桉樹焦枯病和青枯病的分離鑒定與防治方法

蔣慧

摘 要 桉樹不僅用途廣、經(jīng)濟效益高，而且還有利于改善生態(tài)環(huán)境，具有良好的社會效益。基于此，以其幼苗時期常見的病害為研究對象，結(jié)合相關(guān)病蟲防治技術(shù)，分別研究了焦枯病和青枯病的分離鑒定及防治方法，旨在為桉樹的防治工作提供參考。

關(guān)鍵詞 桉樹；焦枯??；青枯??；鑒定

中圖分類號：S763.7 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.15.001

桉樹是利用價值較高的樹種之一，目前已被引種到世界120多個國家。我國引入桉樹的時間開始于1890年，主要栽種在廣州、福州和廣西龍州等地，并且取得了較好的經(jīng)濟和環(huán)境效益。桉樹可以用于生產(chǎn)木材、改性材、做纖維板等多個方面，并且適應性強，因此加快推動桉樹種植、林板一體化建設(shè)具有重要的經(jīng)濟和社會意義。制約桉樹生長的一個重要因素就是病蟲害，尤其是焦枯病和青枯病，被稱為桉樹“癌癥”，由此可以看出其對桉樹生長的破壞程度是巨大的，目前我國還沒有十分有效的防治方法，因此對焦枯病和青枯病的鑒定和防治方法進行深入研究具有重要的現(xiàn)實意義。

1 桉樹焦枯病的研究方法

1.1 焦枯病的癥狀和病原

桉樹焦枯病又稱葉枯病，其一般癥狀表現(xiàn)為：葉片前期出現(xiàn)水漬狀的斑點，中期逐步擴散，后期則形成典型的爛葉癥狀。病害發(fā)生時，葉脈及相鄰的組織可能還保持綠色，對于已經(jīng)變棕色枯萎的部分則會慢慢變黑，并逐步向下發(fā)展。病情進一步嚴重時葉脈會出現(xiàn)死亡，整片葉子全部變成黑色，并易碎墜落。其發(fā)病的條件往往是環(huán)境較為潮濕、氣溫較高或營養(yǎng)缺失，都很容易誘發(fā)焦枯病，尤其是對于生育后期和老齡的葉片，若葉片濕度大或強光照射更容易引發(fā)這種病害。其病原菌主要有兩種：Cylindrocladium quinqueseptatum和scoparium。

1.2 發(fā)病規(guī)律

以子實體或菌絲在桉樹落葉、病枝上和林下土壤中越冬。隨著氣溫不斷升高，越冬病原菌也逐漸釋放分生孢子，從新葉背面的自然孔口或枝條傷口侵入寄主組織。隨著降水量不斷增多，以及多風多雨天氣的影響下，分生孢子在林間飛散傳播，直到11月才停止。分生孢子的飛散高峰期往往出現(xiàn)在全年降水量最多的月份。病原菌侵入寄主后潛育期一般為3～l0 d，林間從4月下旬或5月初開始出現(xiàn)新的病斑，發(fā)生高峰期在7—8月，到9月病情逐漸得到控制，進入11月后天氣逐漸變冷，氣溫下降后降水量減少，11月中旬就停止發(fā)展。病原菌分生孢子于是通過氣流、雨水飛散傳播，而病害主要發(fā)生在苗木和4年生以下幼林中，同時侵染萌芽林，從植株下部開始發(fā)病，逐漸向上蔓延，多發(fā)生在高溫、高濕季節(jié)[1]。

1.3 焦枯病病菌分離制備

焦枯病病菌的分離方法可選用常規(guī)方法對試驗采集的感病枝葉進行分離，而病菌的制備步驟，具體可分為3個步驟：1）選取一個PDA培養(yǎng)基，培養(yǎng)純菌；2）再選取一個新的PDA培養(yǎng)基，將培養(yǎng)得到的純菌菌絲接種過去；3）培養(yǎng)一段時間后，用無菌水將分生的孢子菌落洗下來，然后配制成一定濃度的懸浮液。

1.4 焦枯病病菌接種

接種前應選取無病蟲害，且生長健壯的苗木，接種的方法主要采用噴霧法。接種完成后，應將實驗苗木放置于光線充足、通風良好的室內(nèi)，并對其進行保濕48 h，然后可定期對其發(fā)病情況進行觀察，并做好相應的記錄。

2 桉樹青枯病的研究方法

2.1 青枯病的癥狀和病原

青枯病作為一種典型的維管束病害，往往給桉樹種植帶來較大的經(jīng)濟損失。根據(jù)病狀在葉片出現(xiàn)的快慢程度，青枯病的癥狀可分為急性和慢性兩種。1）急性。這種癥狀下，桉樹葉片表現(xiàn)為急劇失水萎蔫，但不脫落，葉片的表面顏色以黑褐色條斑為主，根莖、木質(zhì)部、髓部等位置則會出現(xiàn)腐爛、壞死等現(xiàn)象，且在潮濕或有水的環(huán)境下散發(fā)出臭味。當出現(xiàn)急性癥狀后，如果不采取相應的搶救措施，則一般僅需7～20 d，幼苗就會死亡。2）慢性。與急性相比，慢性癥狀較為緩慢，從癥狀出現(xiàn)到幼苗死亡持續(xù)3～6個月。具體癥狀表現(xiàn)為下部葉片出現(xiàn)紫紅色，然后逐步向上發(fā)展，并且感染此病害的植株往往較為矮小，生長緩慢。后期如果得不到控制，植株的根系也會出現(xiàn)病變，枝條也會出現(xiàn)壞死。

青枯病的主要侵染來源是農(nóng)田表土、垃圾肥或動物糞便為原料的基質(zhì)，帶菌率極高，發(fā)病機會大。林地發(fā)病則與所施有機肥有關(guān)，一般來說施有機肥，特別是垃圾肥的地方，發(fā)病機會就大，而有一些未施垃圾肥的林地發(fā)病，則應檢查幼苗基質(zhì)是否帶菌。

2.2 發(fā)病規(guī)律

青枯病菌為典型的土傳病害，病菌大多由根際侵入蔓延到植株維管束組織內(nèi)，使植株凋萎，又可從病株的根部轉(zhuǎn)入土壤再感染鄰近的健康植株，在桉樹適宜種植地區(qū)，一年四季都可發(fā)病。一般3月開始病株逐漸增多，6—l0月發(fā)病嚴重，7—9月是高峰期。高溫或臺風雨后造成樹木傷口，溫度在33～35 ℃，相對濕度80%以上時，該病最易流行[2]。

2.3 青枯病病菌分離制備

1）先選取一段病根或病枝，長度以3 cm為宜，然后用75%的酒精對該試驗樣進行浸泡，30 s后再用無菌水進行沖洗。2）釋放病菌，將沖洗后的試驗樣進行外皮剝離，再放入含有10 mL無菌水的玻璃器皿中，靜置30 s后，病菌就會自動擴散到水中。3）制作菌種，通過攪拌玻璃器皿中的液體，使其成為懸浮液，取出1 mL的菌液放入培養(yǎng)皿中，將9 mL含有TTC的Kelmen培養(yǎng)基土培養(yǎng)36 h，選取活性較強的菌落，并用無菌水洗下菌落，作為桉樹抗病性測定的菌種。

2.4 青枯病病菌接種

結(jié)合相關(guān)資料，WFT培養(yǎng)接種法的測試結(jié)果與自然界青枯病發(fā)生的實際情況較為符合，因此在接種時可選用該方法。具體步驟為：將測試樣洗凈成裸根苗，然后用無菌水在玻璃容器內(nèi)培養(yǎng)5～7 d，有新根長出時，再用配置好的菌液進行培養(yǎng)。接種后試驗樣也要放置于光線充足、通風良好的室內(nèi)，并定期對其進行觀察[3]。

3 桉樹焦枯病和青枯病的防治和控制

3.1 化學防治

隨著桉樹林的廣泛種植，化學防治方法的用藥量不斷增加，成本較高，且很容易造成環(huán)境污染，因此不宜大范圍推廣。同時也沒有切實可靠的化學防治方法能夠徹底控制焦枯病和青枯病。發(fā)現(xiàn)有少量的植株發(fā)病時，可根據(jù)情況采用該方法，以青枯病為例，應及時清理感病植株，集中燒毀，并對感病植株周圍土壤用250 g·m-2生石灰消毒或1∶100倍福爾馬林液或1%有效氯漂白粉液消毒，進行消毒時，要使消毒液充分滲透到土層中徹底殺死病原細菌，同時應對周圍健康植株，用石灰、銅桉合劑或高錳酸鉀處理根部。

3.2 生物防治

生物防治主要是指通過對環(huán)境、寄主或拮抗體進行操縱，或大量引入一種或多種抗生體，使病原物的接種體密度或病害產(chǎn)生的活動得以減輕。防治的機理主要包括重寄生、抗生物質(zhì)的作用、競爭、菌絲干擾、捕食、溶解和免疫作用等。按照生態(tài)環(huán)境保護和可持續(xù)發(fā)展觀點，生物防治是最好的防治技術(shù)之一。

對于焦枯病和青枯病來說，生物防治的方法主要是利用菌類的拮抗作用，如假單孢桿菌、芽孢桿菌、鏈霉菌等分泌的各種抗生素或可降解病原物的酶，直接作用于病原菌，殺死病菌或抑制其生長和繁殖。利用菌根技術(shù)，實行桉樹苗木菌根化，如采用彩色豆馬勃、粘滑菇、硬皮馬勃等接種苗木后造林[4]。

3.3 林業(yè)技術(shù)防治

我國關(guān)于林業(yè)防治的相關(guān)條例中已經(jīng)明確指出：林木的防治應以預防為主，以維護生態(tài)環(huán)境為基礎(chǔ)進行綜合治理。具體來說就是以林業(yè)防治技術(shù)措施為基礎(chǔ)，因地制宜，運用綜合性防治措施來保護環(huán)境，達到促進林木生長的目的。

具體來說，一方面應加強混交林、多品系造林模式推廣，避免單一樹種抵抗蟲害弱的缺陷。另一方面為給桉樹創(chuàng)造一個適宜的生長發(fā)育條件，應在育苗期，適當提前或推遲播種，以避開蟲害期，并及時進行管理，以保障苗木健康生長；造林期應提倡營造混交林；育林期要及時進行幼林的撫育管理，提高抗病蟲害的能力。此外在病害高發(fā)的季節(jié)要注意苗圃、林地開溝排水，加強通風，控制密度。

3.4 森林植物檢疫

森林植物檢疫是一種預防性的防治措施，它是由國家頒布的，避免攜帶危害病種苗流入的重要手段，具體工作包括：開展病蟲害普查、劃分疫區(qū)和保護區(qū)等，對于促進我國林業(yè)發(fā)展具有積極的促進作用。該方法同樣也適用于桉樹焦枯病和青枯病的防治，一方面可實施檢疫準入制度，確保調(diào)入的桉樹苗健康、強壯，另一方面還要建立無檢疫對象苗圃，嚴把育苗種子與繁殖材料檢疫關(guān)，做好產(chǎn)地檢疫工作，保證出圃苗木合格有效。此外還應設(shè)置檢疫對象隔離帶，避免病害高發(fā)季節(jié)傳播病菌，在最大程度上減少經(jīng)濟損失。

3.5 選育抗病品種或品系

所有桉樹品系葉片中多酚氧化酶活性明顯高于根部，而且具有不同抗病性的桉樹各品系之間其多酚氧化酶存在顯著差異。而對于青枯病、焦枯病抗性較強的桉樹品系中多酚氧化酶活性顯著比抗病性弱的品類高。多酚氧化酶同工酶電泳在分析中就發(fā)現(xiàn)，在不同抗病性的桉樹種類之間，就同工酶譜帶在條帶數(shù)及各條帶的相對強弱方面表現(xiàn)出明顯差異，這也說明了與桉樹對青枯病、焦枯病的抗性差異有關(guān)。在相同條件下，表現(xiàn)高抗性的品系可推廣種植。此外，應利用高新技術(shù)，實施抗病基因轉(zhuǎn)移技術(shù)培育。

4 結(jié)語

由于桉樹的獨特優(yōu)勢，已在我國得到廣泛種植，為了確保桉樹成林，就要做好相應的病蟲害防治工作。通過分析可以看出：做好焦枯病和青枯病的防治工作一方面可通過加強抗逆性育種研究、推廣抗青枯病品種；另一方面還要采取防止苗期感染的預防措施，建立完善的桉樹焦枯病和青枯病預防機制，從而才能在保護環(huán)境的基礎(chǔ)上，提高桉樹種植的經(jīng)濟效益。

參考文獻：

[1] 陳全助.桉樹種系對焦枯病抗性的初步測定[J].福建林學院學報，2010（4）：297-299.

[2] 黃金使，陳曉明，吳幼媚，等.尾葉桉抗病無性系的篩選研究[J].廣西林業(yè)科學，2008（1）：4-7.

[3] 吳志華，謝耀堅，羅聯(lián)峰，等.我國桉樹青枯病研究進展[J].林業(yè)科學研究，2007（4）：569-575.

[4] 鄭美珠.桉樹焦枯病發(fā)病規(guī)律的研究[J].福建林學院學報，2006（4）：339-343.

（責任編輯：劉昀）