HPLC法測定化淤生骨膠囊中人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量

代恩松 田相靜

摘 要：目的 建立化淤生骨膠囊中人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量測定方法。方法 采用高效液相色譜法（HPLC）測定。色譜柱為Kromasil-C18（5 μm、4.6 mm×250 mm），乙腈-水為流動相進行梯度洗脫，檢測波長203 nm。結果 人參皂苷Rg1濃度在0.0522 mg/ml～0.8220 mg/ml范圍內與峰面積的線性關系良好（γ=0.9994）； 人參皂苷Rb1濃度在0.0583 mg/ml～07830 mg/ml范圍內與峰面積的線性關系良好（γ=0.9990）。結論 所建方法準確，重復性好，可用于測定化淤生骨膠囊中的人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1。

關鍵詞：化淤生骨膠囊；人參皂苷；HPLC；含量測定

中圖分類號：R286 文獻標識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.15.022

文章編號：1006-1959（2018）15-0072-04

Determination of Ginsenoside Rg1 and Ginsenoside Rb1 in Huayu Sheng Gu Capsule by HPLC

DAI En-song1，TIAN Xiang-jing2

（Department of Drug Dispensing1，Department of Pediatrics2，Qilu Hospital，Shandong University，Jinan 250012，Shandong，China）

Abstract：Objective To establish a method for the determination of ginsenoside Rg1 and ginsenoside Rb1 in Huayu Shenggu Capsule.Methods High performance liquid chromatography（HPLC）was used.The column was Kromasil-C18（5μm，4.6 mm×250mm）， and the gradient was eluted with acetonitrile-water as the mobile phase.The detection wavelength was 203 nm.Results The linear relationship between the concentration of ginsenoside Rg1 and the peak area in the range of 0.0522mg/ml to 0.8220mg/ml was good （γ=0.9994）；The linear relationship between the concentration of ginsenoside Rb1 and the peak area was in the range of 0.0583mg/ml to 07830 mg/ml（γ=0.9990）.Conclusion The method is accurate and reproducible.It can be used to determine ginsenoside Rg1 and ginsenoside Rb1 in Huayu Shenggu capsule.

Key words：Huayu Shenggu capsule；Ginsenoside；HPLC；Determination

化淤生骨膠囊由三七、延胡索等7種中藥制成，具有益腎健骨，祛瘀止痛之功效，臨床主治骨蝕，腐骨疽（股骨頭無菌缺血性壞死，骨髓炎）。人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1為三七的主要有效成分之一，可作為化淤生骨膠囊劑質量控制的指標成分。參考有關文獻[1-3]，建立了化淤生骨膠囊中三七含量測定的高效液相色譜方法。本法準確、簡便、快捷，適用于化淤生骨膠囊的質量控制。

1資料與方法

1.1儀器與試劑 島津LC-高效液相液相色譜儀，SPD-20A型控制器；色譜柱：Kromasil-C18（5 μm、4.6 mm×250 mm）； FA2004萬分之一電子分析天平（上海精科天美科學儀器有限公司）；AE240十萬分之一電子分析天平（梅特勒公司提供）。所用試劑均為分析純或色譜純。

1.2方法

1.2.1對照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rg1對照品8.22 mg、人參皂苷Rb1對照品7.83 mg。分別置于10 ml容量瓶中，以甲醇溶解。制成每1 ml約含人參皂苷Rg10.8 mg、人參皂苷Rb1 0.8 mg的混合溶液，即得混合標準品溶液。再用甲醇稀釋成不同濃度的混合標準品溶液，見表1。

1.2.2 供試品溶液的制備[4-6] 取本品粉末約2.0 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中；精密加入甲醇50 ml，密塞，稱定重量，放置過夜。置80 ℃水浴上加熱回流提取1 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25 ml蒸干，殘渣加水20 ml使溶解；用水飽和的正丁醇振搖提取4次（每次20 ml），合并正丁醇提取液，再用水洗滌3次，每次30 ml，棄去水液，分取正丁醇提取液；蒸干，殘渣用甲醇適量使溶解，并轉移至25 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.2.3 陰性對照品溶液的制備 取陰性對照品（缺三七）2.0 g，同供試品溶液的制法制成陰性對照溶液。

1.2.4液相色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A；以水為流動相B，按表2中的規(guī)定進行梯度洗脫；檢測波長為203 nm。