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    應(yīng)用超純水代替蒸餾水配制綿羊精液葡卵檸稀釋液的試驗

    2018-10-13 05:25:42連曉春蔣烈戈
    草食家畜 2018年5期
    關(guān)鍵詞:超純水受胎率稀釋液

    連曉春,蔣烈戈

    (1.新疆兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)工作總站,新疆 烏魯木齊 830000;2.新疆兵團(tuán)第九師畜牧科學(xué)研究所,新疆 額敏 834601)

    超純水是應(yīng)用預(yù)處理、電滲析、紫外線殺菌、反滲透、離子交換、超濾和各種膜過濾等技術(shù),將水中的導(dǎo)電介質(zhì)幾乎完全去除,同時將水中不離解的膠體物質(zhì)、氣體及有機物均去除至很低程度的水。超純水的電阻率大于18 MΩ.cm,這種水中除了水分子(H2O)外,幾乎沒有什么雜質(zhì)。隨著超純水生產(chǎn)技術(shù)的提高,它被應(yīng)用到電子、實驗室、食品、等領(lǐng)域。蒸餾水是指用蒸餾方法制備的純水,可分一次和多次蒸餾水,通過蒸餾,一次蒸餾可將不揮發(fā)的礦物質(zhì)鹽類除去。我們在配制綿羊人工授精稀釋液時運用一次蒸餾水,利用的就是蒸餾水無電解質(zhì),無游離離子。目前的蒸餾水機多為在環(huán)型冷卻管結(jié)構(gòu),靠水流量冷卻,大都存在結(jié)構(gòu)落后、浪費水資源、能耗高(4~20 KW)、生產(chǎn)效率低(5~20 L/H)、手動,需專人看管,易干燒,易結(jié)垢,難清洗,運行成本高,易中斷使用等缺陷,而超純水機隨用隨取,造水及時,生產(chǎn)時一鍵式操作,全自動制水,安全、可靠,無需專人值守,出水率高(1~100 L/H),超純水機的功率在50~200 W,能耗大大降低,超純水機還具有自動清洗功能,便于維護(hù),運行成本低。針對當(dāng)今社會提倡環(huán)保、節(jié)能、減排的基礎(chǔ)上,提倡使用超純水替代蒸餾水。

    傳統(tǒng)綿羊精液葡卵檸稀釋液用蒸餾水制作,基層綿羊配種站在配制葡卵檸稀釋液時,蒸餾水多在上級單位購買,而目前縣級以上家畜品種改良站多已配備了超純水機,蒸餾水的使用量越來越少,蒸餾水機已逐步淘汰。通過查閱相關(guān)文獻(xiàn),在家禽中的雞[1]、家畜中的豬[2]、牛[3]等畜禽均使用傳統(tǒng)的稀釋液,劉威、孫計富在羊的人工授精技術(shù)研究進(jìn)展中提出,要繼續(xù)積極推廣改進(jìn)人工授精操作技術(shù)[4],應(yīng)開展稀釋液改良方面的研究。也有人使用注射用水[5],基本沒有大的差異。因此本次實驗旨在探討應(yīng)用超純水替代蒸餾水制作綿羊精液葡卵檸稀釋液,以簡化稀釋液配制程序,加快綿羊品種改良推廣工作進(jìn)程。

    1 材料與方法

    1.1 試驗時間與地點

    本次實驗于2016年11月10日-12月5日在新疆兵團(tuán)第九師161團(tuán)育種站進(jìn)行,試驗?zāi)秆驗轶w重45~50 kg的成年經(jīng)產(chǎn)母羊,2017年4月1日-5月10日統(tǒng)計產(chǎn)羔結(jié)果。

    1.2 試驗器材

    1.2.1 超純水

    采用美國熱電公司BARNSTEAD TⅡ型超純水機制作,它通過反滲透單元將自來水轉(zhuǎn)化為RO純水的水質(zhì),接近于國標(biāo)實驗室三級用水標(biāo)準(zhǔn)與一次蒸餾水,故沖洗器皿等一般實驗室分析用水均可使用。

    1.2.2 蒸餾水

    采用蘇州江東精密儀器YAZD-5型蒸餾水機制作,功率4.5 KW,每小時出水量5 L。

    1.2.3 稀釋液的配制

    用分析天平(精度0.001 g)稱取葡萄糖3.0 g,檸檬梭鈉1.4 g,用量桶量取蒸餾水或超純水100 mL,卵黃20 mL,按葡萄糖-卵黃-檸檬梭鈉稀釋液配制要求,進(jìn)行配制。

    1.3 試驗設(shè)計

    1.3.1 精液采集

    采用161團(tuán)育種站飼養(yǎng)的德國美利奴、薩??朔N公羊進(jìn)行采精,種公羊要求:體質(zhì)外貌達(dá)到品種要求,達(dá)到中等以上種用體況,并有旺盛的性欲,精液品質(zhì)優(yōu)良。將采取的精液在300-600倍的顯微鏡下進(jìn)行鏡檢,外觀正常、密度中等以上、活力在0.8以上的精液方可進(jìn)行稀釋處理。

    綜上所述,建筑工程管理專業(yè)教育是向社會輸送高素質(zhì)建筑管理人才的重要渠道,近些年來,建筑行業(yè)的迅猛發(fā)展帶動了我國建筑工程管理專業(yè)的發(fā)展,同時也使得其中存在的一些問題逐漸突顯出來。對此,我國各高校應(yīng)該積極吸收國外辦學(xué)經(jīng)驗,結(jié)合自身優(yōu)勢做好專業(yè)建設(shè),為我國建筑行業(yè)發(fā)展提供更強的推動力。

    1.3.2 精液稀釋

    將收集的精液一分為二,按精液稀釋要求,分別用蒸餾水與超純水制作的稀釋液進(jìn)行2倍稀釋。

    1.3.3 密度檢查

    稀釋后用紅細(xì)胞計數(shù)法對精液進(jìn)行密度檢查,計算單位輸精量(0.1 mL)內(nèi)的有效精子數(shù),鏡檢合格的稀釋精液每份留下0.5 mL左右,其余的送去輸精,間隔2 h、4 h,再次對置于常溫環(huán)境(25℃左右)下稀釋精液進(jìn)行密度檢查。

    1.3.4 輸精

    按綿羊人工授精程序,對輸精用具消毒后,進(jìn)行輸精,輸精部位:子宮頸內(nèi)0.5~1.0 cm處,輸精量0.1 mL,輸完精后對精液進(jìn)行回檢;間隔8~10 h進(jìn)行第二次輸精。

    輸精時,對母羊進(jìn)行標(biāo)記,記錄。

    1.4 測定指標(biāo)與方法

    1.4.1 精子密度

    用血細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行。先用紅細(xì)胞稀釋管吸取稀釋精液到0.5刻度處,用紗布擦去吸管頭沾附的精液,再吸取3%的氯化鈉溶液到刻度101處,用拇指和中指按住吸管的兩端,搖勻,使氯化鈉溶液與稀釋精液充分混勻,這樣將稀釋精液再次稀釋到200倍,吹掉管內(nèi)最初的幾滴液體,然后將吸管尖放在計算板中部的邊緣處,輕輕滴入一小滴,讓其自然流入計算室內(nèi),這時在600倍顯微鏡下計算精子,計數(shù)5大方格精子總數(shù)乘以1千萬即為稀釋后1 mL稀釋精液的精子數(shù)[6]。每個樣本,至少要重復(fù)檢查兩次,取其平均值,若兩次結(jié)果偏差在10%以上,則需做第三次,取第三次結(jié)果與前兩次中與第三次結(jié)果相近的一次的平均值,作為最后結(jié)果。

    1.4.2 返情率

    發(fā)情配種后,間隔17~18 d,統(tǒng)計已配羊只的返情情況,計算試驗組與對照組的返情率[7]。返情率%=已配母羊返情羊只數(shù)/參配母羊數(shù)×100%。

    1.4.3 受胎率

    間隔145~155 d,統(tǒng)計試驗組與對照組綿羊產(chǎn)羔情況,計算受胎率[8]。其中產(chǎn)羔母羊數(shù)包括流產(chǎn)母羊數(shù)。

    1.5 數(shù)據(jù)處理

    以稀釋后0、2、4 h的精液密度、第一情期受胎率、受胎率參數(shù)為檢驗對象,進(jìn)行差異顯著性檢驗。

    2 試驗結(jié)果與分析

    2.1 精子密度

    稀釋工作完成后,分稀釋后、2 h、4 h用血細(xì)胞計數(shù)法統(tǒng)計精液中的精子數(shù),精液稀釋2 h內(nèi)后,通過顯著性檢驗(P<0.05),試驗處理對結(jié)果沒有影響或無效,蒸餾水組與超純水組之間沒有較為明顯的差異,均能達(dá)到綿羊人工授精精子數(shù)要求。由于配種工作在新疆兵團(tuán)第九師161團(tuán)冬牧場進(jìn)行,在11月份,這里外界氣溫已達(dá)零下15℃左右,因此室內(nèi)溫度也極難控制,稀釋后4 h,此時精子數(shù)量也明顯降低,這與精液品質(zhì)、稀釋液無關(guān),此時兩種稀釋液稀釋出的精子數(shù)也沒有大的差異,見表1。

    表1 精子密度億

    2.2 返情率

    與配母羊標(biāo)記后,同群放牧,間隔18 d后,統(tǒng)計返情羊數(shù),再次進(jìn)行人工授精,蒸餾水組與超純水組返情羊數(shù)分別只數(shù)為48只、46只,占總試驗羊數(shù)的16.8%、17.2%,二者沒有明顯的差異,見表2。

    表2 返情率統(tǒng)計只、%

    2.3 受胎率

    2015年4月1日至5月15日,登記標(biāo)記母羊產(chǎn)羔情況,蒸餾水組產(chǎn)羔母羊數(shù)265只,超純水組產(chǎn)羔母羊數(shù)249只(二者均包括流產(chǎn)母羊),母羊總受胎率達(dá)到了93%、93.3%,二者之間沒有大的差異,見表3。

    表3 受胎率統(tǒng)計表只、%

    3 討 論

    稀釋前后的精液密度用紅細(xì)胞計數(shù)法計算,最小相差0.02億,為總數(shù)的0.28%,最大相差0.23億,在稀釋后、稀釋后2 h、稀釋后4 h,這幾個階段來看,無較大的偏差。

    綿羊的鮮精人工授精技術(shù)由多個因素影響[9,10],在基層,最容易觀測、使用的方法是對綿羊返情率和受胎率的記錄[11],這種方法操作簡單。使用超純水代替蒸餾水配置綿羊人工授精稀釋液,通過我們記錄的552只母羊的對比,超純水組返情率17.2%,傳統(tǒng)蒸餾水組16.8%,二者相差0.04%,超純水組母羊總受胎率達(dá)到了93.3%、傳統(tǒng)蒸餾水組93%,這兩個指標(biāo)之間均沒有大的差異,對綿羊總體受胎率沒有影響。

    4 結(jié) 論

    影響綿羊人工授精稀釋液品質(zhì)的因素很多,使用蒸餾水,主要因素是考慮稀釋液與精液為等滲溶液,低滲溶液或高滲溶液都會因滲透壓的緣故造成精子死亡,超純水與蒸餾水相比,均為無電解質(zhì),無游離離子,故均能達(dá)到稀釋液配制要求。使用超純水相比蒸餾水而言,具有隨用隨取,造水及時,生產(chǎn)時一鍵式操作,全自動制水,安全、可靠,無需專人值守,出水率高(10~100 L/H),能耗低,可自動清洗,便于維護(hù),運行成本低的特點,因此使用超純水制作綿羊人工授精精液稀釋液,可簡化稀釋液配制程序,加快綿羊品種改良推廣工作進(jìn)程,值得推廣。

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