日糧中添加大豆素對犢公牛生長性能、機體抗氧化能力及免疫性能的影響

劉嬋娟，周 珊，陳作棟，趙向輝，許蘭嬌，潘 珂，楊食堂，瞿明仁*，曾衛(wèi)東

(1.江西農(nóng)業(yè)大學 動物科學技術(shù)學院，江西 南昌 330045； 2.高安裕豐農(nóng)牧有限公司，江西 高安 330800;3.江西省贛州市寧都縣畜牧局，江西 贛州 342800)

牛肉具有營養(yǎng)價值高，且脂肪含量低等特點，其需求量在國內(nèi)呈日益增長的趨勢。犢牛的飼養(yǎng)質(zhì)量直接影響整個肉牛養(yǎng)殖的品質(zhì)及產(chǎn)量。大豆素是大豆異黃酮的主要組分，廣泛存在于豆科植物及蔬菜，水果中。研究表明，大豆素具有非常廣泛的生物學活性，如雌激素樣作用、抗氧化、調(diào)節(jié)細胞周期等，可以預防人類多種疾病，包括骨質(zhì)疏松、動脈硬化、乳腺癌以及前列腺癌等[1-2]。這使得大豆素在動物生產(chǎn)中也做了較多研究。日糧中添加大豆素提高了肉用仔公雞的飼料采食量、日增重、免疫器官重、飼料利用率以及血清生長激素、胰島素樣生長因子和睪酮水平，降低死亡率[3-5]。飼喂蛋雞大豆素提高了蛋雞產(chǎn)蛋率、日蛋重、蛋殼厚度，降低料蛋比和破蛋率[6-7]。飼喂仔公豬大豆素能夠增加日增重、血清胰島素水平和血糖濃度，降低脲氮和膽固醇濃度，提高生長速度[8]。大豆素可改善肥育豬的生產(chǎn)性能，使肥育豬的平均日增重提高、料重比降低，提高了肥育豬的細胞免疫水平和機體抗氧化能力[9]。用大豆素飼喂奶牛，提高了奶牛的總抗氧化能力[10]。這些研究顯示，目前大豆素在畜牧生產(chǎn)中的應用主要集中在奶牛、豬、雞等研究上，對肉牛影響研究相對較少，本試驗旨在研究日糧中添加大豆素對肉牛犢公牛生長性能、抗氧化能力及免疫性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗所用大豆素購買自陜西慈緣生物技術(shù)有限公司，純度>98%，其他技術(shù)指標如下：干燥損失<1%、灰分<0.1%、總重金屬(砷、鉛、鎘、汞)<10 μg/g、總菌落數(shù)<1 000 cfu/g。

1.2 試驗動物、日糧及設(shè)計

本試驗選取8頭健康狀況良好，平均體質(zhì)量為(143.8±5.6)kg的6月齡犢公牛。隨機分為2組，每組4頭牛。對照組牛飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組牛日糧額外添加300 mg/kg的大豆素。試驗共70 d，其中預試期10 d，正試期為60 d。肉牛單圈飼養(yǎng)，日飼兩次(08:00和18:00)，總飼喂量約為肉牛體質(zhì)量的2.6%，自由飲水。基礎(chǔ)飼糧精粗比為4∶6，組成及營養(yǎng)水平見表 1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))

每千克預混料含VA 150 000 IU,VD 320 000 IU,VE 3 000 IU,Fe 3 200 mg,Mn 1 500 mg,Zn 2 000 mg,Cu 650 mg,I 35 mg,Se 10 mg,Co 10 mg,Ca 130 g,P 30 g;綜合凈能、鈣和磷為計算值，其余為實測值

One kg of Premix contained the following:NEmf,Ca and P were calculated values,while others were measured values

1.3 樣品收集與分析

在正試期第1天和第60天分別對試驗犢?？崭狗Q質(zhì)量，記錄每頭牛初始質(zhì)量及末質(zhì)量。第60日晨飼前，用無抗凝血真空采血管對每頭牛頸靜脈采血15 mL，靜置30 min后3 500×g離心10 min，取上清液制備血清，于-20 ℃冷凍儲存。

采用試劑盒測定血清中低濃度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高濃度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，總膽固醇，甘油三酯等含量。葡萄糖氧化酶法測定血糖濃度[11]。血清尿素氮的測定用尿素/谷氨酸脫氫酶法。以上所有指標測定均在南昌第一附屬醫(yī)院，使用全自動生化分析儀完成。

總過氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量，采用南京建成生物研究所提供的試劑盒測定。

IgG,IgA,IgM，三碘甲狀腺氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)，生長激素(GH)，胰島素樣生長因子-I (IGF-I)，睪酮含量的測定，委托中英生物技術(shù)機構(gòu)完成。

數(shù)據(jù)處理與分析

所有數(shù)據(jù)在Excell表格中初步整理后，用SPSS 17.0中的單因素方差分析進行差異顯著性分析，P≤0.01表示差異極顯著，P≤0.05則為有差異顯著性趨勢。

2 結(jié)果分析

2.1 日糧添加大豆素對犢公牛生長性能的影響

由于限飼，每組犢牛每日干物質(zhì)采食量(DM)相似。然而如表2所示，與對照組相比，添加大豆素組犢牛的平均日增重高了97.1 g/d，差異顯著(P<0.05)。

表2 日糧添加大豆素對犢公牛生長性能的影響

2.2 日糧添加大豆素對犢公牛血清生化指標的影響

由表3可知，添加大豆素后，犢牛血清中血糖濃度、總膽固醇、DHL-C、LDL-C含量均低于對照組，其中DHL-C含量與對照組存在顯著差異(P≤0.05)，而血糖濃度更是達到極顯著水平(P<0.01)。甘油三酯和血清尿素氮含量較對照組高，其中血清尿素氮含量增加幅度達到了23.6%(P=0.039)。

表3 日糧添加大豆素對犢公牛血清生化指標的影響

2.3 日糧中添加大豆素對犢公牛血清抗氧化指標的影響

如表4所示，較對照組，日糧中添加大豆素使犢牛血清中T-SOD和GSH-Px濃度分別提高了12.2%(P=0.029)和15.5%(P=0.046)，對MDA的影響不明顯。

表4 日糧添加大豆素對犢公牛血清抗氧化指標的影響

2.4 日糧中添加大豆素對犢公牛血清免疫指標的影響

由表5可知，與對照組相比，犢牛日糧中添加大豆素，使血液中IgG和IgM含量顯著提高了27.5%(P=0.003)和11.4%(P=0.008)，對IgA的影響差異不顯著。

表5 日糧添加大豆素對犢公牛血清免疫指標的影響

2.5 日糧中添加大豆素對犢公牛血清內(nèi)源激素的影響

如表6所示，與對照組相比，添加大豆素組犢牛血清中內(nèi)源激素T4(P=0.017)和IGF-I(P<0.001)含量極顯著提高，其中IGF-I提高幅度達到了49.3%，但睪酮、T3和GH含量差異不顯著。

表6 日糧添加大豆素對犢公牛血清內(nèi)源激素的影響

3 討論與結(jié)論

大豆素具有廣泛的生物活性[12]，但其對肉牛的影響報道較少。本研究在肉用犢公牛上的結(jié)果顯示，日糧中添加大豆素顯著降低了試驗動物的血糖濃度，HDL-C和總膽固醇含量，此結(jié)果與zhao等[13]在成年閹牛上的研究結(jié)果一致。盡管大豆素在肉牛體內(nèi)降低血糖水平的代謝機理尚不清楚，但大豆素能加強小鼠體內(nèi)成肌細胞及脂肪細胞對血糖的攝取[14]，也許能解釋試驗組降低血糖水平的原因。試驗組血清尿素氮含量顯著高于對照組，與Roseler等[15]在奶牛上的研究結(jié)果一致。

自由基在免疫和信號轉(zhuǎn)導中起到重要作用，但過多自由基會引起細胞膜脂質(zhì)過氧化反應[16]，而機體抗氧化酶能消除自由基。T-SOD，GSH-Px和過氧化氫酶等均屬于抗氧化酶[17]。因此，抗氧化酶活性的測定對抗氧化作用有代表意義。本試驗結(jié)果表明，日糧中添加大豆素能顯著提高血清樣品中T-SOD和GSH-Px活性，說明大豆素能提高犢牛機體抗氧化水平，該結(jié)果與Liu等[18]在泌乳牛和Mishra等[19]在小鼠上的研究結(jié)果相似。

免疫反應與動物的健康狀況密切相關(guān)[20]。測定血清免疫球蛋白濃度是評估機體免疫水平最常規(guī)的方法。IgG和IgM可參與細胞吞噬等，在機體抗感染免疫過程中發(fā)揮重要作用，雖然IgA會抑制細胞吞噬，抗體依賴等[21]。但就本試驗中結(jié)果可知，試驗組IgG和IgM極顯著高于對照組，而IgA則差異不顯著，說明日糧中添加大豆素可顯著提高犢牛機體免疫水平。

GH和IGF-1對于機體生長發(fā)育非常重要[22-23]。研究表明，雌激素能影響GH/IGF-I功能發(fā)揮[24]，Breier等[25]和Coxam等[26]研究表明，外源性雌激素能提高牛的血清GH和IGF-I濃度。本研究中，試驗組IGF-I顯著高于對照組，與Kwon和Nam[27]用大豆素誘導MC3T3-El細胞的結(jié)果一致。本研究結(jié)果顯示，日糧中添加大豆素顯著提高了機體內(nèi)源激素T4含量，T3有降低的趨勢，與zhu等[28]在奶牛上的研究結(jié)果一致，也有部分研究結(jié)果顯示，添加大豆素對T3和T4無影響[29]，甚至作用效果相反[30]。

本研究結(jié)果顯示，較對照組，添加大豆素可提高犢牛平均日增重，這可能源自大豆素對機體的綜合影響，畢竟更好的生理機能保證其有更好的生長狀況。

日糧中添加大豆素增加了犢公牛的日增重，提高了血清T-SOD、GSH-Px、IgG、IgM、IGF-1的含量，表明大豆素能夠改善犢公牛的生產(chǎn)性能，增強犢公牛的抗氧化和免疫能力。