不同濃度β-氨基丁酸處理對葡萄果實(shí)抗病性的誘導(dǎo)模式

廖云霞，費(fèi)良航，夏明星，伍冬志，陳 偲,2，汪開拓,2,*

葡萄（Vitis vinifera L.）為葡萄科葡萄屬木質(zhì)藤本植物，在全球溫帶及亞熱帶地區(qū)均有廣泛種植；在當(dāng)今世界主要的商業(yè)水果中，葡萄鮮果產(chǎn)量常年位居前三，產(chǎn)銷量極高。但葡萄果實(shí)為典型的非躍變型果實(shí)，采收時已接近完熟，自身抗病能力較弱，且貯運(yùn)過程中易形成機(jī)械傷和果蒂斷面，因此極易遭受果實(shí)主要致病菌——灰葡萄孢（Botrytis cinerea）的侵染而爆發(fā)大面積灰霉病[1]。傳統(tǒng)的二氧化硫或波爾多液處理雖可有效控制葡萄采后灰霉病的發(fā)展，但長期施用會導(dǎo)致化學(xué)殘留并增強(qiáng)病原菌耐藥性，從而降低食用安全性。采用綠色激發(fā)子來誘導(dǎo)果實(shí)抗病性可有效降低宿主對病原菌的敏感性，減少采后病害的發(fā)生，因此日益受到關(guān)注[2]。根據(jù)形成模式的差異可將誘導(dǎo)抗性分為直接誘導(dǎo)作用和Priming（敏化反應(yīng)）作用。相較于直接誘導(dǎo)作用，Priming作用可“儲藏”抗病性，避免植物在低病害壓力下啟動防衛(wèi)反應(yīng)，故能減少植物適應(yīng)度的損失；但當(dāng)植物遭受嚴(yán)重病原菌侵染時，其組織內(nèi)可出現(xiàn)強(qiáng)烈的活性氧迸發(fā)，急速促進(jìn)病程相關(guān)基因（pathogenesis-related genes，PRs）的表達(dá)和植保素的合成，因此是一種經(jīng)濟(jì)的植物防衛(wèi)策略[3]。但在采后領(lǐng)域，激發(fā)子誘導(dǎo)采后果蔬抗病性的具體模式仍缺乏特征性研究。

β-氨基丁酸（β-aminobutyric acid，BABA）為一種從暴曬的番茄根系中分離的非氨基酸類蛋白質(zhì)，具有充當(dāng)信號分子調(diào)控植物防衛(wèi)反應(yīng)的功能[4]。采后BABA處理可有效誘導(dǎo)蘋果[5]、柑橘[6]、芒果[7]、水蜜桃[8]和草莓[9]等果實(shí)活性氧迸發(fā)、抗病相關(guān)物質(zhì)合成和PRs表達(dá)等抗病性反應(yīng)，從而降低采后病害的發(fā)生率。因此，本研究以‘巨峰’葡萄果實(shí)為試材，分析經(jīng)不同濃度BABA處理后果實(shí)在活性氧迸發(fā)、植保素合成和PRs表達(dá)上的差異，明確其抗病性反應(yīng)的具體形成機(jī)制，以為進(jìn)一步開發(fā)BABA保鮮方案提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

‘巨峰’葡萄果實(shí)（Vitis vinifera L.×V. labrusca L.‘Kyoho’）為供試材料，于2016年7月采摘自重慶市萬州區(qū)新田有機(jī)葡萄種植基地，3 h內(nèi)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。剔除病蟲害、機(jī)械傷以及未成熟果實(shí)，仔細(xì)剪下果穗上果粒，挑選大小均一、轉(zhuǎn)色均勻并達(dá)到商業(yè)成熟度的單果粒，用清水仔細(xì)洗去殘土和灰塵，以自然風(fēng)吹干。

B. cinerea分離自腐爛葡萄果實(shí)，純化鑒定后分出單孢子在PDA培養(yǎng)基上擴(kuò)大培養(yǎng)（25 ℃），隨后將菌種接種在PDA斜面培養(yǎng)基上低溫保存（4 ℃）。使用前，將斜面上菌種轉(zhuǎn)接至PDA平板上，在25 ℃下活化10 d后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.9%無菌生理鹽水將菌種配成1×105個/mL的孢子懸浮液。

BABA（純度≥99%） 德國Meker公司；白藜蘆醇、白藜蘆醇脫氫二聚體標(biāo)準(zhǔn)品 美國Sigma公司；乙腈（色譜純） 中國國藥集團(tuán)有限公司；Tripure Isolation Reagent試劑盒（用于RNA提取） 美國羅氏公司；SuperScript II試劑盒（用于RNA逆轉(zhuǎn)錄） 美國Invitrogen公司；Vac 6cc C18固相萃取小柱（1 g裝填量，90 μm顆粒直徑）、纖維素膜（0.45 μm孔徑） 美國Supelco公司；乙醇、丙酮、甲酸和醋酸等有機(jī)溶劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

810R冷凍離心機(jī) 德國Eppendorf公司；UV2600i紫外-可見分光光度計、LC-20A高效液相色譜儀 日本島津公司；PL601電子天平 瑞士Mettler-Toledo公司；902-ULTS超低溫冰箱 美國Thermo公司；PTC200聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）儀、Gel Doc XR凝膠成像儀 美國伯樂公司；DYCP-31DN瓊脂糖水平電泳儀 北京六一生物科技有限公司；BSC-150恒溫恒濕培養(yǎng)箱 上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計

前期研究已證實(shí)，1～500 mmol/L BABA處理可顯著誘導(dǎo)多種果實(shí)采后抗病性反應(yīng)[8-9]，因而以該范圍濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將挑選出的葡萄果實(shí)用體積分?jǐn)?shù)70%乙醇溶液進(jìn)行表面消毒后隨機(jī)分成兩大組，每組約1 000 顆果實(shí)，隨后再將每組果實(shí)隨機(jī)分成5 份。第一組為模擬接種組，每份果實(shí)在減壓罐中分別用0（對照）、1、10、100、500 mmol/L的BABA溶液減壓（－0.01 MPa）浸泡15 min后，于20 ℃下存放6 h，隨后用無菌手術(shù)針在果實(shí)赤道對稱位置穿刺2 個孔（深2 mm、直徑1.5 mm），模擬接種組和B. cinerea接種組在每個穿刺部位用移液槍分別注射15 μL的無菌蒸餾水和1.0×105個/mL的B. cinerea孢子懸浮液。處理后的果實(shí)用無菌聚乙烯塑料盒進(jìn)行分裝，每個處理分裝約15 盒，隨后置于（20±1）℃、相對濕度（90±3）%的環(huán)境中貯藏5 d。貯藏期間每天測定葡萄果實(shí)灰霉病發(fā)病率和病斑直徑，同時用手術(shù)刀切取非穿刺部位健康果肉組織，用液氮速凍后置于－80 ℃超低溫冰箱中貯存?zhèn)溆?。每個時間點(diǎn)隨機(jī)選取20～25 顆果實(shí)進(jìn)行測定并取樣，每個處理重復(fù)3 次，整個實(shí)驗(yàn)重復(fù)2 次。

1.3.2 指標(biāo)測定

1.3.2.1 發(fā)病率和病斑直徑的測定

當(dāng)葡萄果實(shí)表面病斑直徑超過1.5 mm時，記錄為發(fā)病果實(shí)。發(fā)病果實(shí)病斑直徑用游標(biāo)卡尺直接量出。發(fā)病率按式（1）計算。

1.3.2.2 H2O2含量的測定

稱取1 g果實(shí)冷凍樣品，用5 mL冷丙酮仔細(xì)研磨，勻漿液置于超聲波發(fā)生器中振蕩提取1 h，隨后以8 000×g、2 ℃離心15 min。取1 mL上清液參照Patterson等[10]的方法測定果實(shí)內(nèi)源H2O2含量，單位為μmol/kg，結(jié)果以鮮質(zhì)量計。

1.3.2.3 抗病相關(guān)酶活力的測定

稱取5 g果實(shí)冷凍樣品，用20 mL緩沖液研磨勻漿以提取粗酶液。參照Abeles等[11]的方法測定幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶活力，均以U/mg表示活力。提取液中蛋白質(zhì)含量參照Bradford[12]的方法測定。

1.3.2.4 PRs表達(dá)豐度的測定

參考文獻(xiàn)[13]，取1 g果實(shí)凍樣用試劑盒提取葡萄果實(shí)RNA。取1 mg RNA用試劑盒逆轉(zhuǎn)錄cDNA第一鏈，Oligo（dT）為引物。用Primer Premier 6.0軟件設(shè)計VvNPR1.1（GSVIVT00016536001）、VvChit4（AY137377）、VvPR2（AJ277900）基因特異性引物（表1）。以葡萄18S rRNA基因?yàn)閮?nèi)參。PCR的產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離，用溴化乙錠染色后用凝膠成像儀掃描并定量分析[14]。

表1 葡萄果實(shí)PRs特異性引物序列Table 1 Sequences of primers used for PCR amplification of PRs in grape berries

1.3.2.5 植保素單體含量的測定

稱取2 g果實(shí)冷凍樣品，用7 mL冰丙酮勻漿并以8 000×g、2 ℃離心10 min，取上清液用氮?dú)獯蹈桑S后用10 mL含體積分?jǐn)?shù)0.2%甲酸的冰乙腈溶液溶解，再經(jīng)纖維素薄膜（0.45 μm孔徑）過濾后參照Verhagen等[15]的方法測定樣品中白藜蘆醇和白藜蘆醇脫氫二聚體含量，單位為μmol/kg，結(jié)果以鮮質(zhì)量計。

1.3.2.6 可溶性糖含量的測定及甜度指數(shù)的計算

稱取2 g貯藏第5天的模擬接種組果實(shí)冷凍樣品，經(jīng)10 mL體積分?jǐn)?shù)95 %冰乙醇溶液勻漿并以8 000×g、2 ℃離心10 min，取上清液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在40 ℃下蒸發(fā)后，殘留物用去離子水溶解后經(jīng)纖維素薄膜過濾后采用高效液相色譜法[16]測定果糖、葡萄糖和蔗糖含量，單位為mmol/kg，結(jié)果以鮮質(zhì)量計。甜度指數(shù)按式（2）計算[17]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

果實(shí)發(fā)病率和病斑直徑平行測定5 次，其余指標(biāo)均平行測定3 次。運(yùn)用SAS 8.2軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析（Duncan’s多重比較法），以P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度BABA處理對采后葡萄果實(shí)灰霉病的影響

圖1 不同濃度BABA處理對模擬接種葡萄果實(shí)灰霉病發(fā)病率（A）及對B. cinerea接種果實(shí)灰霉病發(fā)病率（B）和病斑直徑（C）的影響Fig. 1 Effects of BABA treatment at different concentrations on disease incidence (A) in mock-inoculated grape berries, and disease incidence (B)and lesion diameter (C) in B. cinerea-inoculated grape berries

如圖1A所示，對于模擬接種組，10～500 mmol/L BABA處理組在貯藏3 d后發(fā)病率顯著降低（P＜0.05），而1 mmol/L BABA處理組與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）。由圖1B、C可知，B. cinerea接種可加速葡萄果實(shí)的腐爛，貯藏5 d后對照組發(fā)病率超過50%，說明B. cinerea在果實(shí)傷口處增殖迅速；經(jīng)10～500 mmol/L BABA處理并接種B. cinerea的葡萄果實(shí)其發(fā)病率和病斑直徑在貯藏3 d后均顯著低于只接種B. cinerea果實(shí)（P＜0.05），而1 mmol/L BABA處理組與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 不同濃度BABA處理對采后葡萄果實(shí)H2O2生成量的影響

圖2 不同濃度BABA處理對模擬接種葡萄果實(shí)（A）和B. cinerea接種果實(shí)（B）中H2O2生成量的影響Fig. 2 Effects of BABA treatment at different concentrations on H2O2 production in mock-inoculated (A) and B. cinerea-inoculated (B) grape berries

模擬接種葡萄果實(shí)在20 ℃貯藏期間，1、10 mmol/L BABA處理組與對照組果實(shí)相比，其H2O2生成量無顯著差異（P＞0.05）；100、500 mmol/L BABA處理則顯著促進(jìn)了H2O2生成量的上升，其含量在貯藏第2天和第1天分別達(dá)到峰值，隨后急劇下降（圖2A）。如圖2B所示，葡萄果實(shí)只接種B. cinerea后，其H2O2含量在貯藏第2天出現(xiàn)峰值，其數(shù)值為貯藏前的2.4 倍；經(jīng)10～500 mmol/L BABA處理并接種B. cinerea果實(shí)中H2O2含量在整個貯藏期間均顯著高于只接種病原菌果實(shí)（P＜0.05）；其中10 mmol/L BABA較100、500 mmol/L BABA處理更明顯地提高了果實(shí)在貯藏第1天的H2O2含量峰值。

2.3 不同濃度BABA處理對采后葡萄果實(shí)抗病相關(guān)酶活力的影響

模擬接種的對照組果實(shí)中幾丁質(zhì)酶活力在貯藏（20 ℃）前3 d呈緩慢上升趨勢，隨后逐漸下降；β-1,3-葡聚糖酶活力則呈先緩慢上升后逐漸下降趨勢；1、10 mmol/L BABA處理對模擬接種果實(shí)的幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶活力無顯著影響（P＞0.05），而100、500 mmol/L BABA處理可直接促進(jìn)幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶活力的上升，使兩種酶活力在整個貯藏期間均顯著高于對照組（圖3A1、B1）（P＜0.05）。由圖3A2、B2可知，10～500 mmol/L BABA處理可有效促進(jìn)B. cinerea接種果實(shí)中兩種抗病相關(guān)酶活力的上升；經(jīng)10 mmol/L BABA處理并接種B. cinerea果實(shí)中幾丁質(zhì)酶活力在整個貯藏期間均顯著高于100、500 mmol/L BABA處理組（P＜0.05），而β-1,3-葡聚糖酶活力則在貯藏第2天出現(xiàn)明顯峰值，其數(shù)值分別為同期100、500 mmol/L BABA處理組的1.70 倍和1.43 倍。

圖3 不同濃度BABA處理對模擬接種葡萄果實(shí)和B. cinerea接種果實(shí)中幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶活力的影響Fig. 3 Effects of BABA treatment at different concentrations on activities of chitinase and β-1,3-glucanase in mock-inoculated and B. cinerea-inoculated grape berries

2.4 不同濃度BABA處理對采后葡萄果實(shí)PRs表達(dá)豐度的影響

圖4 不同濃度BABA處理對模擬接種葡萄果實(shí)和B. cinerea接種果實(shí)中VvNPR1.1、VvChit4和VvPR2基因表達(dá)豐度的影響Fig. 4 Effects of BABA treatment at different concentrations on expression levels of VvNPR1.1, VvChit4 and VvPR2 in mock-inoculated and B. cinerea-inoculated grape berries

如圖4A1、B1、C1所示，模擬接種葡萄果實(shí)在20 ℃貯藏期間，同一濃度BABA處理組的PRs如VvNPR1.1和VvPR2（β-1,3-葡聚糖酶基因）表達(dá)豐度在整個貯藏期間無顯著變化（P＞0.05），而VvChit4表達(dá)豐度均隨貯藏時間延長呈現(xiàn)逐漸上升趨勢；1 mmol/L 和10 mmol/L BABA處理對葡萄果實(shí)中VvNPR1.1、VvChit4和VvPR2基因表達(dá)豐度未產(chǎn)生明顯影響，而經(jīng)100 mmol/L和500 mmol/L BABA處理的果實(shí)在貯藏1 d后PRs表達(dá)豐度均顯著高于對照組果實(shí)（P＜0.05）。由圖4A2、B2、C2可知，B. cinerea接種顯著誘導(dǎo)了葡萄果實(shí)中PRs的表達(dá)，VvNPR1.1、VvChit4和VvPR2基因表達(dá)豐度在貯藏前期均出現(xiàn)峰值；經(jīng)高濃度（100、500 mmol/L）BABA處理和B. cinerea接種的果實(shí)，其VvNPR1.1和VvChit4基因表達(dá)豐度在貯藏前3 d內(nèi)均顯著高于只病原菌接種果實(shí)；10 mmol/L BABA處理則較100 mmol/L或500 mmol/L BABA處理可更明顯誘導(dǎo)接種果實(shí)中PRs的表達(dá)，使其表達(dá)豐度一直維持在最高水平。

2.5 不同濃度BABA處理對采后葡萄果實(shí)貯藏期間植保素單體物質(zhì)含量的影響

圖5 不同濃度BABA處理對模擬接種葡萄果實(shí)和B. cinerea接種果實(shí)中白藜蘆醇和白藜蘆醇脫氫二聚體含量的影響Fig. 5 Effects of BABA treatment at different concentrations on contents of trans-resveratrol and ε-viniferin in mock-inoculated and B. cinerea-inoculated grape berries

如圖5A1、B1所示，模擬接種的對照組果實(shí)在20 ℃貯藏期間，其主要植保素單體白藜蘆醇含量呈緩慢上升趨勢，白藜蘆醇脫氫二聚體含量在貯藏1 d內(nèi)逐漸上升，隨后基本保持穩(wěn)定；1、10 mmol/L BABA處理對模擬接種果實(shí)中白藜蘆醇和白藜蘆醇脫氫二聚體含量無顯著影響（P＞0.05），而100、500 mmol/L BABA處理可明顯提高這兩種植保素單體含量。由圖5A2、B2可知，與模擬接種果實(shí)相比，BABA處理可有效誘導(dǎo)B. cinerea接種果實(shí)中白藜蘆醇和白藜蘆醇脫氫二聚體含量的上升，經(jīng)10 mmol/L BABA處理并接種B. cinerea果實(shí)中白藜蘆醇和白藜蘆醇脫氫二聚體含量均高于100 mmol/L或500 mmol/L BABA處理組。

2.6 不同濃度BABA處理對采后葡萄模擬接種組果實(shí)可溶性糖含量的影響

如圖6所示，經(jīng)1 mmol/L BABA處理的模擬接種組葡萄果實(shí)在20 ℃下貯藏5 d后，其果糖、葡萄糖和蔗糖含量以及甜度指數(shù)均與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）；100、500 mmol/L BABA處理則可抑制葡萄果實(shí)可溶性糖的積累；而經(jīng)10 mmol/L BABA處理的果實(shí)中葡萄糖和蔗糖含量和甜度指數(shù)則均顯著高于對照組（P＜0.05）。

3 討 論

BABA作為一種綠色的抗性激發(fā)子，可充當(dāng)信號分子通過交聯(lián)應(yīng)答機(jī)制啟動植物的抗病性反應(yīng)[18]。在本研究中，10～500 mmol/L BABA處理均可有效誘導(dǎo)B. cinerea接種組葡萄果實(shí)H2O2迸發(fā)、抗病相關(guān)酶活力上升、PRs表達(dá)和植保素合成，從而顯著提升果實(shí)貯藏期間抗病水平。同時，前研究也發(fā)現(xiàn)，10～500 mmol/L BABA可直接抑制病原菌B. cinerea的孢子萌發(fā)和菌絲體生長[9]。因此，BABA可通過直接抑制病原菌生長以及間接誘導(dǎo)抗病性來降低葡萄果實(shí)貯藏期間灰霉病發(fā)病率。

H2O2是典型的活性氧自由基，其在植物遭受病原菌侵染時會應(yīng)激并大量生成，再通過復(fù)雜的機(jī)制向下游傳導(dǎo)并放大抗性信號，從而啟動PRs表達(dá)以及PR蛋白和抗病相關(guān)物質(zhì)的合成[19]。PRs非表達(dá)子居于植物組織中不同抗病信號傳導(dǎo)途徑的交叉位點(diǎn)，可直接在胞內(nèi)與功能性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，從而全面調(diào)控PRs表達(dá)和抗病相關(guān)物質(zhì)合成[20]。這其中，VvNPR1.1是葡萄NPR基因家族中已被克隆的一個基因，可直接調(diào)節(jié)葡萄PRs的表達(dá)[21]。幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶是植物中最典型的抗病相關(guān)酶，對真菌細(xì)胞壁具有直接水解作用[22]；VvChit4和VvPR2基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄和翻譯后可分別合成這兩種酶以提升果實(shí)抗病性[23]。白藜蘆醇和白藜蘆醇脫氫二聚體是葡萄植保素的最主要單體物質(zhì)，兩者的合成量與抗病相關(guān)酶活力和PRs表達(dá)豐度呈明顯正相關(guān)關(guān)系[24]。在本研究中，1 mmol/L BABA處理未能直接誘導(dǎo)葡萄果實(shí)任何抗病性反應(yīng)；而經(jīng)100、500 mmol/L BABA處理的葡萄果實(shí)，無論是進(jìn)行模擬接種或病原菌B. cinerea接種，均在貯藏第1天出現(xiàn)了明顯的H2O2迸發(fā)、抗病相關(guān)酶（幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶）活力和PRs（VvNPR1.1和VvPR2）表達(dá)豐度的急劇上升以及植保素（白藜蘆醇和白藜蘆醇脫氫二聚體）合成的增加。這表明高濃度BABA直接誘導(dǎo)的葡萄果實(shí)抗病反應(yīng)，與是否接種病原菌無直接關(guān)系。10 mmol/L BABA處理無法誘導(dǎo)模擬接種葡萄果實(shí)的直接抗病性反應(yīng)，但在貯藏后期仍可通過Priming作用啟動防衛(wèi)反應(yīng)，從而抑制果實(shí)腐爛；但對經(jīng)10 mmol/L BABA處理的果實(shí)進(jìn)行損傷接種B. cinerea后，其果實(shí)內(nèi)活性氧產(chǎn)生量明顯升高，同時伴隨著PRs表達(dá)量和抗病相關(guān)物質(zhì)含量的顯著提升。這暗示10 mmol/L BABA不能夠直接誘導(dǎo)葡萄果實(shí)活性氧迸發(fā)、PRs表達(dá)和植保素合成，但在病原菌侵染的狀態(tài)下可迅速激活這些防衛(wèi)反應(yīng)。因此，上述結(jié)果說明，BABA處理濃度與果實(shí)抗病反應(yīng)模式密切相關(guān)，即在有效濃度內(nèi)，高濃度的BABA處理可誘導(dǎo)葡萄果實(shí)的直接抗病性反應(yīng)，而低濃度的BABA處理則誘導(dǎo)果實(shí)Priming作用。前期研究同樣發(fā)現(xiàn)，較低有效濃度的苯丙噻唑硫代乙酸甲酯（benzo-thiadiazole-7-carbothioic acid S-methyl ester，BTH）或茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）處理不能直接誘導(dǎo)草莓[9]、葡萄[13]和楊梅[25]果實(shí)抗病性反應(yīng)，但可誘導(dǎo)Priming抗性從而使果實(shí)在遭受病原菌侵染時急劇表達(dá)PRs并大量合成酚類、木質(zhì)素和植保素等抗病相關(guān)物質(zhì)。

植物抗病性反應(yīng)是一種基于逆境響應(yīng)的應(yīng)激反應(yīng)，易影響植物組織或細(xì)胞正常的生理代謝[26]。高濃度的BABA處理可誘導(dǎo)擬南芥典型的系統(tǒng)獲得性抗性，但同時也抑制了植株生長[27]；前期研究發(fā)現(xiàn)，BTH或MeJA在誘導(dǎo)葡萄細(xì)胞PRs表達(dá)的同時，也伴隨著細(xì)胞內(nèi)含物質(zhì)量的下降[28-29]。在本研究中，100、500 mmol/L BABA處理抑制了葡萄果實(shí)在貯藏期間果糖、葡萄糖和蔗糖的積累，并同時降低了果實(shí)甜度指數(shù)；而經(jīng)10 mmol/L BABA處理的果實(shí)在貯藏期間，其可溶性糖含量及甜度指數(shù)均高于高濃度處理組果實(shí)。這說明高濃度BABA誘導(dǎo)的直接抗病反應(yīng)雖可抑制葡萄果實(shí)采后腐爛，但也導(dǎo)致了果實(shí)品質(zhì)的下降；Priming作用能較好保持抗病性反應(yīng)和底物消耗之間的平衡，減少果實(shí)品質(zhì)過度的損耗，但Priming抗性分子層面的信號傳導(dǎo)和代謝機(jī)理仍有待研究。

4 結(jié) 論

10～500 mmol/L BABA處理可顯著降低葡萄果實(shí)在貯藏期間由B. cinerea引起的灰霉病發(fā)病率；高濃度（100、500 mmol/L）BABA可誘導(dǎo)葡萄果實(shí)直接抗病反應(yīng)，而低濃度（10 mmol/L）BABA則誘導(dǎo)果實(shí)Priming抗性；100、500 mmol/L BABA處理抑制了葡萄果實(shí)貯藏期間可溶性糖的積累，而10 mmol/L BABA處理可維持果實(shí)較高的可溶性糖含量和甜度指數(shù)。