丙泊酚對肝部分切除術(shù)治療的原發(fā)性肝癌患者外周血淋巴細胞亞群和血清腫瘤相關(guān)標(biāo)志物水平的影響

伍家彬，謝曉海

原發(fā)性肝癌（primary liver cancer，PLC）是起源于肝臟上皮或間葉組織的惡性腫瘤，每年P(guān)LC死亡人數(shù)約有60萬，僅次于肺癌[1]。發(fā)病原因可能與病毒感染、酒精中毒、微量元素缺乏和肝硬化等因素相關(guān)。PLC患者早期無明顯癥狀，中晚期出現(xiàn)肝區(qū)疼痛、消瘦、乏力、腹脹、低熱等現(xiàn)象[2，3]。手術(shù)切除是治療PLC的有效方法，但在疾病發(fā)展過程中，PLC患者機體免疫力普遍受到影響，不同麻醉藥物也會對免疫功能造成不同程度的影響。所以，在施行肝部分切除術(shù)時，選擇合適的麻醉藥顯得十分重要[4]。丙泊酚是一種外科常用手術(shù)麻醉藥，麻醉起效快且平穩(wěn)，恢復(fù)也快[5]。研究顯示，丙泊酚不僅可調(diào)節(jié)機體免疫功能，同時具有抗癌作用，其在體外能抑制乳腺癌細胞、PLC細胞、食管癌和肺癌細胞生長和遷徙能力[6-9]。本研究旨在探討丙泊酚對行肝部分切除術(shù)治療的PLC患者外周血淋巴細胞亞群和血清腫瘤相關(guān)標(biāo)志物水平的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年2月～2014年4月我院收治的PLC患者92例，男49例，女43例；年齡41～62歲，平均年齡（50.4±6.8）歲。按照原發(fā)性肝癌規(guī)范化診治標(biāo)準(zhǔn)診斷，體質(zhì)量48～73kg，平均（59.3±11.3）kg。按照美國麻醉醫(yī)師協(xié)會（ASA）分級：I級 50例，II級42例。納入患者無嚴(yán)重的心腎肺功能障礙，未接受過化療和放療治療，近期未使用過免疫抑制劑治療。排除有飲酒史、近期感染、存在免疫缺陷、精神障礙患者。采用隨機數(shù)字表法將患者分成兩組，兩組性別、年齡、體質(zhì)量等一般資料比較無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者給出知情同意書。

1.2 麻醉與手術(shù)方法 術(shù)前8 h，常規(guī)禁食禁飲，開放靜脈通道，監(jiān)測心率、體溫、血氧飽和度、腦電雙頻指數(shù)和心電圖等。在異氟醚組，行氣管插管，采用呼吸機輔助呼吸，給予3%異氟醚 2 μg·kg-1、芬太尼 0.1mg·kg-1、咪唑安定 0.1mg·kg-1和維庫溴銨0.1mg·kg-1誘導(dǎo)麻醉，接著給予4%異氟醚維持麻醉；在丙泊酚組，給予丙泊酚2mg·kg-1、芬太尼2 μg·kg-1、咪唑安定 0.1mg·kg-1、維庫溴銨 0.1mg·kg-1誘導(dǎo)麻醉，再給予丙泊酚5～6mg·kg-1·h-1靜脈泵入，維持麻醉。在麻醉滿意后，兩組均行肝葉切除術(shù)。

1.3 觀察指標(biāo) 使用貝克曼庫爾特Vi-CELL XR流式細胞儀檢測外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞百分比和CD4+/CD8+細胞比值；采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測E-鈣蛋白（e-cadherin，EC）、血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）水平（上海吉泰依科賽生物科技有限公司）；觀察兩組患者不良反應(yīng)以及3 a生存率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，行x2檢驗，計量資料以（±s）表示，行t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周血T淋巴細胞亞群的變化比較 在手術(shù)麻醉前，兩組外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞百分比和CD4+/CD8+細胞比值無顯著性差異（P＞0.05）；術(shù)后1 d，丙泊酚組血CD3+和CD4+細胞百分比均顯著高于異氟醚組（P<0.05，表1）。

2.2 兩組患者血清腫瘤相關(guān)標(biāo)志物比較 在麻醉前，兩組血清EC、VEGF和MMP水平無顯著性差異（P＞0.05）；術(shù)后 14 d，丙泊酚組血清 EC、VEGF 和MMP水平均顯著低于異氟醚組（P＜0.05，表2）。

表1 兩組外周血T淋巴細胞亞群（±s）的變化

表1 兩組外周血T淋巴細胞亞群（±s）的變化

與異氟醚組比，①P<0.05

例數(shù)CD3+（%）CD4+（%）CD8+（%）CD4+/CD8+細胞比值丙泊酚組 麻醉前 46 60.7±5.0 39.8±4.6 25.6±3.4 1.6±0.4術(shù)后1 d 46 56.3±4.8① 36.8±5.7① 24.3±2.7 1.4±0.3異氟醚組 麻醉前 46 60.9±5.1 39.7±4.4 25.6±3.4 1.6±0.3術(shù)后 1 d 46 52.5±4.5 34.2±4.2 24.4±2.7 1.4±0.3

表2 兩組血清腫瘤相關(guān)標(biāo)志物（±s）比較

表2 兩組血清腫瘤相關(guān)標(biāo)志物（±s）比較

與異氟醚組比，①P<0.05

例數(shù) EC（ng/ml） VEGF（pg/ml） MMP（ng/L）丙泊酚組 麻醉前 46 2628.4±184.6 411.8±71.3 128.7±12.7術(shù)后14 d 46 1763.3±112.7① 201.9±36.9① 32.4±4.2①異氟醚組 麻醉前 46 2632.5±188.5 408.2±70.6 129.0±12.9術(shù)后14 d 46 2318.1±153.9 369.9±56.8 72.5±7.2

表3 兩組不良反應(yīng)[n，(%)]比較

2.3 兩組患者不良反應(yīng)比較 丙泊酚組白細胞下降發(fā)生率顯著低于異氟醚組（P＜0.05，表3）。

2.4 兩組預(yù)后情況比較 兩組術(shù)后3 a生存率無顯著性差異（P>0.05，表4）。

表4 兩組生存 [n，(%)]情況比較

3 討論

PLC作為我國發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤，常伴有免疫促進因子表達水平降低，免疫功能下降等現(xiàn)象[10]。手術(shù)為根治PLC患者最為有效的方法，但手術(shù)介入以及麻醉藥物的應(yīng)用會進一步抑制機體免疫功能，增加術(shù)后并發(fā)癥和腫瘤復(fù)發(fā)的可能性。因此，選擇合適的麻醉藥物用于手術(shù)，能最大限度地減輕對免疫功能的不良影響，可有效改善患者術(shù)后預(yù)后。丙泊酚是一種外科手術(shù)常用的麻醉藥，具有起效快、蘇醒迅速、鎮(zhèn)靜效果好、作用時間短等優(yōu)點。除此之外，它還有抗氧化、抗焦慮、止吐和神經(jīng)保護等非麻醉作用[11-14]。近些年，有文獻報道丙泊酚在體外對食管癌、宮頸癌、肺癌等細胞具有直接的抑制作用[15]。在PLC細胞體外實驗，發(fā)現(xiàn)丙泊酚通過誘導(dǎo)HepG2細胞凋亡，下調(diào)MMP9蛋白表達水平，抑制PLC細胞生長和侵襲能力[16]。

免疫功能是機體發(fā)揮抵抗疾病能力的重要防線，T淋巴細胞亞群作為免疫系統(tǒng)最重要的細胞群，能維持機體正常的免疫功能[17]。根據(jù)細胞表面標(biāo)志不同，將T細胞分為CD4+T細胞亞群和CD8+T細胞亞群。CD3+細胞參與T細胞激活的早期過程，可反映T淋巴細胞成熟情況。CD4+細胞參與細胞因子分泌和表面分子表達，可調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的強弱和免疫啟動過程。CD8+細胞是細胞毒性T淋巴細胞，其比例過多可抑制機體的免疫反應(yīng)，CD4+和CD8+細胞在正常機體內(nèi)保持一定的平衡。當(dāng)CD4+/CD8+比值下降時，表示免疫功能降低[18-20]。本研究在給PLC患者進行手術(shù)時采用丙泊酚和異氟醚麻醉，結(jié)果兩組外周血CD3+、CD4+細胞百分比和CD4+/CD8+比值變化略有不同，丙泊酚麻醉對患者的免疫功能的影響相對較低，提示手術(shù)和麻藥對機體免疫系統(tǒng)有一定的影響，但丙泊酚較異氟醚影響小，與有關(guān)研究結(jié)果一致[21]。

EC是鈣依賴性跨膜蛋白，參與細胞形態(tài)的維持、細胞運動以及細胞粘附性調(diào)節(jié)，大多數(shù)研究表明，EC水平與惡性腫瘤細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移和分化程度成正相關(guān)。VEGF是血管生成和發(fā)生的調(diào)控因子，通過作用于糖基化的內(nèi)皮細胞有絲分裂，增強血管通透性、促進細胞轉(zhuǎn)移，是評價腫瘤細胞轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)。MMP包括MMP1-26，是一類鋅、鈣離子依賴性肽鏈內(nèi)切酶家族，參與細胞外基質(zhì)蛋白的降解過程，使受到腫瘤細胞侵襲的組織屏障受到損害，促進腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移[22，23]?？梢?，EC、VEGF 和 MMP均與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，是惡性腫瘤細胞轉(zhuǎn)移能力的血清標(biāo)志物。本研究在丙泊酚組患者術(shù)后14d，血清EC、VEGF和MMP水平顯著低于麻醉前和異氟醚組，說明丙泊酚可有效抑制EC、VEGF和MMP等腫瘤相關(guān)標(biāo)志物表達。研究指出，丙泊酚可抑制食管癌細胞增殖和遷移，其作用機制為下調(diào)ERK-VEFG/MMP-9信號通路[24-27]，支持本文的觀察結(jié)果。另外，丙泊酚組患者白細胞下降22例（47.8%），顯著低于異氟醚組的32例（69.6%），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，提示丙泊酚對免疫功能的影響相對較小，或許丙泊酚能保護機體的免疫功能，抑腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[28-32]。

綜上所述，丙泊酚可通過減輕對外周血CD3+、CD4+細胞百分比和CD4+/CD8+比值的影響，降低手術(shù)對患者免疫功能的抑制作用，并通過下調(diào)血清EC、VEGF和MMP水平，抑制腫瘤細胞轉(zhuǎn)移的可能，從而達到即治療了肝癌患者，又最大限度地不影響患者的抗病能力，改善患者預(yù)后。尤其對于術(shù)前外周血白細胞減少的PLC患者，使用丙泊酚麻醉較異氟醚可能更安全可靠。