三唑磷對(duì)鯔魚(yú)的急性毒性和分布規(guī)律研究

金衍健 應(yīng)忠真 朱劍 李子孟 王范盛

(浙江省海洋水產(chǎn)研究所， 農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)漁場(chǎng)漁業(yè)資源科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，浙江省海洋漁業(yè)資源可持續(xù)利用技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 浙江舟山 316100)

三唑磷(triazophos)是一種廣譜殺蟲(chóng)、殺螨劑，具有較強(qiáng)的觸殺作用，對(duì)魚(yú)類、甲殼類和軟體動(dòng)物具有高毒性[1，2]。近年來(lái)養(yǎng)殖戶為提高經(jīng)濟(jì)效益，保護(hù)養(yǎng)殖產(chǎn)品不受敵害生物的侵害，使用其清除敵害生物，不僅容易導(dǎo)致水域生態(tài)環(huán)境污染并對(duì)水生生物造成負(fù)面影響，而且污染水體排入開(kāi)放水域后，對(duì)其他水體中的養(yǎng)殖生物產(chǎn)生毒殺作用，引起污染事故，產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)糾紛[3]；然而由于三唑磷在環(huán)境中高毒且易降解，引起魚(yú)類等經(jīng)濟(jì)生物死亡后，一般從取樣到實(shí)驗(yàn)室需經(jīng)過(guò)相對(duì)較長(zhǎng)的時(shí)間，對(duì)證據(jù)的保留和檢測(cè)比較困難。一般目前針對(duì)污染事故魚(yú)類樣品，前處理基本都是取其肌肉檢測(cè)，存在很大程度上的假陰性的可能，而且目前對(duì)三唑磷在急性毒性死亡后魚(yú)體不同組織內(nèi)殘留并沒(méi)有相應(yīng)的報(bào)道。本次實(shí)驗(yàn)通過(guò)人工染毒，造成鯔魚(yú)三唑磷急性中毒死亡，取不同組織的樣品，研究其不同組織內(nèi)三唑磷殘留含量，為以后由三唑磷引起漁業(yè)污染事故的樣品檢測(cè)提供技術(shù)支持。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 儀器與試劑

氣相色譜儀(安捷倫7890B，配NPD測(cè)器，美國(guó))，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，固相萃取裝置，氮吹儀，渦旋振蕩器( IKA vortex genius3型，德國(guó))，堿性氧化鋁固相萃取柱(2.5g/6mL，CNW)，丙酮(色譜純)、二氯甲烷(色譜純)、正己烷(色譜純)。

1.2 色譜條件

色譜柱為HP-35(30m×0.25mm×0.25μm)；進(jìn)樣口溫度260℃，柱流速為2.0mL/min，柱溫箱升溫程序條件如表1所示。

表1 柱溫箱升溫程序條件

1.3 樣品的來(lái)源

樣品來(lái)自舟山岱山海域，因三唑磷農(nóng)藥污染致海洋中鯔魚(yú)急性毒性死亡，魚(yú)樣分別取其腦、腸、肝臟、皮、鰓、血、性腺、胰臟和肌肉共9個(gè)部位，切碎勻漿，立刻取樣進(jìn)行前處理。

1.4 樣品處理方法

取適量的樣品，置于50mL離心管內(nèi)，加入20mL乙酸乙酯渦旋振蕩提取2min，收集于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，重復(fù)提取一次，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入2mL正己烷洗脫，取上層正己烷過(guò)活化好的堿性氧化鋁柱(2.5g/6mL，CNW)，不收集流出有機(jī)相，重復(fù)加正己烷2mL洗脫旋轉(zhuǎn)蒸瓶。再用5mL二氯甲烷洗脫堿性氧化鋁柱，收集流出有機(jī)相于15mL離心管中，氮吹至干，加丙酮定容至1mL，供氣相色譜氮磷檢測(cè)器分析。

2 結(jié)果與討論

通過(guò)GC-NPD測(cè)得不同組織三唑磷含量特征的結(jié)果如表2所示。

表2 不同魚(yú)體組織中三唑磷含量

結(jié)果測(cè)得數(shù)值在2.04～114.42μg/kg之間，腦中含量最高，肌肉中含量最低，總體趨勢(shì)分為三個(gè)階梯，腦>血、性腺>鰓、胰臟、肝臟、腸、皮和肌肉，腦的殘留量是鰓、胰臟、肝臟、腸、皮和肌肉等的13.8～56.0倍，是血、性腺的1.45～2.07倍。

三唑磷為有機(jī)磷酸酯類化合物，其中毒機(jī)制主要是抑制乙酰膽堿酯酶(AChE)的活性，使其失去水解乙酰膽堿(ACh)的能力，造成膽堿能神經(jīng)末梢釋放的ACh大量蓄積，興奮ACh的毒蕈堿型受體(M受體)和煙堿型受體(N受體)，產(chǎn)生毒蕈堿樣和煙堿樣作用及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀[4-6]。

有機(jī)磷農(nóng)藥毒性主要是對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制，本次實(shí)驗(yàn)測(cè)得腦、血和性腺中三唑磷含量比較高，可能原因是三唑磷通過(guò)鰓的快速吸收[7，8]，進(jìn)入魚(yú)體內(nèi)，由于神經(jīng)中樞和血液中含有大量乙酰膽堿酶，快速與其結(jié)合，引起乙酰膽堿蓄積，使膽堿能神經(jīng)持續(xù)沖動(dòng)后死亡。本次研究發(fā)現(xiàn)性腺內(nèi)三唑磷濃度相對(duì)較高，可能由于性腺脂類物質(zhì)含量很高，而且三唑磷是脂溶性很強(qiáng)的物質(zhì)，在乙酸乙酯中溶解度可達(dá)到500000mg/L，所以三唑磷可能通過(guò)血液快速地積蓄在性腺中。

由于我們檢測(cè)魚(yú)體中藥殘傳統(tǒng)方法通常是取其肌肉檢測(cè)，但通過(guò)本文對(duì)因三唑磷急性毒性死亡鯔魚(yú)的研究發(fā)現(xiàn)三唑磷積蓄含量最高的組織主要為腦、血和性腺，其肌肉和魚(yú)皮中含量最低。從實(shí)驗(yàn)結(jié)論可以得出，本研究對(duì)檢測(cè)急性毒性死亡的魚(yú)體中三唑磷含量具有指導(dǎo)意義，對(duì)其他有機(jī)磷引起的污染事故取樣具有參考價(jià)值。