胃潰瘍實(shí)驗(yàn)動物模型制作研究進(jìn)展

董偉

摘要：胃潰瘍是一種慢性消化系統(tǒng)疾病，發(fā)病率高，病程長，臨床癥狀特點(diǎn)是周期性疼痛，惡心嘔吐，嚴(yán)重者可出現(xiàn)胃出血。建立胃潰瘍模型，對潰瘍機(jī)制及藥效、治療機(jī)制進(jìn)行深入研究具有重要的臨床意義。胃潰瘍有多種造模方法，本文就近幾年常用的大鼠胃潰瘍模型進(jìn)行綜述，為胃潰瘍的進(jìn)一步研究提供參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：大鼠 胃潰瘍模型

胃潰瘍是最常見的上消化道疾病，在消化內(nèi)科較為常見，發(fā)病率居高不下。為了開展?jié)儼l(fā)生機(jī)制及藥效、治療機(jī)制的研究， 一些常用實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠模型被廣泛引用，目前大鼠胃潰瘍模型的方法已經(jīng)有數(shù)種，包括水浸應(yīng)激性、幽門結(jié)扎性、水楊酸性、乙醇性、利血平性、冰乙酸性等。本文就目前實(shí)驗(yàn)中常用的胃潰瘍模型進(jìn)行綜述，為實(shí)驗(yàn)研究提供更多的信息。

1.冰乙酸性模型

目前大鼠胃潰瘍模型中以冰乙酸性模型在實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)用較廣，大量研究表明此模型方法可靠，成功率高，重復(fù)性好，潰瘍深而大，與人類的慢性胃潰瘍極為相似，其自然愈合需要60 d左右。

利用乙酸注射、乙酸濾紙貼敷和乙酸直接灼燒法型[1]：大鼠禁食不禁水24h，用10%水合氯醛（3. 5mL/kg）腹腔注射麻醉，劍突下0. 5cm縱向切開腹壁約2cm，找出胃，輕移出腹腔。①乙酸注射法，用微量注射器在胃前壁胃竇部漿膜下近肌層處注入一定劑量（0.05， 0.03， 0.01mL）的冰乙酸。②乙酸濾紙貼敷法，用直徑為5mm的圓濾紙片浸適量的冰乙酸后，在胃竇部漿膜層貼敷30s x2次。③乙酸直接灼燒法，將內(nèi)徑5mm、長30mm的玻璃管垂直置于胃體漿膜層，管內(nèi)加入冰乙酸0. 2mL，15min后用棉簽蘸出冰乙酸。以上操作完畢，將胃輕輕送回腹腔，后覆蓋網(wǎng)膜，縫合腹膜，腹壁各層組織。

此模型操作較簡便，重復(fù)性好，所制造的潰瘍大小穩(wěn)定。此潰瘍的外形和組織結(jié)構(gòu)都與人的胃潰瘍十分接近。因此，本模型適用于各種藥物治療胃潰瘍的研究，也適用于胃潰瘍修復(fù)機(jī)理的探討。

2.應(yīng)激性潰瘍模型

應(yīng)激是機(jī)體受到強(qiáng)烈刺激后造成的瞬間反應(yīng)，使體內(nèi)穩(wěn)定狀態(tài)被破壞，出現(xiàn)細(xì)胞代謝

障礙和損傷，應(yīng)激性胃潰瘍的發(fā)生主要是在應(yīng)激狀態(tài)下（包括各種創(chuàng)傷、危重病、休克等）發(fā)生的以炎性糜爛、淺表潰瘍及出血為特征的急性胃黏膜病變。在應(yīng)激狀態(tài)下胃黏膜自身的保護(hù)屏障遭到破壞，內(nèi)源性與外源性的攻擊因子作用增強(qiáng)使胃黏膜細(xì)胞加速凋亡，導(dǎo)致了胃黏膜血流量減少、黏液—黏膜屏障破壞。

（1）運(yùn)動應(yīng)激性模型[2]

運(yùn)動是一種強(qiáng)烈的應(yīng)激源，臨床資料表明，競技運(yùn)動員尤其是長跑或馬拉松運(yùn)動員，在運(yùn)動期間常會發(fā)生出血，腹瀉或胃腸綜合征，從而影響正常訓(xùn)練和比賽。

大鼠游泳前在尾部離身體2/3處捆綁相當(dāng)于體重質(zhì)量2%的負(fù)荷。實(shí)驗(yàn)開始后，將動物投入游泳水槽進(jìn)行游泳運(yùn)動。采用高60cm，直徑55 cm的塑料圓桶作為大鼠游泳水槽，水深50cm，室溫（25士2℃ ），水溫（20士1℃）。力竭標(biāo)準(zhǔn)采用“經(jīng)過lOs動物仍不能返回水面為標(biāo)準(zhǔn)”。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行三周，每周休息一天。

（2）水浸應(yīng)激性潰瘍模型

水浸應(yīng)激性潰瘍模型特點(diǎn)是潰瘍程度與浸泡水溫的高低和時間長短有關(guān)。水應(yīng)激性模型的制備[3]是大鼠隨機(jī)分組，禁食48 h后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，一般先給動物灌服或經(jīng)其他途徑給一定量的所試藥物或與所試藥物等容積的生理鹽水，1 h后將大鼠束縛于大小適當(dāng)?shù)奶刂畦F絲籠內(nèi)（以不能自由活動為度）。隨即將動物頭部向上垂直浸泡在溫度相對恒定的冷水中，水平面在大鼠劍突部位，數(shù)小時后取出（水溫一般20℃左右）。大鼠受到刺激后副交感神經(jīng)興奮性升高，引起胃酸、胃蛋白酶和胃泌素分泌增加，從而引起應(yīng)激性潰瘍。水浸應(yīng)激性胃潰瘍模型所需實(shí)驗(yàn)儀器簡單，操作簡便，易于觀察，潰瘍發(fā)生率高，常作為一種廣泛使用的急性應(yīng)激性胃潰瘍模型

3.藥物誘發(fā)胃潰瘍模型

（1）利血平法：其造模方法簡單，皮下注射 1mg/m L 利血平注射液 0.1mg/10g 數(shù)天即可。利血平取材方便，且胃出血陽性率高，是動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ洼^好的誘發(fā)劑。

（2）阿司匹林法：能抑制胃粘膜環(huán)氧化酶，使前列腺素合成減少，致胃粘膜細(xì)胞屏障機(jī)能減弱，胃酸增高而誘發(fā)潰瘍。以阿司匹林100 mg/kg灌胃，每天1次，連續(xù)3 d，建立胃損傷模型。

4.幽門結(jié)扎型

幽門結(jié)扎型是Shay's傳統(tǒng)經(jīng)典大鼠胃潰瘍模型法，幽門結(jié)扎后，胃液滯留胃中，胃壁防御能力減弱，導(dǎo)致潰瘍形成。制備方法：大鼠禁食48小時，乙醚麻醉，固定于鼠板上，自劍突下沿腹中線切開腹壁，切口約為2～3cm，在左側(cè)肋緣部位用手指輕輕往上推，使胃暴露于切口，在幽門和十二指腸結(jié)合部穿線（勿傷及血管），將幽門結(jié)扎，結(jié)扎后各組動物均經(jīng)十二指腸注射給藥1次，然后縫合腹壁切口，常規(guī)消毒，紗布包扎。此法方法可靠，重復(fù)性好，省時。

5.乙醇致大鼠胃潰瘍模型

大鼠禁食不禁水 24 h， 用灌胃針探入至賁門部緩慢注入無水乙醇 1 m L，1 h 后模型形成。無水乙醇的腐蝕性強(qiáng)，直接破壞胃黏膜屏障，增強(qiáng)細(xì)胞膜的通透性，破壞胃粘膜屏障引起胃黏膜明顯損傷。

目前大鼠胃潰瘍模型的建立及實(shí)驗(yàn)方法在不斷發(fā)展和改進(jìn)，研究者可依據(jù)自身研究的目的，考量各模型的優(yōu)缺點(diǎn)來選擇適宜的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

參考文獻(xiàn)

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[2]李志坤，初海平，王福文.大鼠運(yùn)動應(yīng)激性胃潰瘍模型的建立以及苦苣總黃酮的預(yù)防作用[J].胃腸病學(xué)，2015，1：14-18.

[3]陳志東.消化性胃潰瘍模型在研究新藥中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2006，15（15）：2137-2138.

基金項(xiàng)目：

山東協(xié)和學(xué)院實(shí)驗(yàn)室開放項(xiàng)目 2017SYKF33