安捷倫食品安全之“僵尸肉”鑒別完整自動(dòng)化解決方案

“僵尸肉”一詞，最早源于2015年6月23日新聞報(bào)道的《走私“僵尸肉”竄上餐桌，誰之過？》一文?！敖┦狻庇捎谄淅鋬鰰r(shí)間長(zhǎng)、運(yùn)輸及儲(chǔ)存條件惡劣，容易滋生各種細(xì)菌，甚至發(fā)生腐爛。而這些肉一旦被搬上餐桌，將極大地危害消費(fèi)者的身體健康，所以需要對(duì)“僵尸肉”進(jìn)行極為嚴(yán)格的管控。

在監(jiān)管法規(guī)方面，目前GB 2707-2005 《鮮（凍）畜肉衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》和GB/ T 17238-2008 《鮮、凍分割牛肉》等標(biāo)準(zhǔn)多通過感官檢測(cè)的方法進(jìn)行判斷。但是感官檢測(cè)對(duì)人的感官靈敏度有較高要求，同時(shí)要求具有一定的檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)，需要長(zhǎng)期的積累，因此準(zhǔn)確性及科學(xué)性等方面存在一定問題。為有效改善冷鮮肉檢測(cè)當(dāng)前面臨的問題，急需建立科學(xué)的儀器檢測(cè)方法并逐步形成檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)來有效推動(dòng)“僵尸肉”的檢測(cè)與判別。

1 代謝組學(xué)用于鑒別“僵尸肉”的思路

代謝組學(xué)經(jīng)過20年的發(fā)展，已成為組間樣品小分子代謝物差異研究的一種重要手段，并在諸多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，如疾病發(fā)生發(fā)展、藥物開發(fā)與療效、轉(zhuǎn)基因作物等。代謝組學(xué)分為非靶向與靶向兩個(gè)研究層次：非靶向代謝組學(xué)通過全譜輪廓差異分析，尋找組間差異化合物并進(jìn)行鑒定；靶向代謝組學(xué)進(jìn)而對(duì)差異化合物進(jìn)行定量分析，實(shí)現(xiàn)大規(guī)模樣品的驗(yàn)證及差異濃度變化動(dòng)態(tài)范圍的研究。由于“僵尸肉”在冷凍時(shí)間、儲(chǔ)存條件等方面與鮮肉或鮮凍肉之間存在巨大差異，所以在化合物的組成方面也會(huì)存在顯著區(qū)別。M.K. Pettersen等學(xué)者2004年發(fā)表于Poultry Science的文章“Lipid Oxidation in Frozen， Mechanically Deboned Turkey Meat as Affected by Packaging Parameters and Storage Conditions”中指出，包裝以及儲(chǔ)存時(shí)間的差異會(huì)導(dǎo)致脂肪氧化水平的差異。Amy Elizabeth Johnson等學(xué)者2018年5月發(fā)表于Analytical Chemistry的研究文章“The Metabonomic Profiling of Chicken Eggs During Storage Using High Performance Liquid Chromatography Quadrupole Timeof-Flight Mass Spectrometry”中稱，代謝組學(xué)方法可以應(yīng)用于鑒別不同儲(chǔ)存時(shí)間的雞蛋，并且發(fā)現(xiàn)膽堿可以作為區(qū)分不同儲(chǔ)存時(shí)間的雞蛋的標(biāo)志物。同樣的方法學(xué)也可以應(yīng)用于“僵尸肉”的鑒別。

1.1 基于安捷倫UHPLC-QTOF的“僵尸肉”鑒別方案

基于UHPLC-QTOF技術(shù)的非靶向代謝組學(xué)可為全面了解“僵尸肉”在長(zhǎng)時(shí)間冷凍后成分的變化提供有效研究手段。首先，使用QTOF對(duì)樣品進(jìn)行全譜輪廓分析，盡可能采集所有代謝物響應(yīng)的信息，然后結(jié)合代謝組學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行峰提取、對(duì)齊、差異分析、差異化合物鑒定等流程分析，最終尋找并鑒定出“僵尸肉”長(zhǎng)時(shí)間存儲(chǔ)與反復(fù)凍融導(dǎo)致的變化成分，為“僵尸肉”的檢測(cè)提供靶標(biāo)。

除硬件外，鑒別“僵尸肉”還需專業(yè)的代謝組學(xué)分析軟件——Mass Profiler Professional（MPP），其是在分析質(zhì)譜數(shù)據(jù)中發(fā)現(xiàn)代謝物生物標(biāo)志的有效工具，可在大量樣品組和復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中方便地進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)的導(dǎo)入、歸一化和比較，包括GC/MS、LC/MS、CE/MS的多種數(shù)據(jù)。MPP軟件可整合多種數(shù)據(jù)庫對(duì)未知物進(jìn)行定性分析，如安捷倫獨(dú)有的Metlin、Fiehn及Nist、ChemIDPlus、Pubchem、HMP等公共數(shù)據(jù)庫。MPP軟件擁有用于統(tǒng)計(jì)分析、數(shù)據(jù)挖掘和可視化的綜合工具，包括：方差分析（ANOVA）、主成分分析（PCA）、t-檢驗(yàn)（t-tests）、火山圖、樹狀分級(jí)圖（系統(tǒng)樹圖）、自組織圖（SOM）、質(zhì)量閾值（QT）聚類、支持矢量設(shè)計(jì)（SVM）等。此外，MPP軟件支持KEGG、Wikipathway、BioCyc等全面的Pathway數(shù)據(jù)庫匹配，并可根據(jù)文獻(xiàn)記載自建Pathway，從而達(dá)到對(duì)代謝物之間的相互作用以及生物功能進(jìn)行研究的目的。

MPP結(jié)合了先進(jìn)的處理功能以及強(qiáng)大的統(tǒng)計(jì)和數(shù)學(xué)模型對(duì)復(fù)雜的質(zhì)譜數(shù)據(jù)集進(jìn)行分析。對(duì)于“僵尸肉”的鑒別分析，只需對(duì)一系列鮮肉、鮮凍肉以及“僵尸肉”的樣品進(jìn)行測(cè)試，使用這些檢測(cè)結(jié)果建立預(yù)測(cè)模型，然后僅需采集未知肉樣的數(shù)據(jù)放入所建模型，即可對(duì)該未知樣品進(jìn)行預(yù)測(cè)。

如果需要對(duì)“僵尸肉“與鮮肉或鮮凍肉之間存在差異的化合物進(jìn)行明確鑒定，用于后續(xù)的靶標(biāo)性分析，則可按照?qǐng)D3所示流程進(jìn)行相關(guān)分析。

1.2 基于安捷倫UHPLC-QQQ的“僵尸肉”靶標(biāo)化合物定量方案

M.K. Pettersen等學(xué)者2004年發(fā)表于Poultry Science的文章“Lipid Oxidation in Frozen， Mechanically Deboned Turkey Meat as Affected by Packaging Parameters and Storage Conditions”中提到，TBARS（硫代巴比妥酸反應(yīng)物）值在儲(chǔ)存時(shí)間不同的樣品組間存在顯著差異，因此可以用該類化合物作為靶標(biāo)進(jìn)行定量并作為判別樣品儲(chǔ)存時(shí)間的依據(jù)。利用QTOF尋找及鑒定差異化合物只是鑒別“僵尸肉”的一部分，若需進(jìn)一步確定特征化合物并對(duì)其進(jìn)行定量分析，可采用靶向代謝組學(xué)的方法。靶向代謝組學(xué)是有目標(biāo)的對(duì)體內(nèi)特定的一系列內(nèi)源性化合物進(jìn)行靶向定量檢測(cè)與差異比較研究的技術(shù)。三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜是靶向代謝組學(xué)的有利工具，在監(jiān)測(cè)復(fù)雜基質(zhì)中痕量物質(zhì)的濃度的變化研究、制定相應(yīng)的監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)中有巨大優(yōu)勢(shì)。

Agilent串聯(lián)四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀的全方位功能造就了最高靈敏度的性能，可輕易達(dá)到柱上fg級(jí)樣品的檢出限，配以全新多反應(yīng)采集模式：Dynamic MRM（dMRM）功能以及Triggered MRM（tMRM），可以在獲得高通量定量數(shù)據(jù)的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)定性功能。

在傳統(tǒng)的多化合物同時(shí)定量分析時(shí)，由于受到Dwell time（離子駐留時(shí)間）和色譜峰寬的制約，需要根據(jù)樣品的色譜分離情況設(shè)置多個(gè)time segment（時(shí)間窗口）以保證檢測(cè)的靈敏度和結(jié)果的重復(fù)性。但是隨著樣品復(fù)雜程度的增加，設(shè)置time segment具有眾多局限性，有可能會(huì)導(dǎo)致樣品檢測(cè)信息的丟失。Agilent最新推出的dMRM功能是市場(chǎng)上唯一一款成熟的無需設(shè)定time segment的MRM采集模式。在具備dMRM功能以及Dwell time低至1ms的基礎(chǔ)上，Agilent 6400型串聯(lián)四級(jí)桿液質(zhì)聯(lián)用儀，配以Agilent的高分辨快速液相色譜系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)15分鐘內(nèi)對(duì)300種靶標(biāo)化合物同時(shí)進(jìn)行高靈敏度、高重復(fù)性、高可靠性的準(zhǔn)確定量分析。Agilent 6400獨(dú)有的tMRM功能可以在定量的同時(shí)，自動(dòng)觸發(fā)完成二級(jí)離子檢測(cè)的定性工作，而且保證定量MRM的靈敏度不受損失。由于采用tMRM技術(shù)，因此很好的解決了以往串聯(lián)四極桿類質(zhì)譜必須分配時(shí)間來做二級(jí)離子掃描所帶來的定量靈敏度下降的問題。

靶向代謝組學(xué)的數(shù)據(jù)一樣可以在MPP中進(jìn)行差異比較，安捷倫最終提供整合非靶向和靶向代謝組學(xué)全流程分析的解決方案。

1.3 基于安捷倫Bravo自動(dòng)化液體處理平臺(tái)的高通量樣品前處理方案

代謝組學(xué)分析的一大特點(diǎn)就是樣品量大?；赒TOF的發(fā)現(xiàn)代謝組學(xué)應(yīng)用，需要大批量的樣品用于差異分析、模型建立等工作；基于QQQ靶向驗(yàn)證代謝組學(xué)，需要更廣泛的樣品驗(yàn)證與測(cè)定濃度變化動(dòng)態(tài)范圍，這將大大增加實(shí)驗(yàn)人員在樣品前處理部分所花費(fèi)的時(shí)間。

安捷倫Bravo自動(dòng)化液體處理平臺(tái)可在寬移液量范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確而精密的移液，從而改善數(shù)據(jù)的質(zhì)量和一致性。該平臺(tái)配置靈活，容易擴(kuò)展，使用戶具有更多的選擇，同時(shí)它獨(dú)特的開放式設(shè)計(jì)使其便于融入實(shí)驗(yàn)室的其他工作流程。在研究中使用Bravo平臺(tái)，可以讓用戶從花費(fèi)大量時(shí)間進(jìn)行手動(dòng)設(shè)置和復(fù)雜應(yīng)用中解放出來。

簡(jiǎn)而言之，基于UHPLC-QTOF、UHPLC-QQQ定性與定量質(zhì)譜硬件平臺(tái)與功能強(qiáng)大的MassHunter、Mass Profiler Professional等軟件所構(gòu)成的非靶向與靶向代謝組學(xué)完整工作流程，可有效識(shí)別“僵尸肉”長(zhǎng)期冷凍及反復(fù)凍融導(dǎo)致的成分變化，并對(duì)變化的濃度范圍提供定量分析。另外，結(jié)合Bravo自動(dòng)化解決方案，可以大大提高鑒別“僵尸肉”的工作效率。

2 安捷倫6545 QTOF的技術(shù)優(yōu)勢(shì)

Agilent于2014年推出新一代超高分辨率、質(zhì)量準(zhǔn)確度、靈敏度的四級(jí)桿飛行時(shí)間串聯(lián)液質(zhì)聯(lián)用儀，即6545型四級(jí)桿飛行時(shí)間串聯(lián)液質(zhì)聯(lián)用儀，并配以MassHunter、Mass Proflier Professional專業(yè)代謝組學(xué)軟件等質(zhì)譜軟件以及包括代謝物、毒物、農(nóng)殘等化合物數(shù)據(jù)庫，可對(duì)復(fù)雜基質(zhì)中的痕量未知化合物進(jìn)行快速準(zhǔn)確的鑒別。

安捷倫6545 QTOF具有卓越的MS/MS分析性能，加上先進(jìn)的分析軟件（包括數(shù)據(jù)處理工具），能迅速地對(duì)大部分具有挑戰(zhàn)性的復(fù)雜問題做出對(duì)應(yīng)方案。在代謝組學(xué)和蛋白組學(xué)研究中，6545 QTOF可用來發(fā)現(xiàn)和鑒定生物標(biāo)記物。優(yōu)異的分辨率、質(zhì)量準(zhǔn)確度、靈敏度以及動(dòng)態(tài)范圍等性能，能保證其結(jié)果科學(xué)、可靠。安捷倫6545 QTOF具有以下幾方面特色。

2.1 全新的設(shè)計(jì)理念：讓儀器更好的為數(shù)據(jù)服務(wù)

全新PSO技術(shù)：6545 QTOF采用了安捷倫專利的全自動(dòng)調(diào)諧校正系統(tǒng)。其采用的軟件控制，通過一鍵式操作模式，自動(dòng)進(jìn)行質(zhì)譜參數(shù)調(diào)諧及質(zhì)量軸校正，并將調(diào)諧結(jié)果自動(dòng)存儲(chǔ)為分析方法的一部分。在全自動(dòng)調(diào)諧基礎(chǔ)上，利用全新設(shè)計(jì)的PSO粒子群優(yōu)化技術(shù)，讓儀器更好的為數(shù)據(jù)服務(wù)。

無論是采用QTOF進(jìn)行定性分析還是定量分析，其數(shù)據(jù)基礎(chǔ)都是儀器提供的高準(zhǔn)確度質(zhì)量信息（即質(zhì)荷比m/z），一旦質(zhì)荷比數(shù)據(jù)產(chǎn)生偏差，定性及定量分析都會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果。對(duì)于QTOF而言，獲取高準(zhǔn)確度的質(zhì)量信息，需要借助參比標(biāo)樣進(jìn)行校正，而這一校正過程就發(fā)生在離子源部分。

Agilent公司的專利——垂直雙噴霧離子源采用樣品和參比標(biāo)樣都通過兩個(gè)噴針進(jìn)樣的方式，能夠很好的避免參比標(biāo)樣對(duì)待測(cè)樣品產(chǎn)生的離子抑制效應(yīng)，可以有效保證系統(tǒng)的靈敏度。且整個(gè)校正過程是通過儀器內(nèi)置的校正液自動(dòng)傳輸系統(tǒng)（CDS）完成的，整個(gè)過程無需人工參與，所獲取的數(shù)據(jù)即為經(jīng)過校正的準(zhǔn)確質(zhì)量信息。

全新設(shè)計(jì)的安捷倫脈沖發(fā)生器，能實(shí)現(xiàn)更好的動(dòng)態(tài)溫度監(jiān)控和補(bǔ)償技術(shù)。安捷倫脈沖發(fā)生器具有獨(dú)特的動(dòng)態(tài)溫度監(jiān)控技術(shù)和補(bǔ)償技術(shù)，在儀器長(zhǎng)期運(yùn)行過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，確保每個(gè)離子束的加速能量都恒定不變，進(jìn)一步降低離子束擴(kuò)散，從而達(dá)到最佳質(zhì)量的準(zhǔn)確度，并獲得更高的分辨率和穩(wěn)定性。

全新離子光學(xué)系統(tǒng)：新型幾何設(shè)計(jì)的len2透鏡以及更加靈活的離子束壓縮和成形（IBCS）技術(shù)，可提高進(jìn)入TOF離子數(shù)量，在保證超高分辨率的同時(shí)，極大提升靈敏度，同時(shí)進(jìn)一步提高離子光學(xué)系統(tǒng)的抗污染能力，縮短維護(hù)周期。

專利的離子束壓縮技術(shù)（ I o n Beam Compression，IBC）：離子束壓縮技術(shù)通過離子傳輸系統(tǒng)以及四級(jí)桿的離子壓縮并有效冷卻，從而獲得了更高密度、擴(kuò)散更小的離子束，并引導(dǎo)至脈沖加壓區(qū)域，這些狹窄的冷卻離子束使6545 QTOF達(dá)到45000分辨率的同時(shí)，保持超高的靈敏度。

新型長(zhǎng)壽命檢測(cè)器：使用新一代檢測(cè)器，極大延長(zhǎng)檢測(cè)器壽命，同時(shí)不損失高靈敏度和寬動(dòng)態(tài)范圍。6GHz高速檢測(cè)器和ADC技術(shù)源于Agilent電子測(cè)量部門領(lǐng)先全球的高速示波器技術(shù)，ADC技術(shù)使質(zhì)譜檢測(cè)器可檢測(cè)并采集所有到達(dá)檢測(cè)器的離子信息，相對(duì)于傳統(tǒng)的時(shí)間數(shù)字轉(zhuǎn)換模式即TDC技術(shù)，可實(shí)現(xiàn)更寬的掃描內(nèi)動(dòng)態(tài)范圍、更高的質(zhì)量準(zhǔn)確度和更高的質(zhì)譜分辨率。

2.2 出色的性能表現(xiàn)：篩查定量、同步實(shí)現(xiàn)

超高分辨率——分辨率45000FWHM以上：Agilent QTOF無需犧牲采集速度和靈敏度，在全質(zhì)量范圍內(nèi)均可實(shí)現(xiàn)超高分辨率。對(duì)于小分子和大分子的復(fù)雜樣品分析，如植物提取物及蛋白質(zhì)分析，具有更高的結(jié)果可靠性。

優(yōu)異質(zhì)量穩(wěn)定性——質(zhì)量誤差<0.3ppm：在保證高靈敏度、高分辨率和高采集速度的前提下，仍保證優(yōu)異的質(zhì)量準(zhǔn)確度。安捷倫QTOF的飛行管使用膨脹系統(tǒng)極小的航天用飛行材料制成，并帶有真空隔熱夾套設(shè)計(jì)，電路系統(tǒng)亦進(jìn)行溫度敏感性處理，因此具有良好的環(huán)境溫度變化穩(wěn)定性。經(jīng)測(cè)試，Agilent QTOF在環(huán)境溫度變化±10℃、濕度15%～95%條件下，質(zhì)量準(zhǔn)確度依然可以保證<0.25ppm，是業(yè)界少有的能達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)的廠家。

2.3 強(qiáng)大的專業(yè)軟件及數(shù)據(jù)庫平臺(tái)

MassHunter軟件獨(dú)特的分子特征提取算法：Agilent MFE軟件功能可根據(jù)采集所得質(zhì)譜數(shù)據(jù)的保留時(shí)間以及精確質(zhì)量數(shù)，將化合物的相關(guān)質(zhì)譜信息如M+H、M+Na、M+K、2M+H等分子特征信息從海量的質(zhì)譜數(shù)據(jù)中提取出來，可簡(jiǎn)化操作并大大提高質(zhì)譜工作人員的效率，提高痕量化合物的檢出率，增加發(fā)現(xiàn)代謝物的數(shù)量。

完整的同位素計(jì)算軟件：對(duì)于小分子的質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析來說，同位素信息有時(shí)比準(zhǔn)確的質(zhì)量更為重要。同一準(zhǔn)確質(zhì)量往往可推算出多個(gè)不同元素組成的分子式，如果缺失同位素信息或同位素計(jì)算不準(zhǔn)確，就無法判斷最終分子式結(jié)果。Agilent可自動(dòng)計(jì)算每個(gè)分子式的同位素豐度，并與理論同位素豐度比對(duì)，可以模擬化合物的理論同位素質(zhì)譜圖軟件；自動(dòng)與分子式計(jì)算功能關(guān)聯(lián)進(jìn)行元素組成確認(rèn)；通過精確質(zhì)量、同位素豐度比、同位素精確質(zhì)量比及MS/MS四維信息可靠關(guān)聯(lián)分析，給出最終結(jié)構(gòu)信息。

3 安捷倫6470 QQQ的技術(shù)優(yōu)勢(shì)

3.1 創(chuàng)新的硬件設(shè)計(jì)，高質(zhì)量數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)

超高靈敏度離子源（專利的噴射流離子聚焦技術(shù)）：對(duì)于串聯(lián)四極桿質(zhì)譜而言，最主要的性能指標(biāo)就是靈敏度。6470串聯(lián)四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀可配備Agilent專利的噴射流離子聚焦源（Jet Stream），借助離子聚焦技術(shù)，可以大大提高離子化效率和離子傳輸效率，使6470具有行業(yè)內(nèi)最優(yōu)異的靈敏度和線性范圍。

另外，Agilent的液質(zhì)聯(lián)用儀是市場(chǎng)上唯一不需要根據(jù)液相條件調(diào)節(jié)噴霧針位置的液質(zhì)產(chǎn)品——噴霧針位置采用出廠預(yù)優(yōu)化設(shè)計(jì)，無需人工調(diào)節(jié)，操作便捷，且能夠保證數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性。離子源接口適應(yīng)全流速范圍，液相無需分流，同時(shí)保持高靈敏度和優(yōu)異的抗污染能力。從操作安全角度出發(fā)，Agilent離子源采用獨(dú)有的噴霧針零電位設(shè)計(jì)，能夠最大程度保證操作安全。

全新設(shè)計(jì)高傳輸離子光學(xué)組件：離子傳輸路徑的優(yōu)化對(duì)于儀器的靈敏度提升也非常關(guān)鍵，安捷倫6470 QQQ采用預(yù)四極桿取代了原來的離子透鏡，提升了離子傳輸?shù)男?，從而進(jìn)一步提高了儀器的靈敏度。

專利的加熱控溫雙曲面四極桿，保證四極場(chǎng)穩(wěn)定性及抗污染能力：串聯(lián)四極桿質(zhì)譜的核心部件就是四極桿質(zhì)量分析器。目前，市場(chǎng)上的四極桿主要有雙曲面和圓柱形兩種，而Agilent的串聯(lián)四極桿質(zhì)譜所采用的四極桿為雙曲面四極桿，其四極場(chǎng)純度高于圓柱形四極桿。

四極場(chǎng)是四極桿質(zhì)譜工作的基礎(chǔ)，而四極場(chǎng)主要受兩方面因素的影響：電壓和四個(gè)電極的相對(duì)位置。電壓波動(dòng)會(huì)造成四極場(chǎng)的變化，這一影響因素可以通過穩(wěn)壓電源等進(jìn)行消除。能夠?qū)е码姌O相對(duì)位置發(fā)生變化的主要是溫度，溫度變化能夠?qū)е滤臉O桿熱脹冷縮，從而影響四極場(chǎng)。Agilent的四極桿具有專利的加熱控溫設(shè)計(jì)，能夠?qū)⑺臉O桿的溫度恒定在100℃，從而消除溫度對(duì)于四極場(chǎng)的影響，確保四極場(chǎng)長(zhǎng)期處于穩(wěn)定的狀態(tài)。這一專利設(shè)計(jì)可以確保實(shí)現(xiàn)對(duì)極為復(fù)雜的基質(zhì)中極低含量化合物的準(zhǔn)確檢測(cè)。

另外，100℃加熱處理使四極桿表面的分子熱力學(xué)運(yùn)動(dòng)更加劇烈，污染物不容易吸附在四極桿上，從而起到了很好的抗污染的作用，所以Agilent的四極桿可以做到免維護(hù)，這是其他任何廠家的質(zhì)譜都無法做到的。

90彎曲的六極桿碰撞池：在6470 QQQ中，綜合考慮離子聚焦以及離子的傳輸效率，保留了六極桿碰撞池以及線性加速的設(shè)計(jì)，新增90°直角彎曲設(shè)計(jì)。其一方面可以降低儀器的占地面積，另一方面可以減少中性粒子造成的背景噪音，提高儀器的信噪比。而且在碰撞池的入口端開口比出口端大，可以保證接收更多由第一級(jí)四極桿過來的母離子，以及更好地聚焦由碰撞池產(chǎn)生的二級(jí)碎片離子。

全新設(shè)計(jì)的高能打拿極檢測(cè)器：近年來，液質(zhì)QQQ的正離子靈敏度已經(jīng)足夠高，且能夠滿足各種應(yīng)用的需要，但是負(fù)離子的靈敏度略顯不足，各家液質(zhì)的研發(fā)都圍繞提高負(fù)離子的靈敏度進(jìn)行。安捷倫最新設(shè)計(jì)的高能打拿極采用超低噪音的設(shè)計(jì)，并將其能量提高一倍，顯著提高了負(fù)離子的靈敏度和低濃度的重復(fù)性。

3.2 功能強(qiáng)大的軟件，簡(jiǎn)化操作，保證結(jié)果的可信度

全自動(dòng)質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化軟件：Masshunter Optimzer質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化軟件是市場(chǎng)上唯一一款可使用自動(dòng)進(jìn)樣器、注射泵等多種進(jìn)樣方式對(duì)小分子化合物（如內(nèi)源性代謝物、農(nóng)殘及獸殘等）和大分子化合物（如多肽等）質(zhì)譜參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化的軟件，并且優(yōu)化后的參數(shù)可存儲(chǔ)在數(shù)據(jù)庫中。當(dāng)建立目標(biāo)化合物定量分析方法時(shí)，可從數(shù)據(jù)庫將優(yōu)化后的質(zhì)譜參數(shù)直接導(dǎo)入采集方法，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)庫與采集方法的無縫連接。

自動(dòng)方法編輯動(dòng)能——?jiǎng)討B(tài)MRM（Dynamic MRM，dMRM）功能：在傳統(tǒng)的多化合物同時(shí)定量分析時(shí)，由于受到Dwell time（離子駐留時(shí)間）和色譜峰寬的制約，需要根據(jù)樣品的色譜分離情況設(shè)置多個(gè)time segment（時(shí)間窗口），以保證檢測(cè)的靈敏度和結(jié)果的重復(fù)性。但是隨著樣品復(fù)雜程度的增加，設(shè)置time segment具有眾多的局限性，有可能會(huì)導(dǎo)致樣品檢測(cè)信息的丟失。Agilent最新推出的DMRM功能是市場(chǎng)上唯一一款成熟的無需設(shè)定time segment的MRM采集模式：在具備DMRM功能以及Dwell time低至1ms的基礎(chǔ)上，Agilent 6400型串聯(lián)四級(jí)桿液質(zhì)聯(lián)用儀，配以Agilent的高分辨快速液相色譜系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)15分鐘內(nèi)對(duì)300種農(nóng)殘同時(shí)進(jìn)行高靈敏度、高重復(fù)性、高可靠性的準(zhǔn)確定量分析。

同時(shí)定量及定性確證功能——觸發(fā)式MRM（Triggered MRM，tMRM）功能：在實(shí)際樣品檢測(cè)中，假陽性干擾是經(jīng)常遇到的問題。在對(duì)化合物進(jìn)行準(zhǔn)確定量的同時(shí)，還需要采用一定的手段對(duì)信號(hào)進(jìn)行定性確認(rèn)，以避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。

觸發(fā)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（tMRM）是一種能夠在所有安捷倫三重串聯(lián)四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)上使用的分析方法。tMRM以化合物的碎片離子作為識(shí)別化合物的身份信息，在進(jìn)行分析時(shí)以MRM模式自動(dòng)采集化合物的碎片離子信息并整合為一張譜圖，該子離子譜圖可以用于譜庫鑒定和確認(rèn)，并自動(dòng)進(jìn)行匹配度計(jì)算。tMRM分析縮短了分析時(shí)間，提高了分析通量，只需一臺(tái)儀器和一次進(jìn)樣即可實(shí)現(xiàn)快速、靈敏的定量和定性分析。且由于tMRM的子離子信息采集時(shí)采用的是MRM模式，所以即使在極低含量水平時(shí)，依然能夠采集到有效的定性圖譜。

4 安捷倫Bravo自動(dòng)化系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)

移液的高精準(zhǔn)度：安捷倫Bravo自動(dòng)化液體處理平臺(tái)是目前功能最豐富、速度最快、精密度最高的緊湊型系統(tǒng)之一。Bravo有3種移液頭：①384ST-384通道小體積移液頭：移液范圍300nL～70μL。②96ST-96通道小體積移液頭：移液范圍300nL～70μL。③96LT-96通道大體積移液頭：移液范圍2μL～250μL。安捷倫Bravo自動(dòng)化液體處理平臺(tái)能夠移取低至300nL的液體，確保CV<5%。

靈活使用和易于維護(hù)的移液頭：Bravo移液頭是目前市場(chǎng)上最易于更換的移液頭之一，只需解除3個(gè)鎖扣，即可實(shí)現(xiàn)取下并更換移液頭，實(shí)驗(yàn)人員均可以輕松掌握，而無需專業(yè)人員上門即可快速更換。易于更換的移液頭方便了用戶針對(duì)不同應(yīng)用，靈活選用不同通道、不同移液范圍的移液頭；擴(kuò)展了平臺(tái)的功能，確保了相應(yīng)移液范圍的移液精準(zhǔn)度。Bravo的移液頭可以靈活選取吸頭，支持全部、單行/多行、單列/多列、矩陣、單根吸頭模式，滿足各種不用應(yīng)用需求。另外，它的每個(gè)活塞相互獨(dú)立，可對(duì)單個(gè)移液通道進(jìn)行維護(hù)，有效降低維護(hù)成本。

圖標(biāo)式操作軟件：自動(dòng)化控制軟件VWorks具有圖標(biāo)式的特點(diǎn)，簡(jiǎn)單易學(xué)，即使沒有自動(dòng)化液體處理工作站使用經(jīng)驗(yàn)，也可以輕松入門，掌握protocol編輯方法。VWorks還擁有豐富的可編輯參數(shù)，滿足各種不同液體性質(zhì)的處理需求，支持表單控制，讓操作變得更加簡(jiǎn)單。

設(shè)計(jì)精巧：Bravo設(shè)計(jì)非常緊湊，采用節(jié)省空間的九臺(tái)板設(shè)計(jì)，占地面積小，適合放置于層流凈化罩中進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)或?qū)τ卸驹噭┳鲎詣?dòng)化液體處理。

臺(tái)面配件豐富，功能全面：Bravo平臺(tái)具有9個(gè)板位，可容納60多種附件。其具有多個(gè)可選擇板塊，可選振蕩器模塊：可進(jìn)行震蕩混合，實(shí)現(xiàn)振蕩+吹打混勻同時(shí)進(jìn)行；可選半導(dǎo)體溫控模塊：能夠在大約4～100℃范圍內(nèi)提供溫度循環(huán)；可選制冷循環(huán)溫控模塊：溫控范圍-5～50℃，溫度控制可精確至±0.1℃，確保整個(gè)微孔板的熱均一性；可選真空過濾臺(tái)板：實(shí)現(xiàn)廢物過濾和過濾液收集應(yīng)用，使分離變得簡(jiǎn)單、快速且高效。另有眾多配件可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇。

使用安全：Bravo單機(jī)儀器均配有基于紅外的LED安全光簾，以及緊急制動(dòng)按鈕，從而提高操作的安全性。系統(tǒng)暫停后仍可從斷點(diǎn)處繼續(xù)，增加操作安全性的同時(shí)不影響實(shí)驗(yàn)流程。