太子參須對仔豬免疫系統(tǒng)調理作用的研究

吳建華 楊榮平 張炎達 潘惠青 趙 齊 福建貝迪藥業(yè)有限公司 福建寧德 352000

太子參具有補益脾肺，益氣生津的功效，可提高機體的免疫力。太子參須是太子參的尾根和側須，現(xiàn)代藥理研究證明兩者之間化學成分相同，差異之處在于其成分的含量不同。仔豬群免疫抑制在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中較為普遍，常由于各種不良因素作用機體，使得免疫組織器官受損或免疫細胞活性受到影響，以至干擾免疫細胞對抗原的遞呈，抑制或阻斷抗體的形成，導致豬群機體免疫應答不完全，容易被病原感染而發(fā)病。引起豬群免疫抑制的各種不良因素之間相互聯(lián)系，互為因果，從而使各種疾病的病因變得非常復雜。提升豬群整體免疫力水平，才能從根本上減少畜禽疾病的發(fā)生，提高養(yǎng)殖生產(chǎn)的經(jīng)濟效益。以太子參須為原料制成的中獸藥制劑，取材方便，且效果突出。在畜牧業(yè)的應用上有著廣闊的空間。本試驗通過肌注大劑量環(huán)磷酰胺破壞仔豬的免疫系統(tǒng)，造成仔豬免疫抑制，再通過給予太子參須散，觀察太子參須散對仔豬免疫系統(tǒng)的影響，為太子參須的應用提供科學依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗動物 25～30日齡、體重4.0～5.9 kg的健康仔豬40頭，公母各半。

1.2 試驗藥物和主要試劑 太子參須散，主要成分為太子參須，由福建貝迪藥業(yè)有限公司提供，包裝規(guī)格為200 g/袋，劑型散劑；每克太子參須散含太子參須1 g。對照藥物芪黃素：由愛迪森（北京）生物科技有限公司生產(chǎn)，包裝規(guī)格：100 g/袋，規(guī)格：每克含黃芪多糖不得少于450 mg。環(huán)磷酰胺（cy，江蘇盛邊醫(yī)藥有限公司）、豬瘟抗體ELISA試劑盒（北京愛得士元亨生物科技有限公司）、豬瘟疫苗（江蘇南農(nóng)高科技股份有限公司）。

1.3 主要儀器 Centrifuge 5340R型高速冷凍離心機 （eppendorf），PYX-DHS-60C×25-BS 型隔水式電熱恒溫恒濕培養(yǎng)箱（上海躍進醫(yī)療器械廠），SW-CJCF型超凈工作臺（上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠），LDZF-75KB-II立式壓力蒸汽滅菌器（CSHENAN），SUBAqua12plus 型 水 浴 鍋 （Grant），synergicgyMx 型酶標儀 （Gene Company Limited），BC-6900型血細胞分析儀 （深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）。

1.4 試驗設計 將40頭斷乳仔豬隨機分為空白組、模型組、黃芪多糖組、太子參須散組，每組10頭；除空白組外，其余幾組均用環(huán)磷酰胺造免疫抑制模型，注射環(huán)磷酰胺（cy）5 d后計算白細胞數(shù)，對比模型組的白細胞數(shù)與空白組差異是否顯著，環(huán)磷酰胺注射劑量參考相關文獻[1-2]。造模成功后，模型組正常飼喂，太子參須散組按0.5 g/kg體重劑量灌喂給藥，黃芪多糖組按照每千克飼料拌料給藥200 mg黃芪多糖，每天2次，連用7 d。注射豬瘟疫苗，每頭豬1頭份。試驗期間觀察仔豬的臨床表現(xiàn)，試驗前、免疫后第14 d、28 d給仔豬稱重，前腔靜脈采血，記錄每組仔豬采食量，計算日采食量、日增重和料重比；采血前禁食12 h，用血細胞分析儀器檢測白細胞數(shù)（Lc），采用 ELISA法測定豬瘟抗體水平，嚴格按照豬瘟病毒抗體檢測試劑盒說明書操作?？贵w水平以阻斷率來表示：阻斷率 （%）=100* （ODN450-ODTEST450）/ODN450，式中：ODTEST450為被檢樣本的平均值；ODN450為陰性對照的平均值。計算其生長性能、紅細胞數(shù)、白細胞數(shù)、豬瘟抗體水平，評價太子參須散對仔豬免疫功能的影響。

1.5 仔豬免疫抑制標準 參照文獻[3-7]將仔豬免疫抑制標準定為：（1）仔豬白細胞數(shù)低于正常值，與空白組相比顯著降低；（2）體重降低，與空白組相比顯著降低；（3）精神狀態(tài)不良，采食量減少。

1.6 數(shù)據(jù)分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS20.0軟件中單因素方差分析，Duncan's法進行多重比較，結果用±s表示，P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著。

2 結 果

2.1 試驗仔豬的臨床表現(xiàn) 注射環(huán)磷酰胺 （cy）5 d后，除陰性對照外，其余試驗組仔豬均出現(xiàn)精神狀態(tài)不良，眼無神，運動量少，被毛雜亂，聚堆畏冷，部分仔豬出現(xiàn)腹瀉，會陰部臟亂，有糞便粘著，身體表面亦有糞便，采食量降低。給藥3 d后，藥物組豬部分開始好轉，仔豬被毛開始變干凈，采食量逐漸增多，運動量增多。給藥7 d后，仔豬被毛雖有糞便粘著，但為風干糞便，仔豬精神狀態(tài)變好，采食量增加，糞便略有稀便。

2.2 太子參須散對免疫抑制仔豬生長性能的影響試驗前，各試驗豬體重無顯著性差異（P＞0.05）；造模后，空白組仔豬體重升高明顯；與空白組相比，太子參須散組、黃芪多糖組顯著降低（P＜0.05），模型組與空白組相比，差異不顯著（P＞0.05）；免疫 14 d 后，太子參須組與空白組相比，差異不顯著（P＞0.05），各藥物組與模型組相比，差異顯著（P＜0.05）；免疫28 d，太子參須組、黃芪多糖組與空白組相比，差異不顯著（P＞0.05），各藥物組與模型組相比差異顯著 （P＜0.05）。 見表 1。

表1 太子參須散對免疫抑制仔豬體重的影響

2.3 太子參須散對免疫抑制仔豬白細胞的影響試驗仔豬注射環(huán)磷酰胺（cy）5 d后，模型建立成功，與空白組相比，藥物組和模型組白細胞數(shù)極顯著降低（P＜0.01）；免疫 14 d，與模型組相比，藥物組白細胞數(shù)極顯著（P＜0.01）升高；免疫 28 d，各試驗組間無顯著性差異（P＞0.05）。 見表 2。

表2 各組不同時期白細胞數(shù)變化

2.4 太子參須散對豬瘟疫苗免疫仔豬血清豬瘟抗體水平的影響 試驗前，各試驗組之間豬瘟抗體無顯著性差異（P＞0.05）；免疫 14 d、28 d 后，與模型組相比，空白組和各藥物組豬瘟抗體水平極顯著升高（P＜0.01）。 見表 3。

表3 太子參須散對豬瘟疫苗免疫仔豬血清豬瘟抗體水平的影響

3 分析與討論

1）太子參須散是由中藥太子參的須根組成，太子參具有補益脾肺，益氣生津之效果，多用于脾氣虛證。中獸醫(yī)認為氣是重要的免疫物質，如《內經(jīng)》上講“正氣內存，邪不相干”，而脾為后天之本，現(xiàn)代免疫學研究表明脾是機體最大的免疫器官，因此，太子參須可提高機體免疫功能。中藥制劑能夠改善仔豬的生長性能、提高末重、日增重、日采食量，同時能夠降低料重比，可在一定程度上降低仔豬的腹瀉程 度[8]。張世昌等報道[9]，在飼料中添加復方中藥制劑能顯著降低料重比，有提高末重和平均日增重的趨勢。本研究表明：太子參須散可提高免疫抑制仔豬的日增重、日采食量及降低料重比，且效果明顯。

2）白細胞指標可反映機體細胞免疫狀態(tài)，機體處于健康情況下，其免疫細胞在正常范圍內較高，說明機體的免疫能力較強，因此，白細胞數(shù)量的增加或減少可輔助判斷機體免疫狀態(tài)[10]。白細胞具有滲出、趨化性和吞噬作用，是動物非特異性免疫的重要組成部分和抵御異物入侵的主要防線，是反映機體免疫及抗炎功能的主要標志[11]。本研究結果表明：太子參須散可以提高免疫抑制仔豬血液白細胞數(shù)，使其恢復到正常狀態(tài)，在免疫14 d時作用明顯，表明太子參須散可以在較短時間內提高白細胞數(shù)，恢復其免疫功能。

3）抗體是指機體免疫系統(tǒng)在抗原的剌激下，由B淋巴細胞或記憶細胞增殖分化形成的漿細胞產(chǎn)生的，具有與相應抗原特異性結合的免疫球蛋白，是介導體液免疫效應的重要分子。據(jù)研究表明[12-14]，某些中草藥及有效活性成分可直接作用于B淋巴細胞，使之增殖分化，并可誘導B淋巴細胞對輔助性T細胞的敏感性，從而增強機體對抗原的免疫應答，提高抗體水平。本研究采用對仔豬接種豬瘟疫苗，模擬生產(chǎn)實際中豬瘟疫苗的免疫情況，試驗結果表明：太子參須散可提高免疫抑制仔豬豬瘟抗體水平，與陰性對照組無顯著性差異，在免疫后28 d，可以延長抗體持續(xù)時間。

8 結 論

太子參須散對免疫抑制仔豬有較好的免疫增強作用，同時可提高豬瘟抗體水平，延長抗體持續(xù)時間，以0.5 g/kg體重劑量，2次/d，連續(xù)7 d，效果良好。