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    紅景天苷對慢性間斷性缺氧心肌炎癥反應(yīng)的作用及其機(jī)制

    2018-10-15 06:21:12付金容黎明江
    關(guān)鍵詞:紅景天心血管心功能

    付金容 楊 靖 黎明江

    (武漢大學(xué)人民醫(yī)院心內(nèi)三科/心血管病湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 武漢 430060)

    阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(Obstructive sleep apnea,OSA)是一種常見的呼吸系統(tǒng)疾病,主要由完全或部分咽部阻塞引起的以反復(fù)呼吸停止為特征,這種紊亂通常伴隨著缺氧、睡眠覺醒和血流動(dòng)力學(xué)變化.這些條件的持續(xù)復(fù)發(fā)可能導(dǎo)致各種有害影響,從而導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生一系列病理生理性的改變[1].OSA與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),它與腦血管疾病亦密切相關(guān),并可引起多器官損傷[2].研究顯示,慢性間斷性缺氧(chronic intermittent hypoxia, CIH)是OSA導(dǎo)致心血管疾病的主要機(jī)制[3].CIH在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用.OSA亦是一種慢性炎癥性疾病[4],研究證實(shí)炎癥反應(yīng)在CIH所致心血管疾病中起著重要作用.紅景天苷具有抗輻射、抗疲勞、抗缺氧、抗衰老等多種功效[5],常用于高山癥,保護(hù)紅細(xì)胞免受氧化應(yīng)激和提高抵抗力.研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn),紅景天苷能夠抑制缺血再灌下心肌細(xì)胞的炎癥反應(yīng)[6],能夠減少缺血再灌注心肌損傷.本文探討了紅景天苷對慢性間斷性缺氧心肌細(xì)胞的炎癥反應(yīng)的作用及其機(jī)制.

    1 材料與方法

    1.1 大鼠間斷性缺氧模型的制備及分組

    SD大鼠(與文獻(xiàn)[7]的研究同標(biāo)準(zhǔn)).將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為以下幾組:①正常對照組(n=10):21% O2,每天24 h,8周;②NaCl組(CIH+ NaCl,n=10):每天8 h一循環(huán),低氧:7% O260 s,20% O260 s,持續(xù)8周,分別于每周一、周五腹腔注射生理鹽水10 mL/kg/次)一次.③紅景天苷組(CIH+紅景天苷,n=10):慢性間斷性低氧8周,間隔(時(shí)間同NaCl組)腹腔注射紅景天苷(20 mg/kg/次)溶液.

    1.2 大鼠心腔大小、心功能的測定

    分別于實(shí)驗(yàn)開始、實(shí)驗(yàn)8周時(shí),超聲多普勒檢測大鼠心功能包括左室射血分?jǐn)?shù)(EF)和短軸縮短率(FS),以及大鼠心臟的各腔室內(nèi)徑(LAD、RAD、LVD、RVD、左心室舒張末容積(EDV)和左心室收縮末容積(ESV),具體方法參照之前的研究[7].

    1.3 檢測大鼠缺氧心肌組織髓過氧化物酶的活性(Myeloperoxidase,MPO)

    分離出大鼠心臟的左心室游離壁,冰上碾碎,迅速于4℃下勻漿離心,然后提取出上清液,根據(jù)髓過氧化物酶活性檢測試劑盒的說明(試劑盒購自南京市建成生物工程研究所),測量大鼠心肌組織MPO的活性.

    1.4 血清及心肌組織TNF-α及IL-6濃度測定

    取大鼠靜脈2 mL,在4℃環(huán)境下離心5 min,然后提取上層的血清,將血清保存在-70℃的冰箱中.最后根據(jù)說明,采用放射免疫法分析大鼠外周血清中TNF-α及IL-2的含量(試劑盒購自北京市科美生物化學(xué)公司).

    1.5 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    2 結(jié) 果

    2.1 紅景天苷改善慢性間斷性缺氧中大鼠的心功能

    慢性間斷性缺氧8周后,大鼠心功能均較正常大鼠下降.但與NaCl組比較,紅景天干預(yù)組大鼠的心功能明顯改善(見表1).

    表1 紅景天苷影響慢性間斷性缺氧大鼠的心功能

    與正常對照組比較,NaCl組與紅景天苷組*P<0.05;與NaCl組比較,紅景天苷干預(yù)組**P<0.05

    2.2 紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠心肌MPO的影響

    慢性間斷性缺氧8周后,大鼠心肌組織MPO活力增加.與NaCl組比較,紅景天干預(yù)組大鼠的心肌組織MPO活力顯著降低(如圖1所示).

    圖1 紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠心肌組織MPO活力的影響

    與正常對照組比較,NaCl組與紅景天苷組*P<0.05,與NaCl組比較,紅景天苷干預(yù)組**P<0.05.

    2.3 紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠TNF-a的影響

    實(shí)驗(yàn)8周后,檢測結(jié)果顯示大鼠血清及心肌組織TNF-a水平均增加.與NaCl組比較,紅景天苷干預(yù)組大鼠的血清及心肌組織TNF-a水平均顯著降低(如圖2,圖3所示)

    圖2 紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠血清TNF-a水平的影響

    與正常對照組比較,NaCl組與紅景天苷組*P<0.05,與NaCl組比較,紅景天苷干預(yù)組**P<0.05

    圖3 紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠心肌組織TNF-a水平的影響

    與正常對照組比較,NaCl組與紅景天苷組*P<0.05,與NaCl組比較,紅景天苷干預(yù)組**P<0.05

    2.4 紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠IL-6的影響

    慢性間斷性缺氧8周后,大鼠血清IL-6水平增加.與NaCl組比較,紅景天干預(yù)組大鼠的血清IL-6水平均顯著降低(如圖4所示).

    圖4 紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠血清IL-6水平的影響

    與正常對照組比較,NaCl組與紅景天苷組*P<0.05,與NaCl組比較,紅景天苷干預(yù)組**P<0.05

    3 討 論

    阻塞性睡眠呼吸暫停(OSA)是發(fā)病率非常高的一類疾病,嚴(yán)重威脅著公眾健康.它增加了心血管疾病的發(fā)病率及死亡率[7].目前OSA致心血管疾病發(fā)生發(fā)展的機(jī)制仍未完全清楚,它包含許多病理生理觸發(fā)機(jī)制,如睡眠的不完整、胸腔內(nèi)壓力的增加以及慢性間斷性缺氧(CIH)等[7],但研究顯示OSA導(dǎo)致心血管疾病的主要機(jī)制是慢性間斷性缺氧(CIH),即慢性間歇性的缺氧復(fù)氧.CIH在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用.CIH通過交感神經(jīng)系統(tǒng)的過度興奮,系統(tǒng)炎性反應(yīng),氧化應(yīng)激等導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)、心肌細(xì)胞凋亡[8]、左心功能障礙[9]等.

    前期研究,已經(jīng)成功建立大鼠慢性間斷性缺氧模型[10].通過這次實(shí)驗(yàn),證實(shí)了紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠心臟的保護(hù)作用,得出以下結(jié)論:1)慢性間斷性缺氧導(dǎo)致大鼠心功能下降,紅景天苷干預(yù)則可改善心功能.2)慢性間斷性缺氧可導(dǎo)致大鼠全身及心肌組織的炎癥反應(yīng),而紅景天苷則對這這種炎癥反應(yīng)起到一定的抑制作用.這種抑制作用,可能是通過抑制炎性因子的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的.3)紅景天苷對慢性間斷性缺氧大鼠的心肌保護(hù)作用,可能部分通過減輕其炎癥反應(yīng)而實(shí)現(xiàn).

    TNF-a是機(jī)體在受到刺激后產(chǎn)生最早,產(chǎn)生速度最快的炎性介質(zhì),它在機(jī)體的各種炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用[7].同時(shí),TNF-a還可促進(jìn)IL-1、IL-6等其他炎性介質(zhì)的表達(dá),促進(jìn)其生物學(xué)效應(yīng),擴(kuò)大炎性反應(yīng)[11].IL-6是重要的炎癥前因子,它通過調(diào)節(jié)體液免疫和細(xì)胞免疫影響炎癥反應(yīng),導(dǎo)致組織損傷.髓過氧化物酶(MPO)是一種炎癥反應(yīng)物,它由巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等分泌,在機(jī)體的炎癥反應(yīng)中,髓過氧化物酶通過催化反應(yīng),引起機(jī)體的氧化應(yīng)激,從而導(dǎo)致氧化性組織損傷.

    實(shí)驗(yàn)中,觀察到隨著缺氧時(shí)間的延長,大鼠心肌組織及血液中,TNF-a水平增高.至缺氧8時(shí),NaCl組TNF-a水平已明顯高于正常對照組.同時(shí),缺氧大鼠心肌組織MPO表達(dá)水平,缺氧大鼠血清IL-6水平,均顯著高于正常對照組.與正常對照組比較,慢性間斷性缺氧大鼠心功能顯著下降.慢性間斷性缺氧中,隨著缺氧心肌炎癥反應(yīng)的加重,缺氧大鼠心功能逐漸下降.由此可見,缺氧大鼠的心肌損傷可能與炎癥反應(yīng)有關(guān)此相關(guān).

    紅景天苷是一種天然酚類代謝物,具有多種功效,研究顯示,紅景天苷具有調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)、保護(hù)心臟、預(yù)防輻射、抗炎等多種作用.研究已經(jīng)證實(shí),紅景天苷對各種環(huán)境下的缺氧心肌細(xì)胞均具有保護(hù)作用.紅景天苷具有廣泛的抗炎作用.在大鼠局灶性腦缺血模型中,紅景天苷抑制pi 3k/akt/hif的信號(hào)表達(dá)等,從而減少局灶性缺血腦組織的炎癥反應(yīng)[12].紅景天苷還可降低改善高海拔下心肌血流,保護(hù)缺血缺氧心肌[13].

    實(shí)驗(yàn)中,紅景天苷干預(yù)組,大鼠心肌局部及全身炎性反應(yīng)均顯著低于實(shí)驗(yàn)組,同時(shí)大鼠的心功能較NaCl組大鼠也有明顯改善.由此提示,紅景天苷抑制了缺氧心肌的炎癥反應(yīng),保護(hù)慢性間斷性缺氧心肌,改善了慢性間斷性缺氧大鼠的心功能.當(dāng)然,紅景天苷對于慢性間斷性缺氧大鼠心臟的保護(hù)作用,可能還有更多的機(jī)制有待研究,紅景天苷對于其炎癥反應(yīng)的抑制作用機(jī)制亦有待于更加深入的研究.

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