動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)與實(shí)際應(yīng)用

韓雪 郭偉

摘要：近些年我國(guó)動(dòng)物醫(yī)學(xué)、科學(xué)專業(yè)發(fā)展突飛猛進(jìn)，已經(jīng)不再是原來傳統(tǒng)思想中認(rèn)為的鄉(xiāng)村獸醫(yī)，越來越多大學(xué)生及相關(guān)從業(yè)人員選擇動(dòng)物醫(yī)學(xué)、科學(xué)行業(yè)，不斷壯大該學(xué)科的科研隊(duì)伍。而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不僅在動(dòng)物醫(yī)學(xué)、科學(xué)領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用，而且在生物制品、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培養(yǎng)、檢測(cè)有毒物質(zhì)以及醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域也都占有非常重要的位置，相比較植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用范圍更加的廣泛并受到專業(yè)人員的歡迎。

關(guān)鍵詞：動(dòng)物細(xì)胞；培養(yǎng)；應(yīng)用

中圖分類號(hào)：S81

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：2095-9737（2018）06-0020-01

1 細(xì)胞培養(yǎng)概述

實(shí)際生產(chǎn)中所說的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，其實(shí)是指基于體外人工的條件之下，離散的動(dòng)物活細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的過程，而在這個(gè)生長(zhǎng)和增值的過程當(dāng)中細(xì)胞是不會(huì)再繼續(xù)有組織形成的。益處主要是對(duì)于調(diào)控和觀察具有很大的方便，所以應(yīng)用在動(dòng)物物質(zhì)代謝過程、染色體的形態(tài)變化、遺傳物質(zhì)的表達(dá)調(diào)控等相關(guān)難度比較大的科學(xué)領(lǐng)域，屬于便利性和有效性都比較突出的新技術(shù)。但是實(shí)際運(yùn)用時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)還是屬于比較新的學(xué)科，所以在發(fā)展的最初階段應(yīng)該避免將其與動(dòng)物組織培養(yǎng)相混淆，進(jìn)一步的加以區(qū)別和應(yīng)用。

細(xì)胞培養(yǎng)主要是將組織碎塊分離成單個(gè)細(xì)胞的狀態(tài)，實(shí)際采用的是消化酶法。細(xì)胞懸液一般都是用培養(yǎng)基制作，選擇比較適宜的體外條件以保證細(xì)胞可以進(jìn)行生長(zhǎng)和繁殖，并且還能夠?qū)⒁欢ǖ慕Y(jié)構(gòu)和功能特性進(jìn)行相應(yīng)的保留。在生命科學(xué)領(lǐng)域常常會(huì)采取細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)展開相應(yīng)的科學(xué)研究，可以將神經(jīng)體液因素對(duì)肝、腎解毒功能的干擾性消除掉，進(jìn)一步可以針對(duì)性的觀察某些因素或藥物對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞而產(chǎn)生的直接作用。

2 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的要求

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：要求研究人員在實(shí)驗(yàn)之前按類別制定相應(yīng)的操作卡片，而且要求分別在卡片上將此次實(shí)驗(yàn)用器材的名稱、規(guī)格、數(shù)量、操作要領(lǐng)和實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)等逐一的標(biāo)注清楚。

消毒處理：對(duì)于實(shí)驗(yàn)的無菌室都應(yīng)該進(jìn)行相應(yīng)的消毒處理措施，通常是每周1～2次，主要采用乳酸蒸氣或者是過氧乙酸加紫外線進(jìn)行消毒處理。還要將超凈臺(tái)內(nèi)空氣保證凈化的狀態(tài)，并且要求與超凈臺(tái)面構(gòu)成相對(duì)無菌的環(huán)境。

無菌操作：對(duì)于實(shí)驗(yàn)器材的使用應(yīng)該盡量避免直接用手與其進(jìn)行接觸，應(yīng)該盡量用手指對(duì)器械進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的所有操作。不同的細(xì)胞如果在同一個(gè)時(shí)間進(jìn)行操作應(yīng)該保證專管專用，并且做到吸管可以勤換，這樣做的目的是避免污染范圍擴(kuò)大和交叉污染的情況出現(xiàn)。

實(shí)驗(yàn)過程中的操作要求：實(shí)驗(yàn)人員的洗手、著裝要求都與醫(yī)學(xué)中外科臨床的要求一致。實(shí)驗(yàn)過程中研究人員在講話或咳嗽時(shí)應(yīng)該避開操作臺(tái)，否則唾沫會(huì)帶著微生物進(jìn)入超凈臺(tái)內(nèi)從而將空氣加以污染。在實(shí)驗(yàn)操作者離開超凈臺(tái)時(shí)應(yīng)該用肘關(guān)節(jié)將側(cè)窗口關(guān)閉，這樣能夠避免無菌室內(nèi)存在的細(xì)菌隨著空氣的流動(dòng)而進(jìn)入凈化操作區(qū)，造成相應(yīng)的污染。

實(shí)驗(yàn)后的相關(guān)要求：實(shí)驗(yàn)完畢之后要按照相關(guān)規(guī)定關(guān)閉超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)和電源，對(duì)于實(shí)驗(yàn)中沒有使用的器材置于飯盒中，而對(duì)于用過的玻璃器材可以浸泡在清水中，并且將包裝紙呈疊卷的狀態(tài)放置，而將繩成束加以分類歸放。將對(duì)超凈臺(tái)面進(jìn)行相應(yīng)的消毒處理。

3 細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用

生物學(xué)基礎(chǔ)研究。在細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)上，可采用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)研究動(dòng)物的正?；蛘呤遣±砑?xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)發(fā)育狀態(tài)、細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)水平、機(jī)體的代謝以及病變等過程。在遺傳學(xué)研究中，可以將培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞針對(duì)染色體展開相應(yīng)的分析，還可以將細(xì)胞融合技術(shù)與細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)相結(jié)合，從而建立細(xì)胞遺傳學(xué)，可以對(duì)動(dòng)物的遺傳進(jìn)行分析，在動(dòng)物的雜交育種方面也適宜展開相應(yīng)的研究。在胚胎工程中可以體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞，并且進(jìn)行體外受精、胚胎分割和移植，并且在這方面已經(jīng)有了比較成熟的技術(shù)，得以應(yīng)用在家畜的繁殖生產(chǎn)研究工作過程當(dāng)中。

動(dòng)物臨床醫(yī)學(xué)。第一，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在動(dòng)物的遺傳病和先天畸型的產(chǎn)前診斷方面具有比較良好的應(yīng)用。第二，有相關(guān)更加深入的科學(xué)研究，通過對(duì)染色體的對(duì)比分析，可以對(duì)于易患癌癥的病畜加以檢測(cè)，便于及早介入，以更好的進(jìn)行防治，但是目前在生產(chǎn)中很少的應(yīng)用。第三，細(xì)胞培養(yǎng)還可在動(dòng)物的臨床治療中加以應(yīng)用。除此之外還可以在生物大分子制品的相關(guān)領(lǐng)域加以應(yīng)用，而針對(duì)畜禽臨床中常見的某些代謝缺陷疾病具有一定的應(yīng)用價(jià)值。

動(dòng)物育種。細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合、細(xì)胞雜交以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的創(chuàng)建與相互結(jié)合，已經(jīng)在研究領(lǐng)域通過細(xì)胞水平操作并且將動(dòng)物的基因進(jìn)行相應(yīng)的更改，并且進(jìn)行遺傳物質(zhì)的重組。有了這項(xiàng)技術(shù)，就可以按照需要將生物的遺傳組成進(jìn)行不同程度的更改，達(dá)到在實(shí)驗(yàn)室中完成新品種的培育工作，很大程度上將育種的進(jìn)程縮短，增加育種工作的經(jīng)濟(jì)效益。

大分子生物制品。早在20世紀(jì)的60年代就已經(jīng)開始用動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)以生產(chǎn)大分子生物制品，但是伴隨大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的逐漸成熟，以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)不斷的發(fā)展和應(yīng)用研究，在實(shí)際生產(chǎn)過程中，通過利用動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)大分子藥用蛋白比原核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)具有更好的優(yōu)越性。