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    調(diào)味品中玫瑰紅B的檢驗(yàn)方法優(yōu)化

    2018-09-10 08:58:58朱輝,陶相錦,王魯霞
    食品安全導(dǎo)刊 2018年23期
    關(guān)鍵詞:玫瑰紅羅丹明液相

    現(xiàn)狀及危害

    玫瑰紅B又稱羅丹明B、堿性玫瑰精,俗稱花粉紅,是一種鮮桃紅色的人工合成染料。經(jīng)老鼠試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),羅丹明B會引起皮下組織生肉瘤,被懷疑是致癌物。衛(wèi)生部《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單》第一批中禁止玫瑰紅B(羅丹明B)用作調(diào)味品著色。但為了獲得好的賣相,玫瑰紅B(羅丹明B)的濫用現(xiàn)象依舊存在于食品領(lǐng)域,但調(diào)味品中玫瑰紅B(羅丹明B)的檢測目前沒有國家標(biāo)準(zhǔn),只有針對進(jìn)出口食品的SN/T 2430-2010《進(jìn)出口食品中羅丹明B的檢測方法》,該標(biāo)準(zhǔn)采用乙酸乙酯/正己烷=1:1提取,GPC凈化,耗時(shí)長、成本高、回收率最高只能達(dá)到70%,且容易交叉污染。

    目前檢測方法探索

    關(guān)于玫瑰紅B(羅丹明B)的檢測方法,目前國內(nèi)外主要集中在檢測方法的選擇、提取試劑的選擇、凈化方法的選擇、本底分析判定、快速檢測試劑盒的研究等方面。檢測方法集中在薄層色譜法、液相色譜紫外檢測法、液相色譜熒光檢測法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法,提取試劑有傳統(tǒng)的乙酸乙酯/環(huán)己烷體系,還有創(chuàng)新改進(jìn)的乙腈、酸化乙腈、乙醇/水、乙醇一氨水等,凈化方法除凝膠外,多集中在固相萃取,如C18、MCX、PCX固相萃取等,固相萃取可以得到比較干凈的待測液,但步驟相對繁瑣。

    實(shí)驗(yàn)室方法優(yōu)化

    優(yōu)化說明

    針對目前玫瑰紅B檢驗(yàn)的這些問題,實(shí)驗(yàn)室在原標(biāo)準(zhǔn)方法的基礎(chǔ)上,優(yōu)化了檢驗(yàn)方法,改變了提取試劑和凈化方法,提取試劑采用價(jià)格便宜的甲醇溶液,凈化方法采用quechers方法配備的凈化管(150mgMgSO4、50mgPSA、50mgC18混合)凈化,大大節(jié)省了成本、提高了效率。

    液質(zhì)聯(lián)用采用C18柱,甲醇/0.1%甲酸水作為流動相梯度淋洗可得到干擾較少的峰。經(jīng)檢驗(yàn),實(shí)驗(yàn)室方法最高回收率達(dá)到99.5%,在0.5ng/mL~50ng/mL范圍內(nèi),相關(guān)系數(shù)為0.995,重現(xiàn)性良好。陽性樣品對比,未折回收率時(shí),優(yōu)化方法的結(jié)果比采用SN/T 2430-2010、GB/T23496-2009和地方標(biāo)準(zhǔn)的高,折完回收率二者結(jié)果相當(dāng),證明甲醇做作為提取劑可充分提取所測物質(zhì),而MgSO4/PSA/C18作為凈化劑在凈化的基礎(chǔ)上對物質(zhì)的回收影響不大,可采用這種提取和凈化方法。

    對甲醇提取時(shí)間和提取次數(shù)的優(yōu)化探索實(shí)驗(yàn)見表1,通過回收率的計(jì)算,最終選定10mL甲醇超聲1h,提取1次。

    表1 不同提取條件下玫瑰紅B的回收率

    實(shí)驗(yàn)步驟

    提取

    稱取1.00g樣品(精確至0.01g)于50mL 離心管中,準(zhǔn)確加入10mL 甲醇(3.1),于旋渦混勻器上混合提取1min,再超聲提取60min后,于4000r/min離心5min,取上清液1mL于凈化管中(3.3)凈化后,離心,過0.22μm微孔濾膜后進(jìn)液相色譜-質(zhì)譜儀。測定

    液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜條件

    a) 色譜柱:C18柱,2.1mm(內(nèi)徑)×100mm,1.7μm,或相當(dāng)者;

    b) 流動相:乙腈——0.1%甲酸,梯度洗脫程序見表2;

    表2 流動相梯度洗脫程序

    c) 流速:0.30mL/min;

    d) 柱溫:40 ℃;

    e) 進(jìn)樣量:5μL;

    f) 離子源:電噴霧離子源;

    g) 掃描方式:正離子;

    h) 檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM);

    i) 質(zhì)譜/質(zhì)譜圖見圖1

    圖1 玫瑰紅B的質(zhì)譜圖

    結(jié)果分析

    本實(shí)驗(yàn)室通過對150批次辣椒粉、50批次火鍋底料、3批次調(diào)味醬的檢測結(jié)果顯示,基質(zhì)對本方法的影響不大,能保證較高的回收率,經(jīng)凈化管凈化,可得到較干凈的待測液,回收率高,重現(xiàn)性好,測定低限均為0.005mg/kg,可用于調(diào)味品中玫瑰紅B的檢驗(yàn)。

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