咽拭子標(biāo)本菌株分離培養(yǎng)鑒定聯(lián)合藥敏試驗(yàn)對(duì)手足口病患兒抗菌藥物合理使用的影響

鄭州大學(xué)附屬洛陽(yáng)中心醫(yī)院（471009）盧超

咽拭子標(biāo)本菌株分離培養(yǎng)鑒定是一種可有效分離培養(yǎng)鑒定細(xì)菌菌株的檢測(cè)手段，常用于臨床細(xì)菌鑒定中。藥敏試驗(yàn)則可有效辨別病原菌對(duì)各種抗菌藥物的耐藥情況，為臨床合理使用抗菌藥物提供信息支持。本研究探究咽拭子標(biāo)本菌株分離培養(yǎng)鑒定聯(lián)合藥敏試驗(yàn)對(duì)手足口病患兒抗菌藥物合理使用的影響。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2016年1月～2017年9月3550例手足口病患兒，其中女1264例，男2286例，年齡6個(gè)月～7歲，平均（3.02±1.29）歲，病程3～10 d，平均（4.72±1.33）d。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2 試劑與儀器 采用法國(guó)生物梅里埃公司生產(chǎn)的頭孢硝酚紙片、藥敏條（ATB HAEMO）、鑒定卡（APINH）、細(xì)菌分析儀（ATB Expression）及溫州市康泰生物科技有限公司生產(chǎn)的嗜血桿菌分離平板、血平板、質(zhì)控菌株HI（ATCC40247）、X因子紙片、V因子紙片、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、V+X因子紙片。

1.3 方法 ①標(biāo)本收集、培養(yǎng)。所有患兒均于入院8h內(nèi)采集咽拭子（采用無(wú)菌拭子）送檢，于血平板、嗜血桿菌分離平板接種標(biāo)本，置入35℃培養(yǎng)箱（含有8% CO2），進(jìn)行孵育（1～2d）。②咽拭子標(biāo)本菌株分離培養(yǎng)鑒定+藥敏試驗(yàn)。于分離平板上將濕潤(rùn)、透明、無(wú)色的小菌落挑選出來(lái)，采取衛(wèi)星試驗(yàn)，衛(wèi)星試驗(yàn)、V+X因子紙片需求試驗(yàn)鑒定流感嗜血桿菌陽(yáng)性與否，后進(jìn)行驗(yàn)證（APINH鑒定卡）。藥敏試驗(yàn)采用ATB HAEMO藥敏條進(jìn)行，讀取結(jié)果時(shí)采用ATB Expression細(xì)菌分析儀，批間試劑質(zhì)量控制采用ATCC40247，最終藥敏結(jié)果判讀采用2010年CLSIM100-S20標(biāo)準(zhǔn)[1]。③β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)：菌株β-內(nèi)酰胺酶采用頭孢硝酚鈉紙片檢測(cè)，試驗(yàn)步驟完全按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，讀取試驗(yàn)結(jié)果。

1.4 觀察指標(biāo) ①咽拭子標(biāo)本菌株分離培養(yǎng)鑒定結(jié)果。②藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 咽拭子標(biāo)本菌株分離培養(yǎng)鑒定結(jié)果3550例檢出流感嗜血桿菌308株，分離率為8.68%，其中β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性株147株，占47.73%。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 經(jīng)藥敏實(shí)驗(yàn)可知，流感嗜血桿菌對(duì)阿莫西林、氧氟沙星、利福平耐藥率、頭孢噻肟耐藥率較低，見(jiàn)附表。

3 討論

本研究采用咽拭子標(biāo)本菌株分離培養(yǎng)鑒定，結(jié)果顯示，3550例手足口病患兒采取咽拭子標(biāo)本分離培養(yǎng)鑒定，檢出流感嗜血桿菌308株?？梢?jiàn)流感嗜血桿菌是手足口病的主要病原菌，其通常于上呼吸道寄居，尤其是兒童口咽部，若免疫力下降或病毒感染發(fā)生可引發(fā)中耳炎、腦膜炎、呼吸道感染等急性化膿性感染。本研究經(jīng)藥敏試驗(yàn)得知，流感嗜血桿菌對(duì)復(fù)方磺胺甲惡唑、氨芐西林、四環(huán)素具有較高耐藥率，可能與細(xì)菌基因突變有關(guān)，臨床在選取上述抗菌藥物治療時(shí)應(yīng)注意[2]。此外，頭孢克洛耐藥率為32.47%，頭孢呋辛耐藥率為25.65%，相對(duì)較高，主要與其屬一線頭孢菌素，臨床應(yīng)用較為廣泛有關(guān)。而頭孢噻肟耐藥率僅為2.60%，其屬于三代頭孢菌素，長(zhǎng)期使用極易導(dǎo)致腸道或呼吸道正常菌群失調(diào)，還可能導(dǎo)致腸桿菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶[3]。此外，本研究顯示，氧氟沙星耐藥率為9.74%，利福平耐藥率為3.57%，耐藥率較低，可能與此類藥物不利于兒童生長(zhǎng)發(fā)育，臨床應(yīng)用較少有關(guān)。

附表 藥敏結(jié)果比較（n=308）

綜上可知，手足口病的主要病原菌為流感嗜血桿菌，了解其在手足口病患兒群體中分離情況、藥敏試驗(yàn)情況，有助于為臨床抗感染治療提供合理參考依據(jù)，還可有效避免經(jīng)驗(yàn)用藥，減少耐藥現(xiàn)象。