蟹塘套養(yǎng)與溫室養(yǎng)殖的中華鱉雌體營養(yǎng)組成的比較研究

龍曉文，吳仁福，麻 楠，李才平，吳旭干,3,4，成永旭,3,4

(1.上海海洋大學，農(nóng)業(yè)部魚類營養(yǎng)和環(huán)境生態(tài)研究中心，上海 201306； 2.新沂市佳成生態(tài)養(yǎng)殖有限公司，江蘇徐州 221400； 3.上海海洋大學，上海水產(chǎn)養(yǎng)殖工程技術研究中心，上海 201306； 4.上海海洋大學，水產(chǎn)科學國家級實驗教學示范心，上海 201306)

中華鱉(Trionyxsinensis)俗稱甲魚，是我國重要的特種水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一，其肉味鮮美和營養(yǎng)價值較高，因此深受消費者的青睞[1-2]。目前市場上的中華鱉主要來源于溫室養(yǎng)殖(溫室鱉)、池塘主養(yǎng)(池塘鱉)和池塘套養(yǎng)(套養(yǎng)鱉)等幾種養(yǎng)殖方式[2-4]。溫室養(yǎng)殖是中華鱉主要的養(yǎng)殖方式，養(yǎng)殖過程中通常采用加熱設備(如鍋爐)保持恒溫并投喂配合飼料，因此生長速度快、產(chǎn)量高，而價格相對便宜[2，5]；池塘套養(yǎng)中華鱉是一種新型的生態(tài)養(yǎng)殖模式，即在魚、蝦、蟹等主養(yǎng)品種的池塘中套養(yǎng)中華鱉，養(yǎng)殖過程中通常不給中華鱉單獨投喂飼料，主要讓其捕食活力較弱或患病的魚、蝦、蟹等活餌，因此可以防止疾病的傳播和提高主養(yǎng)品種的成活率[6-8]。池塘套養(yǎng)中華鱉的放養(yǎng)密度較低，水質(zhì)相對較好，因此套養(yǎng)鱉的外觀和口感通常較好、營養(yǎng)價值高，市場售價較高，從而增加了池塘單位面積的經(jīng)濟效益[9-10]。

隨著人民生活水平的提高，中華鱉的營養(yǎng)品質(zhì)已成為消費者關心的問題[1，3]。目前已有大量關于野生、溫室和池塘養(yǎng)殖中華鱉營養(yǎng)價值比較的研究[11-14]，而有關溫室鱉和套養(yǎng)鱉營養(yǎng)價值比較的研究相對較少，僅龍曉文等[4]比較中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis，簡稱河蟹)塘套養(yǎng)與溫室養(yǎng)殖的雄性中華鱉營養(yǎng)組成，尚不清楚兩種養(yǎng)殖模式下中華鱉雌體營養(yǎng)價值的差異。此外，中華鱉雌雄個體間差異較大，通常雄體生長較快，且兩者的營養(yǎng)價值可能存在一定差異[5，15]。鑒于此，本研究分析和比較了河蟹池塘套養(yǎng)與溫室養(yǎng)殖的雌性中華鱉肌肉和裙邊中的常規(guī)營養(yǎng)成分、氨基酸含量和脂肪酸組成，以期為中華鱉養(yǎng)殖及其親本培育提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

河蟹池塘套養(yǎng)中華鱉(簡稱套養(yǎng)鱉)取自上海海洋大學崇明養(yǎng)殖基地，河蟹養(yǎng)殖池塘面積約為2 000 m2，6月初每個池塘套養(yǎng)30只平均規(guī)格為200～300 g的中華鱉(前期在溫室中進行養(yǎng)殖)，養(yǎng)殖時間6-11月份，養(yǎng)殖過程中僅給河蟹投喂專用配合飼料。溫室養(yǎng)殖中華鱉(簡稱溫室鱉)取自浙江桐廬專業(yè)養(yǎng)殖戶，采用鍋爐加熱保持恒溫的養(yǎng)殖模式，每個養(yǎng)殖水泥池面積為30 m2左右，5月中旬放養(yǎng)平均體重為50 g的中華鱉幼體，養(yǎng)殖密度為20只/m2；養(yǎng)殖過程中主要投喂天邦牌中華鱉配合飼料(蛋白47.65%，脂肪2.92%，灰分12.31%)，日投喂量為中華鱉總體重的2%～3%，養(yǎng)殖時間5-11月份。于2014年11月份分別各取5只體重接近的1齡雌性套養(yǎng)鱉[體重(535.07±30.37) g]和溫室鱉[體重(506.93±46.97) g]，活體運輸?shù)缴虾：Ｑ蟠髮W營養(yǎng)繁殖實驗室用于后續(xù)實驗。參考龍曉文等[4]的方法，先用乙醚將實驗鱉麻醉昏迷后，用干毛巾擦去體表水分并稱重，然后解剖取四肢肌肉、裙邊和肝臟稱重，分別計算裙邊指數(shù)(SI)= 裙邊重/體重×100 %和肝體比(HSI)=肝臟重/體重×100 %，然后將所有樣品放入自封袋中于-40 ℃冰箱中保存。

1.2 常規(guī)營養(yǎng)成分分析

中華鱉樣品中的水分、粗蛋白和粗灰分含量分別采用105 ℃烘干法、凱氏定氮法和550 ℃灼燒法進行測定[16]。采用氯仿：甲醇(體積比為2∶1)提取樣品中的總脂并測定其含量[17]，每個樣品重復測定3次。

1.3 氨基酸和脂肪酸組成分析

分別取每只中華鱉的肌肉和裙邊冷凍樣品10 g左右，采用真空冷凍干燥機將樣品冷凍干燥至恒重，經(jīng)粉碎機粉碎后過80目篩，用于氨基酸組成的分析。稱取適量凍干樣品經(jīng)鹽酸水解后采用日立835-50型氨基酸自動分析儀測定除色氨酸、蛋氨酸和半胱氨酸外的15種氨基酸[18]。樣品經(jīng)過氫氧化鈉水解后，采用高效液相色譜法測定色氨酸含量。蛋氨酸和半胱氨酸的含量采用過甲酸氧化水解法進行測定[19]。樣品中的必需氨基酸分(EAAS)按照FAO/WHO/UNU的方法進行計算[20]。采用14 %的三氟化硼-甲醇溶液對樣品中的總脂進行甲脂化處理[21]，然后使用Thermo TRACE GC ULTRA氣相色譜儀進行脂肪酸組成分析，采用峰面積歸一化法對脂肪酸進行定量[4]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)均以平均值±標準誤表示。采用SPSS16.0 軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，首先進行Levene法的方差齊性檢驗，當數(shù)據(jù)不滿足齊性方差時對百分比數(shù)據(jù)進行反正弦或者平方根處理，然后采用獨立樣本t檢驗進行顯著性分析，取P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 生物學指數(shù)和常規(guī)營養(yǎng)成分

表1所示，套養(yǎng)鱉的裙邊指數(shù)略高于溫室鱉，而其肝體比顯著低于溫室鱉。套養(yǎng)鱉肌肉水分含量顯著高于溫室鱉，而粗蛋白和粗灰分含量均以后者較高，兩種鱉肌肉中的粗脂肪含量差異不顯著；就裙邊而言，套養(yǎng)鱉裙邊水分含量顯著高于溫室鱉，而其粗蛋白含量顯著低于溫室鱉，而兩者裙邊中的粗脂肪和粗灰分含量均無顯著差異。

表1 套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體生物學指數(shù)和常規(guī)營養(yǎng) 成分的比較Tab.1 Comparison of biological indexes and proximate composition of female T.sinensis reared in greenhouse and eco-pond for E.sinensis (n=5) /%

注：*表示差異顯著(P<0.05)；**表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

2.2 肌肉和裙邊中的氨基酸含量

套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體肌肉和裙邊中的氨基酸含量見表2。就肌肉必需氨基酸而言，除蛋氨酸和半胱氨酸含量無顯著差異外，套養(yǎng)鱉肌肉中的異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、蘇氨酸、纈氨酸和總必需氨基酸(∑EAA)含量均顯著低于溫室鱉。非必需氨基酸中，除組氨酸含量無顯著差異外，套養(yǎng)鱉肌肉中其余非必需氨酸和總非必需氨基酸(∑NEAA)含量均顯著低于溫室鱉。此外，肌肉中的總氨基酸(TAA)含量以溫室鱉較高，而EAA/TAA比例以套養(yǎng)鱉較高。就裙邊氨基酸組成而言，除色氨酸含量無顯著差異外，套養(yǎng)鱉裙邊中的其余必需氨基酸含量均顯著低于溫室鱉；此外，套養(yǎng)鱉裙邊中各非必須氨基酸、∑NEAA和TAA含量顯著低于溫室鱉，而其EAA/TAA比例顯著高于溫室鱉。

如表3所示，除色氨酸外，兩種鱉肌肉中的必需氨基酸分(EAAS)均大于100，且均以溫室鱉較高。就裙邊而言，所有EAAS均小于100，同時各種EAAS均以套養(yǎng)鱉較高。

2.3 套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體肌肉和裙邊中脂肪酸組成的比較

如表4所示，除了套養(yǎng)鱉C16∶0含量顯著低于溫室鱉外，兩種鱉肌肉中其余飽和脂肪酸含量均無顯著差異；就單不飽和脂肪酸而言，套養(yǎng)鱉肌肉C16∶1和C17∶1含量顯著高于溫室鱉，其余單不飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸總量(∑MUFA)均無顯著差異；兩種鱉肌肉多不飽和脂肪酸組成差異較大，其中，套養(yǎng)鱉C18∶2n6、C18∶3n6、C20∶2n6和C20∶3n3含量顯著低于溫室鱉，而其C18∶3n3、C20∶3n6和C20∶4n6 含量顯著高于溫室鱉，其余多不飽和脂肪酸和總多不飽和脂肪酸(∑PUFA)含量均無顯著差異；套養(yǎng)鱉肌肉中的高度不飽和脂肪酸(∑HUFA)含量顯著高于溫室鱉，但其ARA/EPA比例較低，兩者間總n-3多不飽和脂肪酸(∑n-3PUFA)、總n-6多不飽和脂肪酸(∑n-6PUFA)、n-3/n-6比例和DHA/EPA比例均無顯著差異。

在裙邊脂肪酸組成中，除套養(yǎng)鱉C15∶0含量顯著高于溫室鱉外，其余飽和脂肪酸和∑SFA含量均無顯著差異；套養(yǎng)鱉C17∶1、C20∶1和C24∶1含量顯著高于溫室鱉，而C18∶1n9含量以后者較高，其余單不飽和∑MUFA含量均無顯著差異；套養(yǎng)鱉C18∶2n6、C18∶3n3含量顯著低于溫室鱉，而其C18∶3n6、C20∶2n6、C20∶3n6和C20∶4n6含量顯著高于溫室鱉，其余多不飽和脂肪酸和∑PUFA含量均無顯著差異；套養(yǎng)鱉∑n-3PUFA和n-3/n-6比例顯著低于溫室鱉，而兩者間的∑n-6PUFA和∑HUFA含量均無顯著差異。

表2 套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體肌肉中氨基酸含量的比較Tab.2 Comparison of amino acids composition in muscle of female T.sinensis reared in greenhouse and eco-pond for E.sinensis /( mg/kg)

注：∑EAA：總必需氨基酸；∑NEAA：總非必須氨基酸；TAA：總氨基酸。

表3 套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體肌肉和裙邊必需氨基酸分值的比較Tab.3 Comparison of the essential amino acids score (EAAS) of muscle and soft apron of female T.sinensis reared in greenhouse and eco-pond for E.sinensis /( mg/kg)

注：EAAS=100×測定蛋白質(zhì)樣品中某必需氨基酸含量/FAO參考蛋白中必需氨基酸含量(FAO/WHO/UNU，1985)。

表4 套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體肌肉和裙邊中脂肪酸組成的比較Tab.4 Comparison of fatty acid composition in muscle and soft apron of female T.sinensis reared in greenhouse and eco-pond for E.sinensis /%

注：含量低于0.5 %的脂肪酸在表中未列出；SFA：飽和脂肪酸；MUFA：單不飽和脂肪酸；PUFA：多不飽和脂肪酸；HUFA：高度不飽和脂肪酸。

3 討論

3.1 套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體生物學指數(shù)和常規(guī)營養(yǎng)成分的比較

肝體比是評價水生動物營養(yǎng)狀態(tài)的重要指標之一[22-23]。本研究中，溫室鱉肝體比顯著高于套養(yǎng)鱉。分析認為溫室鱉攝食的人工配合飼料與自然界中的天然餌料相比，含有更多的蛋白質(zhì)、脂類、糖類等多種營養(yǎng)物質(zhì)，因此過多營養(yǎng)物的質(zhì)攝入會導致體內(nèi)尤其肝臟中營養(yǎng)物質(zhì)的大量積累，最終造成肝體比升高[24-27]。組織中的常規(guī)營養(yǎng)成分是衡量中華鱉營養(yǎng)價值的重要指標[28]。本研究發(fā)現(xiàn)套養(yǎng)鱉肌肉和裙邊中的水分含量高于溫室鱉，而蛋白和總脂含量以后者較高，這與先前的研究結(jié)果相類似，由于溫室鱉肌肉和裙邊中相對較高的粗蛋白和粗脂肪百分含量，從而間接降低了水分的百分含量[11]。溫室鱉在溫度適宜、食物充足及活動空間小的條件下，活動耗能小，因此組織中有較多營養(yǎng)物質(zhì)的積累；而在河蟹池塘套養(yǎng)模式下，中華鱉活動空間大，能量消耗多從而導致體內(nèi)脂肪、蛋白等營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，此外，進入10月份后池塘水溫下降，中華鱉活動量減少和停止進食 ，逐步進入冬眠，因此營養(yǎng)物質(zhì)的攝入量減少[1，5，29]。

3.2 套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體氨基酸含量的比較

中華鱉組織中的氨基酸組成和含量是評價蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值的重要指標[30]。本研究發(fā)現(xiàn)，套養(yǎng)鱉肌肉和裙邊中大部分氨基酸、∑EAA和TAA含量均低于溫室鱉，而其EAA/TAA顯著高于溫室鱉。在河蟹池塘套養(yǎng)條件下，通常不給中華鱉專門投喂飼料，主要讓其攝食患病或活力較弱的魚、蝦、蟹等淡水活餌，因此蛋白及氨基酸的總攝入量相對較?。淮送?，中華鱉在蟹塘套養(yǎng)條件下，活動量大、耗能高，從而降低了體內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)的積累量，而溫室鱉攝食蛋白含量相對較高的人工配合飼料，因此其體內(nèi)積累了較多的蛋白和氨基酸[1，7，10]。必需氨基酸分(EAAS)也是評價蛋白質(zhì)營養(yǎng)的重要指標之一[2]。根據(jù)FAO/WHO/UNU[20]的方法計算EAAS的結(jié)果顯示，兩種中華鱉肌肉中的大部分EAAS均大于100，且以溫室鱉較高；就裙邊而言，大部分EAAS均小于100，這與先前報道的中華鱉裙邊中EAAS較低的結(jié)果相一致[31]。盡管套養(yǎng)鱉肌肉和裙邊中的粗蛋白含量低于溫室鱉，但其EAAS較高，這可能是由于在河蟹池塘套養(yǎng)條件下，中華鱉除了攝食淡水活餌外，還可能攝食河蟹飼料，從而增加了食物蛋白和氨基酸的多樣性[7，10，32]。

3.3 套養(yǎng)鱉與溫室鱉雌體脂肪酸組成的比較

水產(chǎn)品的營養(yǎng)價值和風味與其所含脂肪酸的組成和含量密切相關[33-34]。本研究發(fā)現(xiàn)，套養(yǎng)鱉肌肉中的C18∶2n6、C18∶3n6、C20∶2n6和C20∶3n3含量均顯著低于溫室鱉，而C18∶3n3、C20∶3n6、C20∶4n6和∑HUFA含量均以套養(yǎng)鱉較高，這與先前的研究結(jié)果相類似[2-3，35]，說明中華鱉肌肉中的脂肪組成受養(yǎng)殖模式的影響，分析認為在溫室養(yǎng)殖條件下，中華鱉攝食了富含深海魚類多不飽和脂肪酸的人工配合飼料，盡管多不飽和脂肪酸攝入量較大，但各多不飽和脂肪酸含量不均衡[36-37]；而套養(yǎng)鱉養(yǎng)殖過程中不僅攝食淡水活餌，還有可能攝食河蟹飼料，因此其餌料具有較高的多樣性[4，7，10]。就裙邊而言，套養(yǎng)鱉C18∶1n9、C18∶2n6、C18∶3n3、C20∶5n3、C22∶6n3、∑n-3PUFA及n-3/n-6比例顯著低于溫室鱉，而其C20∶4n6含量較高，這與先前的研究報道存在一定差異[1]，這可能由養(yǎng)殖方式、餌料組成等差異所致，其具體原因有待進一步研究。

綜上所述，溫室鱉肌肉蛋白、大部分氨基酸含量和裙邊C18∶1n9、C20∶4n6、C20∶5n3、C22∶6n3高于套養(yǎng)鱉，而肌肉C18∶3n3、C20∶4n6、C22∶6n3和∑HUFA以套養(yǎng)鱉較高；結(jié)果表明溫室鱉的肌肉和裙邊中干物質(zhì)含量較高，尤其是粗蛋白含量，而套養(yǎng)鱉的氨基酸和脂肪酸組成更優(yōu)。