維吾爾藥材石榴花質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

程波 地力努爾·吐爾遜江 何江

【摘 要】 目的：建立維吾爾藥材石榴花的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高其質(zhì)量控制水平。方法：參照《中國(guó)藥典》2015年版通則相關(guān)方法，測(cè)定石榴花藥材的水分、灰分、浸出物含量；以石榴花藥材中沒食子酸和粉末相關(guān)特征性結(jié)構(gòu)成分作為相關(guān)指標(biāo)，采用薄層色譜法和顯微鑒別法進(jìn)行定性鑒別研究。結(jié)果：該10批次石榴花藥材測(cè)定結(jié)果為水分在6.64%～9.36%之間，總灰分在6.34%～14.14%之間，浸出物在61%～65.07%之間。薄層色譜法結(jié)果表明其分離度較好，斑點(diǎn)較為清晰。顯微鑒別中相關(guān)特征性結(jié)構(gòu)成分，具有一定的適用性。結(jié)論：實(shí)驗(yàn)所建立的方法準(zhǔn)確可靠，可用于維吾爾藥材石榴花內(nèi)在的質(zhì)量控制與評(píng)價(jià)。

【關(guān)鍵詞】 維吾爾藥材；石榴花；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；沒食子酸

【中圖分類號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2018）07-0011-03

Abstract：Objective In order to establish the quality satndard of pomegranate flower and improve its quality control level. Methods The water，total ash，water-soluble and alcohol-soluble extract were determined according to procedures recorded in the Chinese Pharmacopoeia （2015 edition）. The qualitative and quantitative analyses were performed by thin identification and microscopic identification methods. Result The results showed that the water content was 6.64%～9.36%，total ash was 6.34%～14.14%，and the alcohol-soluble extract was 61%～65.07%. The thin identification and microscopic identification methods are also satisfactory，the results showed that had a good resoulution with clear spots and charactereristic structural component. Conclusion It was concluded that the developed method was accurate and good in specificity，which can be used for quality control of pomegranate flower in the future.

Keywords：Uighur Medicine；Pomegranate Flower；Quality Standard；Gallic Acid

石榴花為石榴科植物石榴Punica granatum L.的干燥花瓣，是維吾爾族習(xí)用藥材，維語名為阿娜爾、古麗娜。維醫(yī)認(rèn)為其性質(zhì)二級(jí)干寒，具有收斂止瀉，止汗止血的作用，常用于腹瀉日久；外用于治療出血不止，口舌生瘡，脫肛痔瘡，口臭牙疼，皮膚瘙癢[1]。被收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·維吾爾藥分冊(cè)》（1999年版），《中華本草·維吾爾藥卷》（2005年版）。研究發(fā)現(xiàn)，石榴花中含有酚酸類，黃酮類、揮發(fā)油、萜類、葡萄糖、果糖等化學(xué)成分，其中沒食子酸含量相對(duì)較高[2-3]，具有抗菌、抗病毒、降壓降脂、抗氧化、抗糖尿病、保肝護(hù)肝等藥理活性[4-5]。在石榴花鑒別項(xiàng)中，僅有《維吾爾藥分冊(cè)》中有關(guān)于性狀及顯微鑒別，而無其他水分、灰分、薄層等鑒別相關(guān)項(xiàng)。隨著市場(chǎng)對(duì)石榴花藥材需求量逐年增加，藥材的質(zhì)量控制與評(píng)價(jià)已成為當(dāng)務(wù)之急。研究通過對(duì)不同批次石榴花藥材進(jìn)行薄層，顯微定性鑒別，并對(duì)藥材中水分、總灰分、水溶性及醇溶性浸出物進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)測(cè)定數(shù)據(jù)，制定相應(yīng)的限量指標(biāo)，旨在為維吾爾藥材石榴花的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)試驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 MS105DU型電子天平（METTLER TOLEDO）；DHG-9070A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）；SXZ-4-10型馬弗爐（北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司）；KQ5200B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；CX-31型生物顯微鏡（日本OLYMPUS）；YOKO-ZS型紫外分析攝影儀（武漢藥科新技術(shù)開發(fā)公司）；CA-1115型冷卻水循環(huán)裝置（上海愛朗儀器有限公司）；UPC-I-10T型優(yōu)普超純水器（四川優(yōu)普超純科技有限公司）。

1.2 材料 乙醇（分析純，批號(hào)：20170310，天津市河?xùn)|區(qū)紅巖試劑廠）；甲醇（分析純，批號(hào)：20160721，天津永晟精細(xì)化工有限公司）；乙酸乙酯（分析純，批號(hào)：20160228，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司）；石油醚（分析純，批號(hào)：20160608，天津市河?xùn)|區(qū)紅巖試劑廠）；環(huán)己烷（分析純，批號(hào)：20100418，天津市福晨化學(xué)試劑廠）；甲酸（分析純，批號(hào)：20160926，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司）；三氯化鐵（分析純，批號(hào)：20130609，天津市化學(xué)試劑三廠）；甲苯（分析純，批號(hào)：20150628，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司）；鹽酸（分析純，批號(hào)：20170926，北京化工廠）；沒食子酸對(duì)照品（分析純，批號(hào)：110831-200803，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；薄層層析硅膠G板（批號(hào)20141225，青島海洋化工有限公司）。石榴花藥材實(shí)地采集或由藥材公司購(gòu)買，均經(jīng)新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所何江副研究員鑒定為石榴的干燥花瓣，憑證樣本存放于新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所標(biāo)本室。

2 方法

性狀通過對(duì)該藥材外觀、質(zhì)地、斷面、臭、味、測(cè)量等記錄相關(guān)數(shù)據(jù)；水分測(cè)定依據(jù)《中國(guó)藥典》2015年版第四部通則0832水分測(cè)定法烘干法進(jìn)行；灰分測(cè)定依據(jù)《中國(guó)藥典》2015年版第四部通則2302灰分測(cè)定法進(jìn)行；浸出物測(cè)定依據(jù)《中國(guó)藥典》2015年版第四部通則2201浸出物測(cè)定法進(jìn)行；薄層色譜鑒別依據(jù)《中國(guó)藥典》2015年版第四部通則0502薄層色譜法進(jìn)行；顯微鑒別依據(jù)《中國(guó)藥典》2015年版第四部通則2001顯微鑒別法進(jìn)行。

3 結(jié)果

3.1 性狀 本品多皺縮，有的破碎，完整者展平后呈卵形或卵圓形或，長(zhǎng)20～30mm，寬20～25mm。花瓣紅色或暗紅色，羽狀網(wǎng)脈。主脈基部寬至先端漸細(xì)，頂端圓形，邊緣微波狀，具疏而淺的鈍鋸齒，基部寬碶形或近圓形。薄而質(zhì)脆，易碎。氣微，味苦澀。

3.2 顯微鑒別 本品粉末紅棕色。花冠表皮細(xì)胞表面呈類多角形或不規(guī)則形。壁波狀彎曲，表面有細(xì)密彎曲的角質(zhì)紋理。側(cè)面觀外壁向外隆起，呈乳突狀，邊緣微波狀。螺紋導(dǎo)管常見，直徑10～20μm；網(wǎng)紋導(dǎo)管、梯紋導(dǎo)管偶見?；ǚ哿３暑悎A形或橢圓形，淡黃色或近無色，直徑14～22μm ，具3孔溝。薄壁細(xì)胞類圓形或長(zhǎng)圓形?；ńz細(xì)胞類長(zhǎng)方形，壁薄，表面有紋理。

3.3 水分、灰分、浸出物測(cè)定 通過對(duì)10批次維吾爾藥材石榴花進(jìn)行測(cè)定，水分測(cè)定結(jié)果最高為9.36%，最低為6.64%，平均為7.46%，暫定水分不得超過10%?？偦曳譁y(cè)定結(jié)果最高為14.14%，最低為6.34%，平均為8.54%，暫定總灰分不得超過15%。浸出物測(cè)定結(jié)果浸出物量最高為65.07%，最低為61%，平均為62.91%，暫定浸出物不得低于55%。

3.4 薄層鑒別 取本品粉末2g，加無水乙醇30mL，超聲處理60min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇1mL使之溶解，即為供試品溶液。取沒食子酸[3，6-7]作為對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，即為對(duì)照品溶液。吸取上述兩種溶液各2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（8∶6∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

4 討論

在浸出物條件篩選過程中，選取1批次維吾爾藥材石榴花，采用水和醇分別進(jìn)行冷浸法和熱浸法測(cè)定，測(cè)定結(jié)果顯示水溶性浸出物浸提過程中熱浸大于冷浸，醇溶性浸出物量遠(yuǎn)大于水溶性浸出物量。設(shè)置乙醇濃度30%、50%、70%、90%、100%五個(gè)濃度梯度，在醇溶性浸出物浸提過程中隨著乙醇濃度的增加其浸出物量反而減少，當(dāng)乙醇濃度為30%時(shí)，其浸出物量最大。冷醇浸提過程中浸出物量在26.1%～55.19%之間，熱醇浸提過程中浸出物量在41.77%～63.04%之間，所以采用30%乙醇對(duì)10批次維吾爾藥材石榴花進(jìn)行熱醇浸提。

薄層鑒別條件篩選過程中，根據(jù)文獻(xiàn)選取了綠原酸[8-11]和沒食子酸作為鑒別的對(duì)照品溶液，以綠原酸為對(duì)照品溶液，以不同的展開劑進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果不是很理想，目的斑塊區(qū)分較為困難或是模糊不清，分離度較差。以沒食子酸作為對(duì)照品溶液，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸與環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑時(shí)，對(duì)展開劑的比例進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，供試品能基本上都能鑒別出來，與對(duì)照品在相應(yīng)的位置能顯示出相同顏色的斑塊。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，后者作為展開劑時(shí)，效果最為理想，所以試驗(yàn)決定采用沒食子酸作為對(duì)照品溶液，環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（8∶6∶1）為展開劑，以1%三氯化鐵乙醇溶液作為顯色劑，結(jié)果可以滿足實(shí)驗(yàn)的要求。最終，以此薄層條件對(duì)10批次維吾爾藥材石榴花進(jìn)行薄層鑒別研究。

研究對(duì)維吾爾藥材石榴花進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，其水分、灰分、浸出物限量測(cè)定，薄層色譜及顯微結(jié)構(gòu)相關(guān)定性鑒別研究，其試驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)為維吾爾藥材石榴花的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及評(píng)價(jià)提供科學(xué)試驗(yàn)依據(jù)。

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（收稿日期：2018-03-01 編輯：程鵬飛）