頭孢克洛緩釋片處方開發(fā)及釋放度一致性研究

魏京璐，楊淑慎，王曉峰

(1.西北農林科技大學，陜西 楊凌 712100；2.揚子江藥業(yè)集團有限公司，江蘇 泰州 225300)

頭孢克洛，屬于2代口服頭孢抗生素，其化學名稱為：(6R ,7R)-7-[(R)-2-氨基-2-苯乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸一水合物，即頭孢氨芐第三位碳原子上的甲基被Cl所取代，因此又稱頭孢氯氨芐，分子式：C15H14ClN3O4S·H2O，頭孢克洛的化學結構式：

圖1 頭孢克洛結構式Fig.1 Structure of Cefaclor

頭孢克洛于1976年由美國禮來公司研制開發(fā)。具有抗菌作用強、耐青霉素酶，臨床療效高，毒性低等優(yōu)點。目前頭孢克洛國內市場已上市劑型有片劑、膠囊劑、顆粒劑、緩釋微丸、緩釋片、分散片等多個劑型。本文選擇的參比制劑是由美國禮來公司研制開發(fā)的頭孢克洛緩釋片(II)，商品名為CECLOR?，規(guī)格為375mg。本品采用濕法制粒的工藝，參照文獻以羥丙甲纖維素為阻滯劑、乳糖為填充劑、80%乙醇溶液為粘合劑及硬脂酸鎂為潤滑劑[1]，并對羥丙甲纖維素型號、規(guī)格進行了篩選，最終確定選用羥丙甲纖維素(K4M)為緩釋材料。選擇4%聚維酮K30的無水乙醇溶液作為粘合劑。文獻顯示，乳糖等還原性糖與頭孢克洛會發(fā)生Maillard反應生成棕色產物[2]，且乳糖含一分子結晶水，不適宜作為濕敏性藥物的填充劑，故選取微晶纖維素(M101)及甘露醇來進行填充劑的篩選。

本文通過正交實驗方法進行了頭孢克洛緩釋片處方組成及用量的篩選，確定了頭孢克洛緩釋片處方，并對產品與參比制劑進行釋放度曲線對比，以判斷兩者體外釋放度的一致性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 試劑

0.1mol/L的稀鹽酸；pH值4.0醋酸鹽緩沖液；pH值6.8磷酸鹽緩沖液；參比制劑—?？虅? 頭孢克洛緩釋片Ⅱ(禮來蘇州制藥有限公司)規(guī)格：0.375g；頭孢克洛對照品—中國藥品生物制品檢定所，含量：93.2%。

1.1.2 儀器

立式濕法混合制粒機HLSY-10型：上海心意制藥機械設備有限公司；搖擺顆粒機YK-100/160型：南京東隆機械科技有限公司；熱風循環(huán)烘箱RXH型：南京東隆機械科技有限公司；壓片機ZP15D：上海天峰制藥設備有限公司；溶出儀ZRS-8G：天津市天大天發(fā)科技有限公司；高效液相Agilent1200：安捷倫；電子天平AL204：梅特勒-托利多。

1.2 方法

1.2.1 處方制備方法

按照處方稱取原輔料，將稱取的原輔料(不包括粘合劑、潤滑劑)混合后加入實驗用小型濕法制粒機，干混10min，然后緩慢加入粘合劑，制粒3～4min。取出濕顆粒，用24目篩網在搖擺整粒機整粒，然后用熱風循環(huán)烘箱，50℃干燥30～40min。取出干燥顆粒，混入硬脂酸鎂。取混合后顆粒用壓片機壓片。取所得素片檢測片重差異、釋放度。實驗篩選處方過程中共使用了九種處方，見表1。

1.2.2 釋放度檢驗方法

取本品，按照《中國藥典》2015版四部通則0931釋放度測定法，采用溶出度測定法第一法(籃法)的裝置，轉速為100r/min，在1h、2h與4h分別取溶液7mL，濾過，并及時在操作容器中補充上述釋放介質7mL；分別精密量取續(xù)濾液3mL，各置50mL量瓶中，釋放介質稀釋至刻度，照紫外-可見分光光度法，在267nm的波長處分別測定吸光度；另取頭孢克洛對照品適量，用釋放介質制成每1mL中約含25μg頭孢克洛的溶液，同法測定，分別計算出每片在不同時間的釋放度[3]。

表1 頭孢克洛緩釋片Ⅱ處方篩選Table 1 Prescription Screening of Cefaclor Sustained-releaseTablets II

2 結果與分析

2.1 處方篩選

按方法1.2.1制備處方，根據表1的處方組成及用量配比共制備了九組處方，壓片后按照1.2.2方法分別檢測每組處方產品的釋放度，結果見表2。

表2 頭孢克洛緩釋片(Ⅱ)處方篩選結果Table 2 Prescription Screening of Cefaclor Sustained-releaseTablets II

由表2得知處方1和處方2樣品釋放度無明顯差異，微晶纖維素(M101)作為填充劑可壓性優(yōu)于甘露醇，所以選擇微晶纖維素(M101)為填充劑。

根據參比制劑釋放度測定結果，我們對羥丙甲纖維素(K4M)的用量進行了篩選(處方3和處方4)，結果顯示單獨采用羥丙甲纖維素(K4M)作為阻滯劑難以與參比制劑體外釋藥行為一致，故我們加入低黏度級別的羥丙甲纖維素E5和K100來調節(jié)本品的釋藥曲線。又處方5和處方6結果可以看出羥丙甲纖維素E5更優(yōu)，釋放度更接近，通過聯(lián)合使用羥丙甲纖維素(K4M)和羥丙甲纖維素(E5)，根據處方7、8、9調節(jié)用量配比，由結果可以看出處方9所制得的樣品與參比制劑在0.1mol/L鹽酸溶液中1h,2h,4h釋放度均相似，所以確定處方9為最優(yōu)處方。

2.2 釋放度對比研究

為研究工藝驗證產品與原研產品體外釋藥曲線的相似程度，我們采購了禮來蘇州制藥有限公司生產的?？虅? 頭孢克洛緩釋片Ⅱ作為參比制劑，選取了一批產品為受試制劑，檢測了他們在三種釋放介質中的釋放度[3]，進行體外釋藥曲線相似性評價。

圖2 水中釋放度曲線對比Fig.2 Comparison of release curves in water

圖3 0.1mol/L鹽酸溶液中釋藥曲線Fig.3 Drug release curve in 0.1mol/L hydrochloric acid solution

圖4 pH值4.0醋酸鹽緩沖液中釋藥曲線Fig.4 Drug release profile in pH4.0 acetate buffer

按照制定的處方工藝制作的產品與參比制劑在水、0.1mol/L鹽酸溶液及pH值4.0醋酸鹽緩沖液中體外釋藥曲線均相似[4]，相似因子f2分別為82、85及87，符合國家規(guī)定，體外釋放度相似。

3 結論

頭孢克洛對濕熱較敏感，本品現行工藝有效避免了主藥與水的接觸，并減小了溫度的影響，從而保證了產品質量；本實驗用微晶纖維素代替了文獻中的乳糖做為填充劑，有效避免了貯存期間頭孢克洛與乳糖發(fā)生美拉德反應的風險，保證了產品的質量穩(wěn)定。經檢測，本品與參比制劑在水、0.1mol/L鹽酸溶液及pH值4.0醋酸鹽緩沖液中的釋藥曲線均相似，相似因子均達到80%以上，且批間差異小，由此可以推斷采用研究中的處方制備的樣品與參比制劑體外釋放度相似[5]。

4 討論

頭孢克洛緩釋片是目前國內2代口服抗生素類中應用較為廣泛的一個劑型，該產品以服用次數少、藥效優(yōu)良而廣泛應用于市場。但是國內仿制藥市場的質量和療效良莠不齊嚴重影響了市場的發(fā)展和空間。原研藥在藥效方面雖然具備較大的優(yōu)勢，但是因為其價格居高不下，為醫(yī)保增加了較大的經濟負擔。

自國家2016年開始大力推行一致性評價以來，頭孢克洛的相關制劑做為第一批進入289目錄的產品，受到了廣大制藥行業(yè)的關注。能夠獲得與原研一致的質量和療效，是國產仿制藥彎道超車的良機，同時也是行業(yè)內以質量和療效為標準進行的新一輪洗牌。相信隨著一致性評價的持續(xù)推進，國內的仿制藥能夠快速獲得與原研藥同等的質量，進而為國內患者的健康帶來重大的福利和改善。