陽(yáng)性表達(dá)57例;良性組48例患者中,共檢出nidogen-2陽(yáng)性表達(dá)3例,HE4陽(yáng)性表達(dá)2例,TK1陽(yáng)性表達(dá)0例;對(duì)照組45例健康人群中,共檢出nidogen-2陽(yáng)性表達(dá)0例,HE4陽(yáng)性表達(dá)0例,TK1陽(yáng)性表達(dá)0例(圖1)。卵巢癌組nidogen-2、HE4和TK1陽(yáng)性表達(dá)率均高于良性組與對(duì)照組(χ2值分別為8.991、7.695,均P<0.05),良性組與對(duì)照組nidogen-2、HE4和TK1陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)顯著差異(均P>0.05),見(jiàn)表2。

    注:圖A卵巢癌組;圖B良性組;圖C對(duì)照組。

    圖1不同組別nidogen-2檢測(cè)結(jié)果(×200)

    Fig.1 Nidogen-2 detecting results of different groups (×200)

    表2三組陽(yáng)性表達(dá)率對(duì)比[n(%)]

    Table 2 Comparison of positive expression rates among three groups[n(%)]

    注:*表示與卵巢癌組對(duì)比,良性組與對(duì)照組nidogen-2、HE4和TK1等數(shù)據(jù)陽(yáng)性表達(dá)率差異P<0.05;#表示與良性組對(duì)比,對(duì)照組nidogen-2、HE4和TK1等數(shù)據(jù)陽(yáng)性表達(dá)率差異P>0.05。

    2.3聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果分析

    以卵巢癌組患者作為后續(xù)研究對(duì)象,不同檢測(cè)方法敏感性、特異性、準(zhǔn)確率均有顯著性差異(χ2值分別為29.321、98.129、31.941,均P<0.05),三聯(lián)檢測(cè)均最高,見(jiàn)表3。

    表3聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果對(duì)比(%)

    Table 3 Comparison of combined detecting results(%)

    檢測(cè)方法敏感性特異性準(zhǔn)確性nidogen-286.4983.3389.19HE472.9747.4575.68TK160.8134.6862.16三聯(lián)檢測(cè)94.5990.9195.95χ229.32198.12931.941P<0.01<0.01<0.01

    3討論

    3.1腫瘤標(biāo)志物在臨床中的應(yīng)用

    腫瘤標(biāo)志物可對(duì)患者疾病機(jī)體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)情況及疾病進(jìn)展情況進(jìn)行一定程度的反饋,Xu等[7]在研究中提出,同一腫瘤可能存在多種不同的腫瘤標(biāo)志物,而不同的腫瘤組織類型中也可能存在相同的腫瘤標(biāo)志物。腫瘤標(biāo)志物對(duì)各類腫瘤疾病的篩選與診斷均具有一定的準(zhǔn)確性,且利用腫瘤標(biāo)志物對(duì)患者患病情況及病情進(jìn)展程度進(jìn)行預(yù)測(cè)時(shí),對(duì)患者機(jī)體造成的創(chuàng)傷較小,且檢測(cè)方式較為簡(jiǎn)單[8],現(xiàn)已在臨床中被廣泛推薦應(yīng)用。針對(duì)卵巢腫瘤的診斷,目前臨床中最為常用的腫瘤標(biāo)志物為CA125,Goff 等[9]在研究中證實(shí),CA125腫瘤標(biāo)志物在對(duì)化療藥物的敏感性、腫瘤復(fù)發(fā)情況及其他盆腔腫瘤的鑒別均具有重要臨床價(jià)值。另有學(xué)者在上述研究基礎(chǔ)上提出,卵巢癌患者在患病期間,其血液中血清CA125水平顯著升高,且CA125腫瘤標(biāo)志物在對(duì)漿液性卵巢癌患者進(jìn)行臨床診斷時(shí)敏感性最高。但我們?cè)谝酝愃频呐R床研究中發(fā)現(xiàn),CA125在對(duì)卵巢癌患者進(jìn)行臨床診斷時(shí)雖具有一定的敏感性,但診斷特異性較低,對(duì)假陽(yáng)性患者不能較好的排除,對(duì)患者后期治療有較為嚴(yán)重的影響[10-11]。

    3.2 nidogen-2、HE4、TK1對(duì)卵巢癌的診斷價(jià)值分析

    上個(gè)世紀(jì)至今,不斷有學(xué)者對(duì)nidogen-2進(jìn)行相關(guān)分析,研究提出nidogen-2可能成為新的具有較高價(jià)值的卵巢癌腫瘤標(biāo)志物[12]。本次研究中通過(guò)對(duì)卵巢癌患者、良性卵巢疾病患者、正常健康女性進(jìn)行分組分析,其中卵巢癌組nidogen-2表達(dá)水平顯著高于良性組與對(duì)照組(P<0.05),說(shuō)明其對(duì)卵巢腫瘤與卵巢疾病的鑒別有顯著效果,可作為一種新型血清腫瘤標(biāo)志物。而HE4則是近期出現(xiàn)的一種對(duì)卵巢癌具有較高診斷敏感性與特異性的腫瘤標(biāo)志物,程喜鋒等[13]在研究中指出,HE4基因的激活可被用于卵巢癌靶向性基因治療,本次研究同樣通過(guò)卵巢癌組患者HE4表達(dá)水平顯著高于良性組與對(duì)照組(P<0.05),證實(shí)了其在卵巢癌臨床診斷的可行性。除此之外,本次研究結(jié)果還表明了,TK1在正常組織中的含量較低,而在腫瘤組織中的含量較高,結(jié)合相關(guān)學(xué)者研究報(bào)告,推測(cè)其原因?yàn)椋簮盒哪[瘤內(nèi)部細(xì)胞增殖速度較快,因而TK1在其中表現(xiàn)了累積增加狀態(tài),其表現(xiàn)水平不斷升高。本次研究還通過(guò)對(duì)上述三種腫瘤標(biāo)志物陽(yáng)性表達(dá)率的檢測(cè)證實(shí)了它們?cè)诼殉舶┘膊∨R床診斷中的應(yīng)用價(jià)值[14]。表明了上述三種腫瘤標(biāo)志物在健康女性中不具備陽(yáng)性表達(dá),而在卵巢良性疾病中僅具有極地的陽(yáng)性表達(dá),在卵巢癌患者中具有較高的陽(yáng)性表達(dá)。通過(guò)該項(xiàng)結(jié)果可對(duì)疑為卵巢癌疾病的患者進(jìn)行初步診斷,并通過(guò)后續(xù)對(duì)敏感性、特異性診斷結(jié)果對(duì)患者疾病狀態(tài)進(jìn)行細(xì)致分析[15]。本次研究中,我們發(fā)現(xiàn)nidogen-2、HE4和TK1在單項(xiàng)診斷上敏感性、特異性無(wú)顯著差異,但均低于三聯(lián)診斷(P<0.05),初步推斷采用上述腫瘤標(biāo)志物對(duì)患者進(jìn)行三聯(lián)診斷更有利于腫瘤疾病的檢出,臨床中可考慮使用,但具體結(jié)論還有待后續(xù)大樣本數(shù)據(jù)進(jìn)一步研究。

    綜上所述,在針對(duì)卵巢癌患者臨床診斷時(shí),采用血清nidogen-2、HE4和TK1聯(lián)合檢測(cè)可有效提高診斷敏感性、特異性及診斷準(zhǔn)確率,可考慮臨床推廣應(yīng)用。

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