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    高溫環(huán)境對川芎揮發(fā)油化學(xué)成分的影響研究

    2018-10-15 10:30:50
    中國民族民間醫(yī)藥 2018年17期
    關(guān)鍵詞:萜類川芎揮發(fā)油

    成都中醫(yī)藥大學(xué),四川 成都 611137

    川芎為傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖,具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功效[1]。藥理實驗表明川芎揮發(fā)油具有鎮(zhèn)靜止痛、擴張血管、改善心肌供氧、保護神經(jīng)細胞、防血栓形成等藥理作用[2],還具有腦神經(jīng)保護[3]、抗氧化活性[4]等作用。川芎揮發(fā)油是川芎的主要有效成分,是其活血化瘀、行氣止痛的主要有效成分之一,具有很大的開發(fā)利用價值?!吧庾呶丁笔侵负袚]發(fā)性成分的藥材在貯藏過程中氣味發(fā)生改變或減弱的現(xiàn)象。貯藏溫度過高會引起藥材散氣走味,散氣走味會導(dǎo)致藥材有效成分揮散而不斷減少[5]。藁本內(nèi)酯為川芎揮發(fā)油的主要成分[6],在貯藏過程中呈現(xiàn)下降的趨勢,貯藏的溫度是影響的最大因素[7]。蔣桂華等[8]在不同貯藏時間對川芎有效成分進行了研究,隨著貯藏時間的延長,揮發(fā)油的含量呈下降趨勢,貯藏3年后的川芎揮發(fā)油含量已下降至貯藏前的1/4~1/3。川芎藥材在貯藏過程中極易“散氣走味”,因此對川芎揮發(fā)油穩(wěn)定性的研究極為重要。本研究根據(jù)《中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》,通過高溫影響因素試驗,采用GC-MS聯(lián)合法分析川芎在40 ℃環(huán)境下?lián)]發(fā)油成分的變化,找出川芎貯藏過程中“散氣走味”的物質(zhì)基礎(chǔ)。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器 Agilent Technologies 7890A GC System,Agilent Technologies 5975C inert MSD with Triple-Axis Detector;智能型恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上?,槴\實驗設(shè)備有限公司),BP121S十萬分之一電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)。

    1.2 材料 川芎產(chǎn)自四川省都江堰市石羊鎮(zhèn)金花村3組,經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)盧先明教授鑒定為傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖。樣品貯藏于成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥標(biāo)本館。水為樂百氏純凈水,正己烷(色譜純),無水硫酸鈉。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 供試品制備 稱取川芎粉末(過二號篩)50 g,參照2015年版中國藥典(四部)附錄乙法水蒸氣蒸餾提取,提取揮發(fā)油,所得的產(chǎn)物為淡黃色油狀物,按每0.1 mL揮發(fā)油加入10 mL正己烷,置棕色瓶中,無水硫酸鈉除水,0.22 μm微孔濾膜濾過,做為供試品溶液。

    2.2 GC-MS分析條件 色譜條件:Agilent HP-5MS毛細管柱(30 m×250 μm×0.25 μm),質(zhì)譜檢測器。載氣:氦氣;流速:1.0 mL/min;程序升溫:初始60 ℃,每分鐘5 ℃升至120 ℃,每分鐘10 ℃升至280 ℃。分流進樣,10∶1分流,進樣量1 μL;進樣口溫度230 ℃。

    質(zhì)譜條件:EI離子源,全掃描方式。質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)庫:NIST 14.L。

    2.3 結(jié)果 川芎揮發(fā)油經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析,得總離子流圖,如圖1~3所示。經(jīng)NIST2014自動檢索,確定各色譜峰所代表的化學(xué)成分,結(jié)果見表1。

    表1 川芎揮發(fā)油GC-MS鑒定化合物及相對含量

    序號相對分子質(zhì)量分子式化合物名稱 相對含量/% 0d5d10d1136.23C10H16檜烯0.050.58-2134.22C10H14鄰異丙基甲苯0.020.19-3136.23C10H16蒎烯0.05--4136.23C10H16萜品油烯0.060.890.035136.23C10H16左旋-α-蒎烯-0.10-6136.23C10H16y-Limonene0.117136.23C10H16β-蒎烯-0.08-8136.23C10H16α-萜品烯-0.19-9136.23C10H16萜品烯-0.900.0210136.23C10H161,5,5-Trimethyl-6-methylenecyclohexene-0.320.0311184.36C13H28正十三烷-0.03-12150.14C11H185-Pentylcyclohexa-1,3-diene0.11-0.0713154.25C10H18O(-)-4-萜品醇0.320.930.1814150.17C9H10O2對乙烯基愈瘡木酚0.800.840.4315204.19C15H24Elemene isomer--0.2516162.23C11H14O苯戊酮0.080.090.0517138.25C10H18Cyclodecene-0.06-18204.19C15H243,5,5,9-Tetramethyl-4a,5,6,7,8,9-hexahydro-2H-benzo[7]annulene0.48--19204.19C15H242-Isopropenyl-4a,8-dimethyl-1,2,3,4,4a,5,6,7-octahydronaphthalene-0.11-20204.19C15H24β-古巴烯-0.05-21204.35C15H241-methyl-2,4-di(prop-1-en-2-yl)-1-vinylcyclohexane-0.26-

    續(xù)表

    表1 川芎揮發(fā)油GC-MS鑒定化合物及相對含量

    3 結(jié)果與討論

    運用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析鑒定川芎揮發(fā)油化學(xué)成分:0 d 29個化合物,5 d 37個化合物,10 d 29個化合物,分別占總峰面積的95.23%、94.25%、96.33%。第0天烯萜類成分約占川芎總揮發(fā)油的4.88%,苯酞類約占川芎總揮發(fā)油的90.11%,第5天烯萜類成分約占川芎總揮發(fā)油的13.09%,苯酞類約占川芎總揮發(fā)油的84.11%,第10天烯萜類成分約占川芎總揮發(fā)油的3.77%,苯酞類約占川芎總揮發(fā)油的92.27%。其中烯萜類成分的變化有:相對于0天,第5天檢測到新的成分左旋-α-蒎烯(0.10%)、y-Limonene(0.11%)、β-蒎烯(0.08%)、α-萜品烯(0.19%)、萜品烯(0.90%)、Cyclodecene(0.06%) 、β-古巴烯(0.05%)、(-)-g-Elemene(0.24%)。相對于0天,第10天檢測到Elemene isomer(0.25%)、cis-.beta.-Farnesene(0.09%) 、Bicyclogermacren(0.54%)、(-)-藍桉醇(0.05%)等。第10天相對于第0天,檜烯、鄰異丙基甲苯、蒎烯、Germacrene B、(E)-β-金合歡烯、桉油烯醇等成分消失。第10天相對于第5天新出現(xiàn)的成分,其中左旋-α-蒎烯、y-Limonene、β-蒎烯、α-萜品烯、正十三烷、Cyclodecene、β-古巴烯等第10天未檢測到。苯酞類成分的變化有:相對于0天,第5天檢測到Z-Ligustilide。脂肪酸類成分的變化有:相對于0天,第5、10天都未檢測到亞油酸,都檢測到亞油酸乙酯、9,12-Octadecadienoicacid,methyl ester等成分。

    實驗結(jié)果表明,烯萜類成分在高溫環(huán)境下變化最為明顯,種類先增加,后減少。苯酞類成分中的Ligustilide在第5天出現(xiàn)結(jié)構(gòu)的變化。亞油酸在高溫環(huán)境下生成了酯類,變化較大。由此可見,高溫能引起川芎烯萜類、苯酞類和脂肪酸類成分的變化,隨著高溫時間越長,變化越大。由此可見高溫會引起川芎揮發(fā)油化學(xué)成分變化,推測出川芎在貯藏過程中發(fā)生“散氣走味”的物質(zhì)基礎(chǔ)與烯萜類、苯酞類和脂肪酸類成分變化都有關(guān)系。

    結(jié)合文獻資料,川芎貯藏溫度越低越好,相對濕度60%[9]以下、陰涼干燥的環(huán)境下貯藏[7],可有效防止川芎有效成分的變化;而川芎飲片適宜則應(yīng)遮光、密封、真空、冷處貯藏,且儲藏時間不宜過久[10]?!吨腥A本草》載,川芎以“油性大、香氣濃者為佳”[11];現(xiàn)代藥理學(xué)研究也認(rèn)為川芎揮發(fā)油是川芎的重要藥效部位。揮發(fā)油在川芎藥材中含量極高,具有很大藥用價值。當(dāng)前有關(guān)川芎活性成分的實驗研究尚不足以建立完善的川芎質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn),因而需要對川芎揮發(fā)油穩(wěn)定性進行深入研究,找到川芎適宜貯藏條件。

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