熒光分光光度法測(cè)定斯達(dá)舒中鋁的含量

王堃　陳瑾　趙春曉　郭愛玲

【摘 要】 目的：建立測(cè)定斯達(dá)舒中鋁含量的新方法。方法：以萘甲醛席夫堿為絡(luò)合劑，采用熒光分光光度法，在醋酸銨-醋酸（pH=7）的緩沖溶液中測(cè)定斯達(dá)舒中鋁的含量。結(jié)果： 在激發(fā)波長(zhǎng)為437 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為525 nm處，用熒光分光光度法對(duì)濃度0～6 μmol/L范圍內(nèi)鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行熒光強(qiáng)度的測(cè)定，結(jié)果表明熒光強(qiáng)度和濃度具有較好的線性關(guān)系，平均加樣回收率為99.02%～102.03%，準(zhǔn)確度較好。結(jié)論：該方法選擇性好、靈敏度高、響應(yīng)時(shí)間短、操作簡(jiǎn)便，適合于胃藥斯達(dá)舒中鋁含量的測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】 鋁；熒光分光光度法；斯達(dá)舒

【中圖分類號(hào)】R914.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2018）08-0034-03

Abstract：Objective To establish a new method for the determination of aluminium in Si Dashu. Method The content of aluminum in Si Dashu was determined in ethanoic acid-ammonium acetate cushion fluid （ pH=7） with naphthalene formaldehyde Schiff base as complexing agent by fluorescence spectrophotometry. Result The calibration curve of aluminum ion with good linearity was obtained over the range of 0-6 μmol/L at the excitation wavelength of 437 nm and the emission wavelength of 525 nm. The recovery rate was 99.02%～102.03% with good accuracy. Conclusion The method has the advantages of high sensitivity， selectivity， short response time and simple operation. The method was suitable for determining the aluminum content in Si Dashu.

Keywords：Aluminum； Fluorescence Spectrophotometry； Si Dashu

鋁是地殼中含量最豐富的金屬元素，約占地殼的70%，在許多藥物、食品添加劑、混凝劑等中都含有鋁。鋁是一種對(duì)人體和生態(tài)都有害的物質(zhì)，雖然快速進(jìn)入人體不會(huì)導(dǎo)致急性中毒，但是長(zhǎng)期過(guò)量的攝入鋁會(huì)對(duì)中樞神經(jīng)、肝、腎、骨、造血細(xì)胞都有損壞，導(dǎo)致癡呆，引起貧血、骨質(zhì)疏松等疾病[1]。所以，建立一種靈敏、快速的分析方法用來(lái)檢測(cè)鋁的含量具有一定的實(shí)際意義。目前，測(cè)定鋁的方法有原子吸收光度法[2]、化學(xué)法[3]、紫外分光光度法[4]等。而熒光光度法因具有操作簡(jiǎn)單快速、樣品用量少、靈敏度高、選擇性好等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛地應(yīng)用于鋁的含量測(cè)定[5]。在前期研究中，以2-氨基苯酚和2-羥基萘甲醛為原料，合成了萘甲醛席夫堿（HPIN），并通過(guò)熒光分光光度法測(cè)定了白術(shù)、防風(fēng)、黃芪、連翹等中藥中鋁的含量[6-7]。本文探索以HPIN為絡(luò)合劑，采用熒光分光光度法測(cè)定胃藥斯達(dá)舒中鋁的含量，為復(fù)方制劑中鋁含量的測(cè)定提供了一種新的方法，為斯達(dá)舒質(zhì)量控制的檢測(cè)方法提供參考。

1 儀器與材料

1.1 材料 斯達(dá)舒片（批號(hào)：160808、161104、161110、160113，修正藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司），HPIN由山西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。甲醇、乙酸、乙酸銨、氯化銨、氨水、硝酸鋁、乙酸鈉、鹽酸等試劑都是分析純。

1.2 儀器 CP214萬(wàn)分之一天平（奧豪斯儀器有限公司），UV-6100S型紫外可見分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司），F(xiàn)97pro型熒光光譜儀（上海棱光技術(shù)有限公司），pHS-3C pH計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品溶液的制備

2.1.1 鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密稱取0.0188 g Al（NO3）3·9H2O，用適量蒸餾水溶解，定容至50 mL容量瓶，配制成1 mmol/L的鋁儲(chǔ)備液。精密移取該溶液1.0 mL于100 mL容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，配制為10 μmol/L的標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液，備用。

2.1.2 HPIN標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密稱取HPIN固體0.0132 g，用適量甲醇溶解，定容至50 mL容量瓶中，配制成1 mmol/ L的HPIN儲(chǔ)備液。精密移取該溶液1.0 mL于100 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，配制成10 μmol/L的標(biāo)準(zhǔn)HPIN溶液，備用。

2.1.3 緩沖溶液的制備 pH為3、4、5、6的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液由NaAc與HAc配制， pH為7的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液由NH4Ac和HAc配制，pH為8、9、10的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液由NH4Cl與NH3·H2O配制，并經(jīng)pH計(jì)校準(zhǔn)。

2.2 紫外吸收光譜 在10 mL比色管中，依次加入1.0 mL 10 μmol/L標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液，HAc-NH4Ac標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液（pH=7）3.0 mL，10 μmol/L標(biāo)準(zhǔn)HPIN溶液1.0 mL，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，靜置40 min，以試劑空白作參比，在300～600 nm范圍進(jìn)行吸收光譜掃描。結(jié)果顯示，HPIN與鋁離子的絡(luò)合物在437 nm處有最大吸收。所以，選擇437 nm作為熒光測(cè)定的激發(fā)波長(zhǎng)。

2.3 熒光發(fā)射光譜 準(zhǔn)確移取1.0 mL的標(biāo)準(zhǔn)HPIN溶液，置于10 mL比色管中，依次加入3.0 mL 的HAc-NH4Ac標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液（pH=7）、1.0 mL 的10 μmol/L的標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液，加水稀釋至刻度，搖勻，靜置40 min，以437 nm為激發(fā)波長(zhǎng)，在470～680 nm范圍進(jìn)行熒光光譜掃描。結(jié)果顯示，在525 nm處有最大的熒光強(qiáng)度。所以選擇525 nm作為熒光測(cè)定的發(fā)射波長(zhǎng)。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取7個(gè)10 mL比色管，分別加入1.0 mL的標(biāo)準(zhǔn)HPIN溶液和3.0 mL pH=7的HAc-NH4Ac標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液，依次加入0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL的標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液，用蒸餾水稀釋至刻度，靜置40 min，固定437 nm為激發(fā)波長(zhǎng)， 525 nm為發(fā)射波長(zhǎng)，測(cè)定熒光強(qiáng)度F。以F與標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液的濃度作回歸分析，可得回歸方程：F=23.39C+11.444，r=0.9985，說(shuō)明鋁離子在0～6μmol/L濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

2.5 緩沖溶液的選擇 按“2.4”項(xiàng)方法操作，分別測(cè)定pH為3、4、5、6、7、8、9、10的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中的熒光值，結(jié)果顯示pH為7的HAc-NH4Ac標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中熒光強(qiáng)度最大。同時(shí)分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液為1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL中的熒光值，發(fā)現(xiàn)用量為3.0 mL時(shí)，熒光最強(qiáng)。因此實(shí)驗(yàn)采用3.0 mL pH為7的HAc-NH4Ac標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進(jìn)行測(cè)定。

2.6 絡(luò)合時(shí)間的選擇和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 在10 mL的比色管中，依次加入1.0 mL的標(biāo)準(zhǔn)HPIN溶液、3.0 mL的HAc-NH4Ac標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液、1.0 mL的標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液，按“2.4”項(xiàng)方法操作，每隔5 min測(cè)定熒光強(qiáng)度，結(jié)果表明在40 min內(nèi)絡(luò)合反應(yīng)基本完成，熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值，并在1 h內(nèi)基本穩(wěn)定。因此絡(luò)合時(shí)間選取40 min。

2.7 精密度實(shí)驗(yàn) 精密移取標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液1.0 mL，按“2.4”項(xiàng)方法操作，連續(xù)重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算出RSD為0.98%，表明該儀器精密度良好。

2.8 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 選擇斯達(dá)舒片（批號(hào)1601104）粉末6份，每份1.0 g，制備貯備液，分別精密移取10 μL，按“2.4”項(xiàng)方法測(cè)定熒光值，計(jì)算出RSD 為0.76 %，表明該方法重復(fù)性良好。

2.9 加樣回收率 選擇已知含量的斯達(dá)舒片（批號(hào)1601104）粉末9份，每份0.5 g，精密稱定，制備貯備液，分別精密移取10 μL，每三份分別按照樣品中鋁含量的50%，100%和150%加入標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液，按2.4項(xiàng)方法測(cè)定熒光值，計(jì)算出平均加樣回收率為99.02%～102.03%，RSD為1.08%～1.89 %。

2.10 共存離子的影響 1 μmol/L鋁離子溶液作為測(cè)試對(duì)象，在測(cè)量的過(guò)程中加入共存的離子，測(cè)定值的相對(duì)誤差小于或等于±5%，進(jìn)行離子干擾試驗(yàn)，結(jié)果見表1。大量NO3-、Na+、K+、SO42-離子（共存倍數(shù)超過(guò)10000倍）存在下不影響鋁離子含量的測(cè)定，F(xiàn)e3+在鄰菲羅啉作為掩蔽劑的情況下最大共存量為600 μmol/L，其他離子（共存倍數(shù)超過(guò)200倍）也不影響鋁離子含量的測(cè)定。

2.11 樣品含量測(cè)定 取斯達(dá)舒片，研磨，準(zhǔn)確稱取0.0150 g置于燒杯中，加入2 mol/L鹽酸，溶解，過(guò)濾，洗滌，合并濾液置于100 mL容量瓶中，蒸餾水定容至刻度，即得樣品貯備液。取10 μL樣品貯備液置于10 mL比色管中，按“2.4”項(xiàng)方法連續(xù)測(cè)定其熒光值3次，然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中鋁離子含量，結(jié)果見表2。

3 討論

鋁是一種慢性神經(jīng)性毒性物質(zhì)，長(zhǎng)期攝入過(guò)量會(huì)使神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生緩慢改變，從而誘發(fā)老年癡呆等疾病。斯達(dá)舒的主要成分為氫氧化鋁、維生素U、顛茄提取物，同時(shí)含有淀粉、硬脂酸鎂等輔料。用于緩解胃酸過(guò)多引起的胃痛、胃灼熱感（燒心）、反酸，也可用于慢性胃炎。其中，氫氧化鋁對(duì)胃部已經(jīng)存在的胃酸起中和或緩沖作用，既是藥物的有效成分，又不能過(guò)量攝取，測(cè)定斯達(dá)舒中鋁離子的含量具有一定的實(shí)際意義。2015版《中國(guó)藥典》[8]中氫氧化鋁的含量測(cè)定方法是采用過(guò)量的EDTA與鋁離子發(fā)生反應(yīng)，再用鋅滴定液滴定剩余的EDTA，根據(jù)鋅滴定液的消耗量，確定氫氧化鋁的含量，操作過(guò)程相對(duì)繁瑣。研究采用的萘甲醛席夫堿熒光分光度法，取樣量少，選擇性好，靈敏度高，其它離子的干擾少，可以直接測(cè)定，操作簡(jiǎn)單。斯達(dá)舒每片含氫氧化鋁140 mg，即標(biāo)準(zhǔn)含鋁量應(yīng)為48 mg。實(shí)驗(yàn)以萘甲醛席夫堿為絡(luò)合劑，采用熒光分光光度法測(cè)定斯達(dá)舒中鋁含量的平均值在48 mg以上，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，說(shuō)明該方法可靠、準(zhǔn)確。同時(shí)對(duì)四批樣品中鋁含量的平均值進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，得出斯達(dá)舒中含鋁量的范圍為（49.51±0.93）mg/片，即48.58～50.44 mg/片。綜上，本文所建立的熒光分光光度法可以用于檢測(cè)斯達(dá)舒中鋁的含量，可為含鋁藥物的質(zhì)量控制檢測(cè)方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供參考。

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（收稿日期：2018-03-06 編輯：劉 斌）