楸葉泡桐種子的苯乙醇苷類化學(xué)成分研究

薛 景 ，王英愛(ài) ，賈獻(xiàn)慧，杜成林，唐文照*

（1. 濟(jì)南大學(xué) 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，山東 濟(jì)南 250200；2. 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 藥物研究所國(guó)家衛(wèi)生部生物技術(shù)藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 山東省罕少見(jiàn)病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250062）

玄參科泡桐屬植物楸葉泡桐（P. catalpifolia Gong Tong）為多年生落葉喬木，廣泛分布于中國(guó)各地。其花、葉、樹(shù)皮與果實(shí)作為中草藥在民間用于治療腸炎、扁桃體炎、桃體炎、支氣管炎和痢疾等[1]。泡桐屬植物含苯丙素、黃酮類、萜類、苯乙醇苷類化合物，后者具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化等作用，尤以抗菌活性最為顯著[2]。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)該屬植物中的白花泡桐、蘭考泡桐、毛泡桐有較多的研究，而學(xué)術(shù)界對(duì)楸葉泡桐的研究較少。我們實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)楸葉泡桐果皮的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到一些碳取代香葉基黃酮、三萜與生物堿類化合物[3-5]。經(jīng)HPLC-DAD-MS/MS檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)種子與果皮中的主要成分存在很大差異，在此基礎(chǔ)上，我們繼續(xù)對(duì)楸葉泡桐種子的化學(xué)成分進(jìn)行研究，從其70 %乙醇提取物中分離純化得到7個(gè)苯乙醇苷類化合物，分別鑒定為ilicifolioside A 和isoilicifolioside A混合物（1），isoacteoside（2），plantalloside（3），orobsnchosid（4），darendoside B（5），acteoside（6），tomentoside（7）。其中, 化合物3，4，5為首次從泡桐屬中分離得到, 化合物1，2，6，7為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Bruker AVANCE 600 MHz 核磁共振波譜儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）；Agilent Trap VL 型質(zhì)譜儀；U-3000型紫外光譜測(cè)定儀（日本 Hitachi 公司）；Agilent 1200 series 高效液相分析儀（美國(guó)安捷倫）；高效液相色譜儀（LC-20AB型泵，SPD-20A型紫外檢測(cè)器，LC Solution液相色譜數(shù)據(jù)工作站，日本島津公司）；制備色譜柱 ODS-A（250 mm×20 mm，5 μm，YMC）；分析色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）； 柱層析硅膠，薄層色譜硅膠 GF254（青島海洋化工廠）；Sephadex LH-20（Amersham Biosciences 公司）；ODS 柱色譜填料（50～75 μm，YMC 公司）；制備HPLC所用甲醇（色譜純，美國(guó)TEDIA公司）；其他試劑均為分析純。

1.2 材料

實(shí)驗(yàn)用楸葉泡桐種子采自臨沂市費(fèi)縣山區(qū)，原植物經(jīng)山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所孫敏耀副主任藥師鑒定為玄參科泡桐屬植物楸葉泡桐（P.catalpifoliaGong Tong），樣本（No. 20121018）保存在山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所標(biāo)本室。

2 提取與分離

取干燥的楸葉泡桐種子4.0 kg，用70 %乙醇連續(xù)加熱回流提取3次，每次2 h，合并提取液后減壓濃縮得到乙醇提取物，經(jīng)水混懸的乙醇提取物用乙酸乙酯與正丁醇萃取，得到萃取物。將正丁醇萃取物經(jīng)硅膠柱層析，以二氯甲烷-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，薄層色譜檢測(cè)，合并Rf值相同組分。其中， 二氯甲烷-甲醇 （90:10） 洗脫部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析、ODS柱色譜、Sephadex LH-20柱、HPLC制備得7個(gè)苯乙醇苷類化合物ilicifolioside A和 isoilicifolioside A混合物（1），isoacteoside（2），plantalloside（3），orobsnchosid（4），darendoside B（5），acteoside（6），tomentoside（7）。

3 結(jié)果

3.1 結(jié)構(gòu)鑒定

圖1 部分代表性化合物的結(jié)構(gòu)式

分離得到的7個(gè)化合物都均為無(wú)定型粉末，用10 % HCl進(jìn)行酸水解，薄層色譜顯示葡萄糖與鼠李糖的存在。它們具有相似的核磁共振圖譜，均含苯乙醇苷元、咖啡?；ɑ衔?除外）、葡萄糖基與鼠李糖基，經(jīng)結(jié)構(gòu)解析，均為苯乙醇苷類化合物，部分代表性化合物的結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1。

化合物1：淡黃色無(wú)定形粉末，分子式為C31H40O16，mp124～128 ℃，該化合物的TLC用1%FeCl3乙醇溶液噴灑，顯黑綠色。ESI-MSm/z：691.0[M+Na]+, 相對(duì)分子質(zhì)量為668；IR（KBr）vmax（cm-1）：3400, 1705, 1695, 1620, 1605 cm-1;UV λmax（MeOH）（nm）：220, 234, 290, 327；核磁數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1與表2）與文獻(xiàn)[6]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物1為isoilicifolioside A。

化合物2：黃色粉末，分子式為C29H36O15，mp 132～135 ℃，F(xiàn)eCl3檢測(cè)呈黑褐色。ESI-MSm/z：647.1[M+Na]+, 相對(duì)分子質(zhì)量624；核磁數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1與表2）與文獻(xiàn)[7]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物2為isoacteoside。

化合物3：黃色粉末，分子式為C29H34O15，酸水解檢出葡萄糖和鼠李糖；ESI-MSm/z：645.1[M+Na]+，相對(duì)分子質(zhì)量為622；核磁數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1與表2）與文獻(xiàn)[8]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物3為plantalloside。

化合物4：黃色粉末，分子式為C29H34O15。ESI-MSm/z：645.0[M+Na]+, 相對(duì)分子質(zhì)量為622；核磁數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1與表2）與文獻(xiàn)[8]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物4為orobanchoside。

表1 化合物1～7的1H-NMR 數(shù)據(jù)（600 MHz，氘代甲醇）

表2 化合物1-7的13C-NMR 數(shù)據(jù)（150 MHz，氘代甲醇）

化合物5：白色粉末，分子式為C21H32O12。ESI-MS：m/z477.1[M+H]+；相對(duì)分子質(zhì)量為476。核磁數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1與表2）與文獻(xiàn)[9]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物5為darendoside B.

化合物6：黃色粉末，分子式為C29H36O15，mp 135～138 ℃。ESI-MS：m/z625.0 [M+H]+，647.1[M+Na]+，相對(duì)分子質(zhì)量為624。UV（MeOH）：λmax326, 289 nm。IR（KBr）vmax（cm-1）：3384, 2855, 2925, 1717, 1635, 1521, 1385;核磁數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1與表2）與文獻(xiàn)[7]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物6為acteoside.

化合物7：黃色粉末，分子式為C30H38O16，mp 144-148℃。ESI-MSm/z: 655.2 [M+H]+, 相對(duì)分子質(zhì)量為654；UV λmax: 208, 220, 290, 330 nm；IRvmaxcm-1: 3400, 1700,1610, 1520, 1450, 1280, 1160,1040; 核磁數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1與表2）與文獻(xiàn)[10]報(bào)道對(duì)照基本一致, 故鑒定化合物7為tomentoside。

4 討論

泡桐屬植物所含的化學(xué)成分包括三萜類、苯乙醇苷類、碳取代香葉基二氫黃酮類化合物等，課題組前期研究發(fā)現(xiàn)楸葉泡桐果中含有大量的黃酮類化合物，繼續(xù)研究得到了前兩種成分，但種類較少，遠(yuǎn)低于黃酮類化合物。楸葉泡桐的種子包含在果皮中，其所含有的化學(xué)成分未見(jiàn)研究報(bào)道。文獻(xiàn)報(bào)道苯乙醇苷類化合物在泡桐屬植物中多存在于木材與樹(shù)皮中，本項(xiàng)研究豐富了該類化合物的植物來(lái)源，也為該植物資源的開(kāi)發(fā)利用提供了科研依據(jù)。